[發明專利]作為生物標記物的電中性金屬配合物

有效

• 申請號: 201480045420.X
• 申請日: 2014-06-18
• 公開（公告）號: CN105492575B
• 公開（公告）日: 2019-01-22
• 發明（設計）人: 周明;余林頗
• 申請（專利權）人: 聯吡啶釕科學公司
• 主分類號: C09K11/07
• 分類號: C09K11/07;G01N33/52
• 代理公司: 北京市領專知識產權代理有限公司 11590
• 代理人: 楊兵

本發明涉及作為發光標記物的電中性金屬配合物。該配合物的金屬離子的正電荷被與含氮二亞胺配體(如2,2’?聯吡啶，1,10?菲咯啉以及它們的衍生物)通過共價鍵相連的負電荷基團中和。在增強電化學激發條件下的發光強度的同時，電中性能降低金屬配合物對被標記生物分子的生物和/或生物化學活性的影響。這些發光金屬配合物標記分子可用于以發光信號為檢測模式的生物分析方法(如電化學發光)的發展。

相關申請的交叉引用

本申請要求2013年6月18日提交的題目為“作為生物標記物的電中性金屬配合物”美國臨時申請No.61/956,810的權益，將該申請的內容并入本文作為參考。

發明領域

本發明涉及可生物偶聯的發光金屬配合物，以及它們作為新型標記分子在化學、生物化學和生物分析領域中的應用，如免疫檢測和DNA探針。更具體的說，本發明涉及電中性的電化學發光標記分子以及它們在電化學發光免疫分析中的應用。

發明背景

基于生物親和性(即兩種生物活性物質，如抗體/抗原，的選擇性結合)的生物分析方法在很大程度上依賴生物標記分子，標記技術以及對產生于標記分子的信號的檢測。生物標記分子是能夠自身，或者在與其它試劑發生物理/化學相互作用時，發出能與被測物質的量相關的可檢測的信號的化學或生物化學物質。生物標記分子包括，但不僅限于：含放射性原子的分子(放射性)，發光化合物(在光激發或化學反應中發光)，電活性化合物(通過氧化還原反應產生電信號)，磁性顆粒(磁信號)和酶(通過與底物的反應，生成可檢測的物質或者光信號)。生物標記分子包含一個或多個信號產生單元以及一個或多個反應性基團。后者與待標記的生物分子易于形成共價鍵。標記過程是將一個或多個標記分子和生物活性物質結合形成復合物，該復合物保持對特定待檢測物質的生物親和性。

通過一系列的電化學氧化還原反應以及與共反應劑(諸如專利US 6451225和US6702986中披露的三丙胺)發生的后續化學反應，電化學發光(ECL)已經發展成為一種成熟的生物分析技術，在此技術中，一種金屬配位化合物，如釕(II)多二亞胺(polydiimine)復合物，被用作ECL標記分子的信號產生單元。美國專利(5221605，5238808，5310687，5714089，5731147，6140138，6316607)和許多研究論文披露了ECL標記分子以及它們在免疫分析和DNA探針領域的應用(例如：G.F.Blackburn et al.,Clin.Chem.1991,37/9,1534-1539；J.H.Kenten et al.,Clin.Chem.1991,37/9,1626-1632.)。

對ECL標記分子的改進是一個長期持續的努力方向。一方面，有大量的工作試圖通過在一個或多個與釕(II)離子配位的配體上連接上功能基團而重新設計釕(II)配合物。另一方面，把ECL發光體從釕(II)配合物擴展到其它金屬配合物的努力也進行了很多，其中一些在專利中有所披露。比如美國專利5858676和6468741分別公開了稀土金屬配合物和錸配合物的ECL。專利申請WO2012107420，US2013/0323719，US2013/0323857，WO2014019707，WO2014019708和WO2014019711則公開了用作ECL標記分子的基于銥的新型配合物。