[發(fā)明專利]抑制lncRNA用于治療黑素瘤

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201480057416.5
• 申請日: 2014-08-20
• 公開（公告）號: CN105705640B
• 公開（公告）日: 2019-02-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: J-C·馬林;E·萊烏奇;J·萬德索佩萊;P·梅斯特達嘉
• 申請（專利權(quán)）人: 非營利性組織佛蘭芒綜合大學(xué)生物技術(shù)研究所;天主教魯汶大學(xué)研究發(fā)展中心;國立比利時根特大學(xué)
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61P35/00;C12Q1/6886;G01N33/50;A61K31/7088;A61K31/712;A61K31/713
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

本申請涉及癌癥領(lǐng)域，具體地涉及黑素瘤領(lǐng)域。發(fā)現(xiàn)，與黑素細胞相比，一個特定的長鏈非編碼RNA(lncRNA)在黑素瘤中(但不在其它腫瘤中)被特異地上調(diào)。抑制黑素瘤細胞中該lncRNA可以誘導(dǎo)凋亡，是黑素瘤醫(yī)治中的一種新的治療策略。

發(fā)明領(lǐng)域

本申請涉及癌癥領(lǐng)域，具體地涉及黑素瘤領(lǐng)域。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，與黑素細胞相比，在黑素瘤(而非其它腫瘤)中，一種特定的長鏈非編碼RNA(lncRNA)特異地上調(diào)。在黑素瘤細胞中抑制該lncRNA可以導(dǎo)致凋亡的誘導(dǎo)，是黑素瘤醫(yī)治中的一種新的治療策略。

發(fā)明背景

皮膚惡性黑素瘤是導(dǎo)致皮膚癌相關(guān)死亡的主要原因。其發(fā)生率在全世界范圍增加得比任何其它癌癥都要快，該病對于患有遠距離腫瘤轉(zhuǎn)移疾病的患者來說，5年存活率不到20％。改善這種具有侵略性、抵抗化療和放療的疾病的臨床治療結(jié)果一直是一個重大的臨床挑戰(zhàn)。然而，人們在了解黑素瘤的病因?qū)W和遺傳基礎(chǔ)上取得了顯著的進展。這些進展最近導(dǎo)致在對該疾病靶向治療的測試中獲得了滿意的效果。Ras/Raf/MEK/ERK通路已經(jīng)被鑒定為黑素瘤中細胞增殖的主要調(diào)控因子，在多達90％的人黑素瘤中，ERK被過度激活。活性NRAS突變是激活該通路的常見途徑；影響第61位密碼子的突變(NRASQ61K)最為普遍。作為3個人類RAF基因之一的BRAF也常在黑素瘤中發(fā)生突變，最普遍的突變是在第600位上谷氨酸對纈氨酸的替換(V600E)。BRAFV600E刺激組成型ERK信號傳導(dǎo)，導(dǎo)致黑素細胞過度增殖。使用新的1類RAF選擇性抑制劑PLX4032的早期臨床經(jīng)驗顯示了在患BRAFV600E陽性黑素瘤的患者中前所未有的80％的抗腫瘤反應(yīng)率；不幸的是，患者在最初反應(yīng)的幾個月內(nèi)獲得抗藥性，目前研究者在研究與MEK抑制劑的組合療法。

主要由p53基因自身的失活性突變或等位基因丟失導(dǎo)致的p53通路失活是人類癌癥最普遍的分子缺陷。令人感興趣的是，在超過95％的黑素瘤病例中，p53座位完整無缺，從而對黑素瘤腫瘤形成的病因?qū)W中p53的致病相關(guān)性產(chǎn)生疑問。同時，有越來越多的證據(jù)支持p53在黑素瘤形成中的相關(guān)作用。p53缺失與BRAFV600E及活化HRASV12G的黑素細胞特異性過量表達協(xié)同促進小鼠中黑素瘤的產(chǎn)生，而致癌性NRAS與p53缺失協(xié)同在斑馬魚中產(chǎn)生黑素瘤。保持了野生型p53表達的癌癥?？梢园l(fā)現(xiàn)替代途徑來破壞p53的功能，這可通過上游調(diào)節(jié)因子的失調(diào)和/或下游效應(yīng)子的失活來實現(xiàn)。MDM2是編碼控制p53水平和功能19的E3泛素連接酶，其在人黑素瘤中(但僅在3％–5％的有記錄的病例中)擴增。最近，MDM4上調(diào)也被鑒定為人黑素瘤中p53功能受損的關(guān)鍵決定因子。

其它可以成為治療性干預(yù)的靶標的通路有經(jīng)典的Wnt信號通路和/或由黑素細胞譜系特異性轉(zhuǎn)錄因子MITF調(diào)控的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)。MITF誘導(dǎo)基因表達模式，該表達模式通過激活黑色素生物合成中的重要基因(例如Mc1r,Tyr,Dct和Trp-1)和黑素體形成中的重要基因(例如Pmel)，促進黑素細胞分化和起始色素產(chǎn)生。重要的是，MITF水平和/或其轉(zhuǎn)錄活性的失調(diào)對黑素瘤的發(fā)生具有貢獻。據(jù)此提出了MITF作用的變阻器模型，其中MITF的較高表達與增殖相關(guān)，而較低的MITF水平與轉(zhuǎn)移/入侵及衰老相關(guān)。在10-20％的轉(zhuǎn)移性黑素瘤中發(fā)現(xiàn)的MITF擴增/過量表達，與5年存活率的降低相關(guān)。MITF的一個關(guān)鍵的促致癌作用涉及其能夠通過促進抗凋亡基因BCL-2的表達來促進黑素瘤生存。Wnt/β-聯(lián)蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)直接調(diào)控MITF的表達，Wnt/β-聯(lián)蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的組成型激活可以增強黑素瘤細胞的增殖(伴隨著MITF依賴性的產(chǎn)克隆生長的增加)，提示該通路是黑素瘤發(fā)展的促進因子。

由于其獲得抗藥性的能力、其化學(xué)抗性，也因為黑素瘤是一種高度變化和遺傳上異質(zhì)的腫瘤，迫切需要新的治療策略和組合療法。事實上已經(jīng)有幾個針對黑素瘤的編碼蛋白質(zhì)的治療靶標被鑒定出來，包括MAP激酶通路的組分，例如BRAFV600E、MEK以及p53通路的調(diào)節(jié)子MDM4。然而，這些分子的靶向仍僅適用于有限數(shù)量的病例(例如，對抗攜帶BRAFV600E突變或過量表達MDM4并含有野生型TP53的腫瘤)。