[發明專利]草莓屬植物的炭疽病抵抗性相關標志物及其利用

有效

• 申請號: 201480047115.4
• 申請日: 2014-09-05
• 公開（公告）號: CN105531369B
• 公開（公告）日: 2018-11-09
• 發明（設計）人: 榎宏征;西村哲;水藤百江;布目司;野口裕司
• 申請（專利權）人: 豐田自動車株式會社
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;A01H5/00;A01H6/74;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 曽禎;段承恩

對于草莓屬植物開發多種DNA標志物，通過使用這些多種DNA標志物來高精度地判定炭疽病抵抗性。草莓屬植物炭疽病抵抗性相關標志物，包含草莓屬植物的染色體中的由序列號1所示的堿基序列和序列號10所示的堿基序列所夾的連續的核酸區域。

技術領域

本發明涉及能夠篩選對草莓炭疽病顯示抵抗性的草莓屬植物系統的炭疽病抵抗性相關標志物及其利用方法。

背景技術

通過開發DNA標志物(也稱為遺傳標志物、基因標志物)，能夠在植物的品種改良中迅速且有效地辨別有用性狀、不良性狀的有無。DNA標志物的開發不僅在擬南芥、稻等模型植物、而且在各種各樣的實用植物中進展，對于品種改良發揮了巨大作用。

非專利文獻1中有在栽培草莓中開發綜合型高密度連鎖圖譜的報告。根據非專利文獻1，雖然以前有包含約300個擴增片段長度多態性(amplified fragment lengthpolymorphism，AFLP)標志物的連鎖圖譜的報告，但由于具有8倍體和復雜的基因組，因而對于栽培草莓要求開發更高密度的連鎖圖譜。另外，在非專利文獻1中，對于野草莓(F.vessca)和草莓(F.×ananassa)開發了簡單重復序列(simple sequence repeat)標志物，構建了綜合型高密度連鎖圖譜。具體地，使用02-19、Sachinoka(幸香)、Kaorino、Akihime(章姬)和0212921的5個品種·系統制作連鎖圖譜，將他們綜合起來制成1個綜合型高密度連鎖圖譜。在非專利文獻1中，對于02-19開發了575個標志物、對于Sachinoka(幸香)開發了556個標志物，對于Kaorino開發了294個標志物，對于Akihime(章姬)開發了318個標志物，以及對于0212921開發了822個標志物。但是，在非專利文獻1所公開的綜合型高密度連鎖圖譜中，存在無座上的標志物數的連鎖群，特別是在標志物數少的Kaorino、Akihime(章姬)中該傾向顯著。進而，考察到非專利文獻1所公開的綜合型高密度連鎖圖譜并未覆蓋全部的連鎖圖譜。

另外，非專利文獻2中記載為了有效地開發草莓炭疽病抵抗性品種，開發了與草莓炭疽耐病性連鎖的DNA標志物。非專利文獻2中通過隨機擴增多態性DNA法(RandomAmplified Polymorphic DNA法，RAPD法)、AFLP法和SSR法使用標志物制作連鎖圖譜，分析耐病性連鎖標志物。其結果根據非專利文獻2，通過在將草莓中間母本農2號雜交而得的集團中利用，能夠將育種集團減少到1/8，能夠開發能以約70％的概率辨別耐病性系統的標志物。

此外，關于草莓炭疽病，如非專利文獻3所記載的那樣，已知蘋果炭疽病菌(Glomerella cingulate)和辣椒炭疽病菌(Colletotrichum acutatum)是其病原菌。

另一方面，例如，專利文獻1中公開開發了甜菜黑根病抵抗性品種篩選標志物，專利文獻2中對于玉米公開了利用與目的性狀連鎖的標志物的篩選技術。

現有技術文獻

非專利文獻

非專利文獻1：DNA Research 20,79-92,(2013)

非專利文獻2：櫪木縣農業試驗場研究成果集第29號，第51～52頁

非專利文獻3：Microbiol.Cult.Coll.,25(1):27-32,2009

專利文獻

專利文獻1：WO2007/125958

專利文獻2：日本特開2010-516236號公報

發明內容

發明所要解決的課題