[發(fā)明專利]異轉(zhuǎn)糖基酶及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201480052405.8
• 申請日: 2014-09-24
• 公開（公告）號: CN105612251B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發(fā)明（設計）人: F·莫伊勒韋特;I·范登布萊德;S·C·弗賴伊;K·E·莫勒;L·弗蘭科娃;T·J·西蒙斯;C·霍蘭;A·哈德孫
• 申請（專利權(quán)）人: 拜爾作物科學公司;愛丁堡大學董事會
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/82;C08L1/02
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 史文靜;黃革生

本發(fā)明涉及具有除了混合鍵β?葡聚糖:木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)葡糖基酶(MXE)活性之外的纖維素:木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)葡糖基酶(CXE)活性的異轉(zhuǎn)糖基酶蛋白。該蛋白質(zhì)可包含具有SEQ ID NO:2、6和8中任一個的氨基酸序列或其功能片段；或與SEQ ID NO:2、6和8的任一個或與SEQ ID NO:2的氨基酸22到280、與SEQ ID NO:6的氨基酸26到283、或與SEQ ID NO:8的氨基酸29到287具有至少60％序列一致性的氨基酸序列。此外，本發(fā)明涉及編碼在此描述的蛋白質(zhì)的分離的核酸、尤其是包含在此描述的核酸的嵌合基因、包含所述嵌合基因的載體、包含所述載體或所述嵌合基因的宿主細胞以及相應的轉(zhuǎn)基因植物。在此進一步披露了產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植物的方法和改進纖維素材料的特性的方法。

本發(fā)明涉及具有除了混合鍵β-葡聚糖:木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)葡糖基酶(MXE)活性之外的纖維素:木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)葡糖基酶(CXE)活性的異轉(zhuǎn)糖基酶(HTG)蛋白。該蛋白質(zhì)可包含具有SEQ ID NO:2、6和8中任一個的氨基酸序列或其功能片段；或者該蛋白質(zhì)可包含與SEQ IDNO:2、6和8的任一個或與SEQ ID NO:2的氨基酸22到280、與SEQ ID NO:6的氨基酸26到283、或與SEQ ID NO:8的氨基酸29到287具有至少60％序列一致性的氨基酸序列。此外，本發(fā)明涉及編碼在此描述的蛋白質(zhì)的分離的核酸、尤其是包含在此描述的核酸的嵌合基因、包含所述嵌合基因的載體、包含所述載體或所述嵌合基因的宿主細胞、以及包含所述嵌合基因的轉(zhuǎn)基因植物。在此進一步披露的是產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植物的方法和改變產(chǎn)纖維植物中的至少一種纖維特性或用于強化如權(quán)利要求書中表征的植物的方法。

在本說明書中，引用了許多文件，包括專利申請和制造商手冊。這些文獻的披露內(nèi)容，盡管認為與本發(fā)明的可專利性不相關(guān)，通過引用以其全文結(jié)合在此。更具體地，參考的全部文獻通過引用的方式以相同的程度結(jié)合，如同專門且個別地指出通過引用的方式結(jié)合每份單獨的文獻。

陸生植物的結(jié)構(gòu)完整性大部分是由植物細胞周圍的細胞壁介導的，細胞壁負責植物的強度和柔性。除了這種功能之外，植物細胞壁對于細胞間粘聚和細胞間通訊也是重要的。細胞壁孔隙率使水分和養(yǎng)分能夠交換。維管植物的初生細胞壁由包埋在化學復合基質(zhì)中的纖維素微纖絲組成，該化學復合基質(zhì)由多糖組成，這些多糖主要如在雙子葉植物和許多單子葉植物中的木葡聚糖和果膠多糖或主要在草類和谷物中的葡糖醛酸阿拉伯糖基木聚糖和(1,3；1,4)-β-D-葡聚糖。雖然到目前為止已經(jīng)闡明了植物細胞壁中多糖的類型和豐度，但是在細胞壁中的多糖之間的分子相互作用方面僅僅可得到很少的信息。廣泛的分子間氫鍵而不是共價相互作用很久以來被認為負責將不同的多糖保持在適當位置(巴西克(Bacic)等人1988；薩默維爾(Somerville)等人2004)。

發(fā)明背景

已經(jīng)發(fā)現(xiàn)木葡聚糖是細胞壁形態(tài)發(fā)生中的重要因子(綜述于鮑曼(Baumann)等人，2007)，并且木葡聚糖能夠與纖維素形成氫鍵，參考文獻見《植物雜志》(The PlantJournal)，1993，第1-30頁。