[發明專利]具有降低的木聚糖含量的轉基因樹

在審

• 申請號: 201480058008.1
• 申請日: 2014-10-21
• 公開（公告）號: CN105658798A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發明（設計）人: 埃瓦·J·梅萊羅維奇;萊夫·瓊森;克里斯蒂娜·拉特克;芭芭拉·捷列比涅茨;尚德拉·維內斯特蘭德
• 申請（專利權）人: 瑞典樹木科技公司
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H1/00;A01H5/00;C12N9/10
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;彭鯤鵬

1.一種用于產生轉基因樹的方法，所述轉基因樹與相同物種的野生型樹相比具有降低 的木聚糖含量，所述方法包括降低所述轉基因樹中來自糖基轉移酶43(GT43)家族的一種或 更多種基因的表達，其中所述轉基因樹與相同物種的野生型樹相比具有增強的生長特性和 改善的機械特性和/或糖化特性。

2.根據權利要求1所述的方法，其包括以下步驟：

(a)將表達載體導入樹細胞，所述表達載體包含：

(i)至少一個啟動子；

(ii)有效連接在所述啟動子下游的第一核苷酸序列，其包含來自GT43家族的一種或更 多種基因；和

(iii)有效連接在所述第一核苷酸序列下游的與所述第一核苷酸序列互補的第二核苷 酸序列；

其中所連接的核苷酸序列在所述細胞中轉錄成RNA，從而產生發夾RNA，所述發夾RNA在 所述細胞中被加工成能夠降低來自GT43家族的一種或更多種基因的表達的干擾RNA分子； 以及

(b)將步驟(a)中的所述樹細胞培養成轉基因樹。

3.根據權利要求2所述的方法，其中所述啟動子為木材特異性啟動子，其在次生壁生物 合成期間上調。

4.根據權利要求3所述的方法，其中所述木材特異性啟動子選自：GT43啟動子；次生壁 CesA啟動子；RWA啟動子，尤其是與擬南芥屬RWA1、RWA3或RWA4啟動子同源的啟動子；與擬南 芥屬IRX10啟動子同源的啟動子；GUX1或GUX2啟動子；AtFRA8、AtIRX8/或AtPARVUS啟動子； AtXyn1啟動子；AtTBL29啟動子。

5.根據權利要求4所述的方法，其中所述木材特異性啟動子為包含SEQIDNO：25所示 之核苷酸序列的GT43B啟動子，或者包含SEQIDNO：23所示之核苷酸序列的GT43B來源的WP 啟動子。

6.根據權利要求1所述的方法，其中在所述轉基因樹的發育中木材中，由所述來自GT43 家族的一種或更多種基因轉錄的mRNA的水平為相同物種的野生型樹中轉錄的mRNA之相應 水平的25％至85％。

7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述來自GT43家族的一種或更多種基 因選自：

(a)由以下組成的毛果楊基因的組：

GT43A(SEQIDNO：1)，

GT43B(SEQIDNO：2)，

GT43C(SEQIDNO：3)，

GT43D(SEQIDNO：4)，

GT43E(SEQIDNO：5)，

GT43F(SEQIDNO：6)，

GT43G(SEQIDNO：7)；

(b)與(a)中的所述毛果楊基因直系同源并且與(a)中的基因具有至少80％序列同一性 的基因。

8.根據權利要求7所述的方法，其中(b)中的所述直系同源基因選自從桉屬 (Eucalyptus)、金合歡屬(Acacia)或柳屬(Salix)中選擇的物種。

9.根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其中所述來自GT43家族的一種或更多種基 因選自：

GT43B(SEQIDNO：2)，

GT43C(SEQIDNO：3)，和

GT43E(SEQIDNO：5)。

10.根據權利要求9所述的方法，其中所述來自GT43家族的一種或更多種基因選自：

GT43B(SEQIDNO：2)和

GT43C(SEQIDNO：3)。

11.根據權利要求10所述的方法，其包括降低GT43B和GT43C二者的表達，或者降低 GT43B、GT43C和GT43E三種GT43基因的表達。

12.根據權利要求1至11中任一項所述的方法，其用于產生具有增強的生長的轉基因 樹。