[發(fā)明專利]殺昆蟲蛋白及其使用方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201480061497.6
• 申請日: 2014-09-11
• 公開（公告）號: CN105705007A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: S.迪伊恩;J.恩格里斯;劉璐;A.昂;J.奧拉;B.羅森;U.舍倫伯格;I.尤德蘭斯基;衛(wèi)俊智;謝衛(wèi)平;朱根海
• 申請（專利權(quán)）人: 先鋒國際良種公司
• 主分類號: A01H5/00
• 分類號: A01H5/00;A01H1/00;C07H21/02;C07H21/04;C12N15/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 唐華東;黃希貴

1.一種包含異源核酸分子的DNA構(gòu)建體，所述異源核酸分子編碼對西方玉米根蟲 (Diabroticavirgiferavirgifera)具有殺昆蟲活性的PIP-72多肽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA構(gòu)建體，其中所述編碼的PIP-72多肽包含與SEQIDNO：2 具有至少50％同一性的氨基酸序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的DNA構(gòu)建體，其中所述編碼的PIP-72多肽與SEQIDNO：2所 示的相應(yīng)氨基酸相比，在第2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、 22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、42、44、45、46、47、48、 49、50、51、52、53、54、56、57、58、59、60、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、 76、77、78、79、80、81、82、83、84、85或86位處包括1至45個氨基酸取代。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的DNA構(gòu)建體，其中所述編碼的PIP-72多肽與SEQIDNO：2所 示的相應(yīng)氨基酸相比，在第2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、17、18、19、20、22、23、 24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、42、44、45、46、47、48、49、50、 51、52、53、54、56、58、60、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、 81、82、83、84、85或86位處包括1至45個氨基酸取代。

5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或4所述的DNA構(gòu)建體，其中所述編碼的PIP-72多肽包含下式所示 的氨基酸序列：

其中

第2位處的Xaa是Gly、Ala、Cys、Asp、Glu、Ile、Lys、Leu、Asn、Arg、Ser、Thr、Val、Trp或 Tyr；

第3位處的Xaa是Ile或Trp；

第4位處的Xaa是Thr、Ala、Asp、Glu、His、Ile、Lys、Leu、Arg、Ser、Val、Trp或Tyr；

第5位處的Xaa是Val、Ala、Cys、Gly、His、Ile或Tyr；

第6位處的Xaa是Thr、Ala、Cys、Phe、Gly、His、Ile、Lys、Met、Pro、Gln、Arg、Ser、Trp或 Tyr；

第7位處的Xaa是Asn、Ala或Val；

第8位處的Xaa是Asn、Ala、Cys、Asp、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Met、Gln、Arg、Ser、Thr 或Val；

第9位處的Xaa是Ser、Ala、Cys、Gly或Thr；

第10位處的Xaa是Ser、Ala、Glu、Phe、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Asn、Pro、Gln、Arg、Thr或 Trp；

第11位處的Xaa是Asn、Ala、Cys、Asp、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Met、Gln、Ser、Thr、 Val或Tyr；

第12位處的Xaa是Pro、Ala、Cys、Asp、Glu、Gly、His、Lys、Leu、Asn、Gln、Arg、Ser、Thr、 Val、Trp或Tyr；

第13位處的Xaa是Ile、Asn、Gln或Val；

第14位處的Xaa是Glu、Ala、Cys、Phe、His、Lys或Gln；

第15位處的Xaa是Val、Ala、Cys、Ile、Met或Arg；

第17位處的Xaa是Ile、Glu或Val；

第18位處的Xaa是Asn或Ser；

第19位處的Xaa是His、Ala、Glu、Lys、Leu、Pro、Arg、Ser或Tyr；

第20位處的Xaa是Trp、Ala或Thr；

第22位處的Xaa是Ser、Ala、Asp、Phe、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Met、Asn、Pro、Gln、Arg、 Thr、Val或Tyr；

第23位處的Xaa是Asp、Ala、Gly、His、Lys、Met、Asn、Gln、Ser、Thr或Val；

第24位處的Xaa是Gly、Asp或Phe；

第25位處的Xaa是Asp、Ala、Glu、Phe、Asn或Gln；

第26位處的Xaa是Thr、Glu或Pro；

第27位處的Xaa是Ser、Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、His、Asn、Gln、Arg或Thr；

第28位處的Xaa是Phe、Pro、Trp或Tyr；

第29位處的Xaa是Phe、Ala、Cys、Ile、Leu、Gln、Arg、Trp或Tyr；

第30位處的Xaa是Ser、Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、His、Lys、Leu、Met、Asn、Pro、Gln、 Arg、Thr、Val、Trp或Tyr；

第31位處的Xaa是Val、Ile或Leu；

第32位處的Xaa是Gly、Ala、Asp、Glu、Phe、His、Lys、Leu、Met、Asn、Pro、Gln、Arg、Ser、 Thr、Val、Trp或Tyr；

第33位處的Xaa是Asn、Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Pro、Gln、Arg、 Ser、Thr、Val或Tyr；

第34位處的Xaa是Gly、Glu、Phe、His、Lys、Leu、Met、Asn、Gln、Arg、Ser、Thr或Tyr；

第35位處的Xaa是Lys、Ala、Cys、Asp、Gly、His、Ile、Leu、Met、Asn、Gln、Arg、Ser、Thr或 Val；

第36位處的Xaa是Gln、Ala、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Asn、Pro、Arg、Ser、Thr或 Val；

第37位處的Xaa是Glu、Ala、Cys、Asp、Phe、Gly、Ile、Lys、Leu、Met、Asn、Ser、Thr或Val；

第38位處的Xaa是Thr、Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、His、Ile、Leu、Met、Asn、Gln、Arg、 Ser、Val、Trp或Tyr；

第39位處的Xaa是Trp或Phe；

第40位處的Xaa是Asp、Ala、Cys、Glu、Phe、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Met、Asn、Gln、Arg、 Ser、Thr、Val、Trp或Tyr；

第42位處的Xaa是Ser、Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、Ile、Lys、Leu、Met、Asn、Gln、Arg、 Thr、Val、Trp或Tyr；

第44位處的Xaa是Ser、Ala、Asp、Glu、Gly、Leu、Met、Asn、Pro、Gln、Thr、Val或Tyr；

第45位處的Xaa是Arg、Lys或Ser；

第46位處的Xaa是Gly、Ala或Gln；

第47位處的Xaa是Phe、Cys、Val或Tyr；

第48位處的Xaa是Val、Ile或Leu；

第49位處的Xaa是Leu、Cys、Phe、Met、Arg或Tyr；

第50位處的Xaa是Ser、Ala、Cys、Asp、Ile、Met、Pro、Gln、Thr或Val；

第51位處的Xaa是Leu、Ala、Cys、Met或Val；

第52位處的Xaa是Lys、Cys、Phe、His、Ile、Leu、Met、Asn、Arg、Ser、Thr、Trp或Tyr；

第53位處的Xaa是Lys、Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、His、Ile、Leu、Met、Asn、Gln、Arg、Ser、 Thr、Val或Tyr；

第54位處的Xaa是Asn、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、Lys、Met、Gln、Arg、Ser或Trp；

第56位處的Xaa是Ala、Gly、Leu、Asn、Pro、Gln、Arg、Ser或Thr；

第57位處的Xaa是Gln、Glu、Leu、Met、Ser或Thr；

第58位處的Xaa是His、Ala、Asp、Phe、Leu、Met、Asn、Arg、Trp或Tyr；

第60位處的Xaa是Tyr、Glu或Phe；

第63位處的Xaa是Gln、Cys、Gly、Ile、Leu、Met、Asn、Thr、Val或Tyr；

第64位處的Xaa是Ala、Phe、Gly、His、Arg、Ser或Tyr；

第65位處的Xaa是Ser、Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、His、Ile、Leu、Asn、Thr或Val；

第66位處的Xaa是Ser、Ala或Gly；

第67位處的Xaa是Lys、Ala、Cys、Asp、Phe、His、Ile、Leu、Met、Asn、Gln、Arg、Ser、Thr、 Val、Trp或Tyr；

第68位處的Xaa是Ile、Asp、Leu或Val；

第69位處的Xaa是Glu、Ala、Cys、Asp、Phe、His、Ile、Leu、Met、Gln、Arg、Ser、Thr、Val或 Tyr；

第70位處的Xaa是Val、Cys或Ile；

第71位處的Xaa是Asp、Ala、Cys、Gly、His、Ile、Leu、Met、Asn、Ser、Thr、Val或Tyr；

第72位處的Xaa是Asn、Ala、Cys、Asp、Glu、Gly、Lys、Met、Pro、Gln、Arg、Ser、Thr、Val或 Trp；

第73位處的Xaa是Asn、Ala、Cys、Asp、Phe、Gly、His、Ile、Leu、Ser、Thr、Val或Tyr；

第74位處的Xaa是Ala、Cys、Asp、Phe、Gly、His、Ile、Leu、Asn、Gln、Arg、Ser、Thr、Val或 Tyr；

第75位處的Xaa是Val、Cys、Ile或Leu；

第76位處的Xaa是Lys、Ala、Cys、Phe、His、Ile、Leu、Gln、Arg、Ser、Thr、Val、Trp或Tyr；

第77位處的Xaa是Asp、Tyr；

第78位處的Xaa是Gln、Ala、Cys、Asp、Phe、Gly、His、Ile、Leu、Met、Asn、Arg、Ser、Thr、 Val或Tyr；

第79位處的Xaa是Gly、Arg、Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、His、Lys、Leu、Asn、Gln、Arg、Ser、 Thr、Trp或Tyr；

第80位處的Xaa是Arg、Ala、Cys、Asp、Phe、Gly、His、Ile、Leu、Asn、Ser、Thr、Val或Tyr；

第81位處的Xaa是Leu、Ala、Cys、Asp、Phe、Gly、His、Ile、Asn、Pro、Arg、Ser、Thr或Val；

第82位處的Xaa是Ile、Ala、Leu、Met、Arg或Val；

第83位處的Xaa是Glu、Ala、Cys、Asp、Phe、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Asn、Pro、Arg、Ser、 Thr、Val或Tyr；

第84位處的Xaa是Pro、Ala、Cys、Glu、Ile、Ser、Val、Trp或Tyr；

第85位處的Xaa是Leu、Cys、Gly或Val；并且

第86位處的Xaa是Ser、Ala、Ile、Thr或Val。