[發(fā)明專利]用于調(diào)節(jié)RNA的組合物和方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201480056023.2
• 申請(qǐng)日: 2014-08-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105658797A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 法提赫·厄茲索拉克;卡羅琳·伍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: RANA醫(yī)療有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/63
• 分類號(hào): C12N15/63;C12N15/113
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 彭鯤鵬;鄭斌

1.在細(xì)胞中提高基因表達(dá)的方法，所述方法包括：

向細(xì)胞遞送包含通式5’-X₁-X₂-3’的寡核苷酸，其中X₁包含具有互補(bǔ)區(qū)的5至20個(gè)核苷 酸，所述互補(bǔ)區(qū)與由所述基因編碼的RNA轉(zhuǎn)錄物的至少5個(gè)連續(xù)核苷酸互補(bǔ)，其中X₁之所述 互補(bǔ)區(qū)3’端的核苷酸與所述RNA轉(zhuǎn)錄物的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的核苷酸互補(bǔ)；并且X₂包含1至20個(gè) 核苷酸。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述RNA轉(zhuǎn)錄物在其5’端具有7-甲基鳥(niǎo)苷帽。

3.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述RNA轉(zhuǎn)錄物具有7-甲基鳥(niǎo)苷帽，并且其中X₁之所述互 補(bǔ)區(qū)3’端的核苷酸與緊接所述7-甲基鳥(niǎo)苷帽內(nèi)側(cè)的RNA轉(zhuǎn)錄物的核苷酸互補(bǔ)。

4.權(quán)利要求1所述的方法，其中X₂5’端的至少第一核苷酸是與鳥(niǎo)嘌呤互補(bǔ)的嘧啶。

5.權(quán)利要求2所述的方法，其中X₂5’端的第二核苷酸是與鳥(niǎo)嘌呤互補(bǔ)的嘧啶。

6.權(quán)利要求1所述的方法，其中X₂包含式5’-Y₁-Y₂-Y₃-3’，其中X₂形成具有環(huán)區(qū)和莖區(qū)的 莖環(huán)結(jié)構(gòu)，所述環(huán)區(qū)包含Y₂的核苷酸，所述莖區(qū)包含與Y₃的至少兩個(gè)連續(xù)核苷酸雜交的Y₁的 至少兩個(gè)連續(xù)核苷酸。

7.權(quán)利要求6所述的方法，其中Y₁、Y₂和Y₃獨(dú)立地包含1至10個(gè)核苷酸。

8.權(quán)利要求6或7所述的方法，其中Y₃在緊接所述莖區(qū)3’端之后的位置包含與鳥(niǎo)嘌呤互 補(bǔ)的嘧啶。

9.權(quán)利要求2至8中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述與鳥(niǎo)嘌呤互補(bǔ)的嘧啶是胞嘧啶。

10.權(quán)利要求1所述的方法，其中X₂包含與所述RNA轉(zhuǎn)錄物的至少5個(gè)連續(xù)核苷酸互補(bǔ)的 互補(bǔ)區(qū)，所述至少5個(gè)連續(xù)核苷酸不重疊于與X₁的所述互補(bǔ)區(qū)互補(bǔ)的RNA轉(zhuǎn)錄物區(qū)。

11.權(quán)利要求10所述的方法，其中X₂的所述互補(bǔ)區(qū)在所述RNA轉(zhuǎn)錄物之多腺苷酸化接點(diǎn) 的100個(gè)核苷酸之內(nèi)。

12.權(quán)利要求11所述的方法，其中X₂的所述互補(bǔ)區(qū)在緊鄰或重疊于所述RNA轉(zhuǎn)錄物之所 述多腺苷酸化接點(diǎn)的位置處與該RNA轉(zhuǎn)錄物互補(bǔ)。

13.權(quán)利要求11或12所述的方法，其中X₂還包含至少2個(gè)連續(xù)的嘧啶核苷酸，所述嘧啶核 苷酸與所述RNA轉(zhuǎn)錄物的poly(A)尾的腺嘌呤核苷酸互補(bǔ)。

14.權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述RNA轉(zhuǎn)錄物是mRNA、非編碼RNA、長(zhǎng)非 編碼RNA、miRNA、或snoRNA、或任何其他合適的RNA。

15.權(quán)利要求1至14中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述RNA轉(zhuǎn)錄物是mRNA轉(zhuǎn)錄物，并且其中 X₂包含與所述轉(zhuǎn)錄物之3’-UTR中的至少5個(gè)連續(xù)核苷酸互補(bǔ)的互補(bǔ)區(qū)。

16.權(quán)利要求1至15中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述RNA轉(zhuǎn)錄物是mRNA，并且所述遞送導(dǎo) 致由所述mRNA編碼的蛋白質(zhì)水平的提高。

17.權(quán)利要求16所述的方法，其中與未遞送該寡核苷酸的合適對(duì)照細(xì)胞相比，由所述 mRNA編碼之蛋白質(zhì)水平的提高至少提高50％。