[發(fā)明專利]修飾的EL188內(nèi)溶素序列

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201480062331.6
• 申請(qǐng)日: 2014-11-14
• 公開（公告）號(hào): CN105793420A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: I·阿諾索娃
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 萊桑多公司
• 主分類號(hào): C12N9/36
• 分類號(hào): C12N9/36;C12N15/62;A61K38/00
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494
• 代理人: 封新琴

本發(fā)明涉及多肽，其包含與SEQIDNO:1的序列顯示至少約90％的序列同一性的 氨基酸序列。所述多肽優(yōu)選地降解革蘭氏陰性細(xì)菌，特別是假單胞菌屬(Pseudomonas)和/ 或彎曲桿菌屬(Campylobacter)細(xì)菌的肽聚糖。此外，本發(fā)明涉及編碼這樣的多肽的核酸， 包含這樣的核酸的載體，和相應(yīng)的宿主細(xì)胞。最后，本發(fā)明涉及包含根據(jù)本發(fā)明的此類多 肽、核酸、載體和/或宿主細(xì)胞的組合物。

巨大的裂解性肌尾噬菌體科噬菌體(giant,lyticMyoviridaebacteriophage) EL(211215bp)會(huì)感染銅綠假單胞菌，感染銅綠假單胞菌是一種重要的機(jī)會(huì)院內(nèi)病原體，對(duì) 很多常用的抗生素具有耐藥性，因此在醫(yī)院環(huán)境中造成了相當(dāng)大的擔(dān)憂。2007年，Briers等 人(MolecularMicrobiology(2007)65(5),1334–1344)對(duì)所述噬菌體的基因組進(jìn)行了測(cè) 序，并鑒定了內(nèi)溶素EL188，一種高度裂解性的肽聚糖水解酶。WO2010/149792中提出了利 用包含所述內(nèi)溶素序列作為酶促元件的融合蛋白來(lái)降解革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁。

盡管所述內(nèi)溶素和融合蛋白一般而言是有效的，但事實(shí)證明，對(duì)于一些技術(shù)應(yīng)用， 該內(nèi)溶素多肽表現(xiàn)出差強(qiáng)人意的特征，特別是在穩(wěn)定性和加工方面。因此，在本領(lǐng)域中需要 在這個(gè)方面顯示出優(yōu)選改進(jìn)的特性的更多內(nèi)溶素酶。因此，本發(fā)明的問(wèn)題就是提供這樣的 多肽。

這個(gè)問(wèn)題被附加權(quán)利要求中記載的主題所解決。

下面將給出附圖的簡(jiǎn)要描述。附圖的目的是更加詳細(xì)地圖示本發(fā)明。然而，它們并 不意圖在任何程度上對(duì)本發(fā)明的主題內(nèi)容構(gòu)成限制。

圖1：圖示了：

SEQIDNO:1,

SEQIDNO:2沒(méi)有N端甲硫氨酸的EL188內(nèi)溶素，

SEQIDNO:3EL188內(nèi)溶素。

圖2：圖示了：

SEQIDNO:144KRKKRKKRK的融合蛋白(用實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:40),沒(méi)有N 端甲硫氨酸且具有S120G的修飾EL188(用半點(diǎn)/半實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:20)和His-標(biāo) 簽(用點(diǎn)下劃線標(biāo)出，SEQIDNO:143)。

SEQIDNO:145KRKKRKKRK的融合蛋白(用實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:40),沒(méi)有N 端甲硫氨酸且具有A126E和T128K的修飾EL188(用半點(diǎn)/半實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:21)和 His-標(biāo)簽(用點(diǎn)下劃線標(biāo)出，SEQIDNO:143)。

SEQIDNO:146KRKKRKKRK的融合蛋白(用實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:40),沒(méi)有N 端甲硫氨酸且具有W134I的修飾EL188(用半點(diǎn)/半實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:22)和His-標(biāo) 簽(用點(diǎn)下劃線標(biāo)出，SEQIDNO:143)。

SEQIDNO:147KRKKRKKRK的融合蛋白(用實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:40),沒(méi)有N 端甲硫氨酸且具有H138L的修飾EL188(用半點(diǎn)/半實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:23)和His-標(biāo) 簽(用點(diǎn)下劃線標(biāo)出，SEQIDNO:143)。

SEQIDNO:148KRKKRKKRK的融合蛋白(用實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:40),沒(méi)有N 端甲硫氨酸且具有E171G的修飾EL188(用半點(diǎn)/半實(shí)下劃線標(biāo)出；SEQIDNO:24)和His-標(biāo) 簽(用點(diǎn)下劃線標(biāo)出，SEQIDNO:143)。