[發明專利]包含小分子化合物的用于維持多能干細胞染色體穩定性的組合物

有效

• 申請號: 201480052269.2
• 申請日: 2014-07-22
• 公開（公告）號: CN105579579B
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 洪性會;樸恒洙;黃仁植;崔京雅
• 申請（專利權）人: 高麗大學校產學協力團
• 主分類號: C12N5/074
• 分類號: C12N5/074;C12N5/02
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 陳桉

本發明涉及用于維持多能干細胞染色體穩定性的組合物，其包含小分子化合物，且更具體地，涉及用于維持誘導的多能干細胞的染色體穩定性的組合物，其包含能夠在誘導的多能干細胞的誘導和所述細胞后續培養過程中抑制染色體結構和數目突變或DNA損傷的ROCK抑制劑、MEK抑制劑、ALK5抑制劑或抗氧化劑。所述用于維持誘導的多能干細胞的染色體穩定性的包含小分子化合物的組合物在誘導的多能干細胞產生過程中增加重編程速率和效率并展示對染色體結構和數目突變或DNA損傷出色的抑制效果。因此，本發明的組合物對具有出色染色體穩定性的誘導的多能干細胞治療劑的開發非常有用。

技術領域

本發明涉及用于維持多能干細胞的染色體穩定性的組合物，其包含小分子化合物，且更具體地，涉及用于維持誘導的多能干細胞的染色體穩定性的組合物，其包含能夠在誘導的多能干細胞的誘導和所述細胞后續培養過程中抑制染色體結構和數目突變或DNA損傷的ROCK抑制劑、MEK抑制劑、ALK5抑制劑或抗氧化劑。

技術背景

用于產生誘導的多能干細胞的技術是使用動物體細胞制備與胚胎干細胞相似的細胞的技術，且包括在特定培養條件下于四種已知的重編程因子(Oct4、Klf4、Sox2和cMyc)存在下培養細胞。通過該方法制備的誘導的多能干細胞具有分化成為所有組織特異性細胞的優勢，并可用作不構成任何倫理問題的細胞治療劑，但這些誘導的多能干細胞具有的劣勢在于它們以低效率產生，它們的安全性難以保證且與胚胎干細胞并不完全相似。

自2006誘導的多能干細胞技術開發以來，已實施對于該技術的許多研究，且由這些研究獲得的多種組合物已用于增加產生誘導的多能干細胞的效率。作為結果，23篇文章已報道使用特定的組合物成功增加誘導的多能干細胞的產生效率，且6篇文章已報道即使在一種或多種重編程因子不存在下也可成功產生誘導的多能干細胞。

至今，已實施研究來主要增加產生誘導的多能干細胞的效率。然而，當僅誘導的多能干細胞的產生效率增加而誘導的多能干細胞的安全性確認不足時，看起來誘導的多能干細胞并非是臨床上可應用的。因此，為增加誘導的多能干細胞的臨床應用性，需要致力于增加誘導的多能干細胞安全性的研究，且應該開發制備與胚胎干細胞更相似的誘導的多能干細胞的方法。

在與本發明相關的現有技術中，韓國專利注冊號10-1211610(2012年12月6日)公開了通過使用Bmi1、MEK抑制劑和GSK抑制劑誘導從體細胞至胚胎干細胞樣細胞的反分化(dedifferentiation)的組合物，和使用所述組合物用于產生胚胎干細胞樣細胞的方法。韓國專利注冊號10-1211624(2012年12月6日)公開了通過使用Shh、FGFR酪氨酸激酶抑制劑、MEK抑制劑和GSK抑制劑誘導從體細胞至胚胎干細胞樣細胞的反分化的組合物，和使用所述組合物用于產生胚胎干細胞樣細胞的方法。此外，韓國專利公開號10-2010-0101764(2010年9月20日)、韓國專利公開號10-2011-0094348(2011年8月23日)、韓國專利公開號10-2012-0094488(2012年8月24日)和韓國專利公開號10-2012-0121084(2012年11月5日)公開了用于產生和維持多能干細胞的有用培養方法和培養基等。

與本發明的領域相關的數篇文章已報導使用組合物處理增加誘導的多能干細胞產生的效率，但此使用組合物的處理是否可抑制誘導的多能干細胞的突變尚不知曉。具體地，未報導包含MEK抑制劑、ALK5抑制劑、ROCK抑制劑或抗氧化劑的組合物的使用可抑制突變或DNA損傷，后者為在誘導的多能干細胞產生中發生的問題，因而可提供穩定的誘導的多能干細胞。

因此，本發明發現了包含ROCK抑制劑thiazovivin、MEK抑制劑PD0325901、ALK5抑制劑SB431542或抗氧化劑L-抗壞血酸的組合物通過抑制誘導的多能干細胞中的結構突變和數目突變或DNA損傷維持染色體穩定性，由此完成本發明。

現有技術文獻

專利文件

專利文件1:韓國專利注冊號10-1211610(2012年12月6日)