[發(fā)明專利]偶聯(lián)分子于顆粒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201480045394.0
• 申請日: 2014-08-13
• 公開（公告）號: CN105452299A
• 公開（公告）日: 2016-03-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 諾布由熙·喬·梅吉;黃昌儀
• 申請（專利權(quán)）人: 安泰奧科技有限公司
• 主分類號: C07K17/14
• 分類號: C07K17/14;C07K1/22
• 代理公司: 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;陸鳳

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及連接靶分子(例如抗體、酶、鏈霉、A蛋白、G蛋白、脂蛋白或糖蛋白)與其它分子(例如其它蛋白質(zhì)、標(biāo)簽、染料、合成聚合物和/或納米粒子)。更具體地，本發(fā)明涉及一種方法，所述方法用于設(shè)計和生產(chǎn)具有可控比例的兩種或多種分子(例如生物分子、標(biāo)簽、染料、合成聚合物和/或納米粒子)的顆粒偶聯(lián)物。

發(fā)明背景

在生命科學(xué)研究的許多應(yīng)用(例如藥物研發(fā)和診斷)中，有必要采用簡單的工藝將生物分子，例如肽、蛋白質(zhì)、多核苷酸和碳水化合物彼此連接，或者與小分子和生物(例如，蛋白質(zhì)和多核苷酸)藥物、染料、標(biāo)簽、合成聚合物和納米粒子連接。現(xiàn)有技術(shù)中已存在多種方法(例如Hermanson等，生物結(jié)合技術(shù)：學(xué)術(shù)出版社，1996年(Hermanson,etal.,BioconjugateTechniques:AcademicPress,1996))。

簡言之，與生物分子形成多功能偶聯(lián)物的兩個關(guān)鍵要求是，最大程度降低對生物分子功能的損害，以及控制形成偶聯(lián)物的兩種或多種分子的比例。這取決于相互連接的分子的大小以及應(yīng)用，可能僅需要將每種類型的一個分子彼此偶聯(lián)。另一種方法是將一種類型的多個分子偶聯(lián)至更大的生物分子。例如，如果分子A和B需要彼此連接，無功能損害地形成A-B，獲得3個A-B在分子水平上不是那么簡單的。很有可能的是，1個A可與1個、2個或更多個B連接，并且類似地，1個B可與1個、2個、或更多個A連接。可能是A和B與其自身連接，以及，作為多種連接的結(jié)果，也可能仍有完全不能與另一分子形成連接的A和B。根據(jù)進(jìn)行偶聯(lián)的分子以及所使用的方法，產(chǎn)生了不同實體的群體，而在大多數(shù)情況下，在不同批次之間實現(xiàn)均勻性和一致性是有挑戰(zhàn)性的過程。

已經(jīng)采用了許多不同的連接化學(xué)物質(zhì)試圖最大程度降低與生物分子形成偶聯(lián)物中一致性和再現(xiàn)性方面的困難。一種完全不同的形成偶聯(lián)物的方法是，連接不同的分子至一個共同的載體，例如一些納米或微小尺寸的顆粒，而不是直接連接此類分子。例如，可以在顆粒表面產(chǎn)生羧酸，用于含氨基的生物分子的反應(yīng)，可以在顆粒上產(chǎn)生馬來酰亞胺或溴乙酰基團(tuán)，用于與硫醇的反應(yīng)，并且?guī)缀跞我贿B接方法可應(yīng)用于顆粒表面形成兩種或多種不同分子的偶聯(lián)物。然而，隨著顆粒變得越來越小，均勻性和再現(xiàn)性這一同樣的問題出現(xiàn)了。在顆粒表面產(chǎn)生不同的官能團(tuán)以獲得正交偶聯(lián)，有可能解決這些困難，但在最后，不同官能團(tuán)的形成需要從顆粒上共同的起始基團(tuán)開始，均勻性和再現(xiàn)性這一同樣的問題又出現(xiàn)了。

上述討論的連接方法的示例見于Lim,I-I.S.等.(2008)納米技術(shù),第19卷,第1-11頁(Lim,I-I.S.etal.(2008)Nanotechnology,vol.19,p.1-11)，其中描述了蛋白質(zhì)包裹金和磁性氧化物/金核/殼納米粒子的合成及表征。這篇文章中描述的體系都使用二硫代雙(琥珀酰丙酸)(DSP)將蛋白質(zhì)連接至納米粒子。出于上述原因，形成偶聯(lián)物的新方法宜無需使用這些類型的連接劑。

說明書中參考的任何現(xiàn)有技術(shù)不是，也不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是承認(rèn)或任何形式的暗示，該現(xiàn)有技術(shù)在任何司法管轄權(quán)限內(nèi)形成公知常識的一部分，或者本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠合理預(yù)期該現(xiàn)有技術(shù)并認(rèn)為是相關(guān)的。

發(fā)明綜述

本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的納米粒子和微粒子能夠連接分子、聚合物和其他顆粒以得到預(yù)定的和期望的多功能實體，所述實體含有以各自特定比例存在的不同分子。

因此，本發(fā)明涉及一種顆粒，包含：

-表面；

-至少部分包覆該表面的過渡金屬離子；和

-第一靶分子和第二靶分子，其中所述第一和第二靶分子彼此不同，

其中，所述顆粒是由一種或多種基材分子或多種原子形成，并且其中所述過渡金屬離子與顆粒表面的基材分子或原子顆粒，以及至少一個第一靶分子和至少一個第二靶分子形成配位鍵，從而將第一和第二靶分子連接至顆粒上。

在一實施例中，所述顆粒為納米粒子。

本發(fā)明也涉及一種組合物，包括：

-由一種或多種基材分子或原子形成的顆粒；

-具有與過渡金屬離子形成配位鍵的基團(tuán)的配體；

-與所述一種或多種基材分子或原子形成配位鍵的過渡金屬離子。

在一實施例中，組合物中包含的所述顆粒不具有連接于基材分子或原子以便連接過渡金屬離子的接頭。所述組合物可進(jìn)一步包括第一靶分子和第二靶分子，其中所述第一和第二靶分子彼此不同。

在一實施例中，所述顆粒為納米粒子。

本發(fā)明也涉及由多種過渡金屬離子形成的顆粒，包括：

-表面；