[發明專利]用于使血液樣品成像的方法、試劑盒及系統

有效

• 申請號: 201480048267.6
• 申請日: 2014-06-30
• 公開（公告）號: CN105556276B
• 公開（公告）日: 2018-11-16
• 發明（設計）人: 約瑟夫·喬爾·波拉克;阿爾農·霍里亞芬;賽思·J·薩爾皮特
• 申請（專利權）人: 思迪賽特診斷有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/38;G01N15/14;G01N15/00
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 鄭霞

1.一種用于使血液樣品成像的方法，所述方法包括：

-將包括紅細胞的細胞懸浮液引入到載體的基底表面上，所述載體具有大于或等于當在所述基底表面上時所述細胞懸浮液的垂直高度h的垂直高度H；

-使所述細胞懸浮液中的細胞沉降在所述載體的所述基底表面上以在所述載體的基底表面上形成細胞單層，所述細胞懸浮液具有濃度C，所述濃度C是這樣的，當使所述細胞懸浮液中基本上所有的細胞沉降在所述載體的所述基底表面上以形成所述細胞單層時，在所述基底表面上形成單層而在細胞間基本上無重疊；以及

-獲取所述細胞單層的至少一部分的至少一幅顯微圖像，

其中，通過設置為不超過當沉降到所述基底表面上時所述細胞懸浮液的垂直高度的20％的景深的顯微鏡獲得所述至少一幅顯微圖像。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述垂直高度h在20μm與1000μm之間。

3.如權利要求1所述的方法，其中通過設置為不大于當沉降在所述基底表面上時所述細胞懸浮液的垂直高度的15％的景深的顯微鏡獲得所述至少一幅顯微圖像。

4.如權利要求1所述的方法，其中所述景深在0.5μm與10μm之間。

5.如權利要求1所述的方法，其中所述景深在0.5μm與5μm之間。

6.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞是人細胞。

7.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞包括至少50％紅細胞。

8.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞包括至少75％紅細胞。

9.如權利要求1所述的方法，包括以稀釋因子D稀釋包括所述紅細胞的樣品以獲得所述細胞懸浮液，所述稀釋因子D是稀釋前每一ml細胞的濃度C₀與所述濃度C的函數。

10.如權利要求9所述的方法，其中通過以下函數確定所述稀釋因子D：

11.如權利要求9所述的方法，其中樣品是血液樣品且所述稀釋因子D在50與300之間。

12.如權利要求9所述的方法，其中所述稀釋因子D在75與200之間。

13.如權利要求9所述的方法，其中所述稀釋因子D為約100。

14.如權利要求1所述的方法，包括通過稀釋包括紅細胞的血液樣品生成所述細胞懸浮液以獲得所述細胞懸浮液中的細胞濃度C，使得在沉降到所述基底表面上后，細胞的密度在10,000至30,000個細胞/mm²之間。

15.如權利要求14所述的方法，所述稀釋包括使所述細胞懸浮液形成為具有在0.4與0.9之間的平均基底表面覆蓋度的單層。

16.如權利要求15所述的方法，其中所述平均基底表面覆蓋度在0.4與0.6之間。

17.如權利要求1所述的方法，包括選擇提供所述景深的顯微鏡物鏡透鏡，其中所述透鏡允許獲取在其任一維度不大于3μm長的至少一個物體的圖像。

18.如權利要求17所述的方法，其中所述透鏡允許獲取具有相對于所述基底表面不大于3μm的高度的至少一個物體的圖像。

19.如權利要求1所述的方法，包括分析所述至少一幅圖像以基于所述至少一幅圖像確定所述細胞懸浮液中病原體的存在或不存在。