[發明專利]在植物中生產蛋白質

在審

• 申請號: 201480041937.1
• 申請日: 2014-06-13
• 公開（公告）號: CN105452470A
• 公開（公告）日: 2016-03-30
• 發明（設計）人: 理查德·C·皮特;C·羅門思;羅伯特·克雷蒂安;嚴華;小隅旭子
• 申請（專利權）人: 杰.爾.辛普洛公司
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82
• 代理公司: 北京律盟知識產權代理有限責任公司 11287
• 代理人: 林彥

1.一種在轉化的馬鈴薯植株中生產異源蛋白質的方法，包括以下步驟：

a.使用表達盒轉化植株，所述表達盒包含(i)能夠抑制馬鈴薯塊莖特異蛋白(patatin)表達的核苷酸序列，(ii)能夠抑制CD4B表達的核苷酸序列，(iii)標記基因，和(iv)編碼所關注蛋白質或肽的基因；

b.在限定的條件下培養所述轉化的植株；以及

c.提取關注的蛋白質。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述能夠抑制馬鈴薯塊莖特異蛋白表達的核苷酸序列包括用SEQIDNO:3和SEQID:4示出的馬鈴薯塊莖特異蛋白反義序列和正義序列；并且其中所述能夠抑制CD4B表達的核苷酸序列包括用SEQIDNO:5和SEQIDNO:6示出的CD4B反義序列和正義序列。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述標記基因選自：GFP、EGFP、GUS、LUX、CAH、SPT、NPTII、HPT、APHIV、BAR、PAT、CHS、AHAS和類黃酮合成基因。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述關注的蛋白質選自：白介素-2、水蛭素、胰島素、干擾素、乳鐵蛋白、血紅蛋白、促紅細胞生成素、表皮生長因子、炭疽疫苗、霍亂疫苗、DPT疫苗、hib疫苗、甲肝疫苗、乙肝疫苗、丙肝疫苗、HPV疫苗、流感疫苗、日本腦炎疫苗、MMR疫苗、MMRV疫苗、肺炎球菌結合疫苗、肺炎球菌多糖疫苗、脊髓灰質炎疫苗、輪狀病毒疫苗、天花疫苗、結核病疫苗、傷寒疫苗、黃熱病疫苗、細小病毒疫苗、犬瘟熱疫苗、腺病毒疫苗、副流感疫苗、百日咳疫苗、狂犬病疫苗、鉤端螺旋體疫苗、萊姆病疫苗、冠狀疫苗、蛔蟲/鉤蟲疫苗、驅蟲藥疫苗、RNFN疫苗和艾滋病疫苗。

5.一種在轉化的馬鈴薯植株中生產異源蛋白質的方法，包括以下步驟：

a.使用表達盒轉化植株，所述表達盒包含(i)能夠抑制馬鈴薯塊莖特異蛋白表達的核苷酸序列，(ii)能夠過表達P19的核苷酸序列，(iii)標記基因，和(iv)編碼所關注蛋白質或肽的基因；

b.在限定的條件下培養所述轉化的植株；以及

c.提取關注的蛋白質。

6.根據權利要求5所述的方法，其中所述能夠抑制馬鈴薯塊莖特異蛋白表達的核苷酸序列包括用SEQIDNO:3和SEQID:4示出的馬鈴薯塊莖特異蛋白反義序列和正義序列；并且其中所述能夠過表達P19的核苷酸序列包括用SEQIDNO:2示出的P19序列。

7.根據權利要求5所述的方法，其中所述標記基因選自GFP、EGFP、GUS、LUX、CAH、SPT、NPTII、HPT、APHIV、BAR、PAT、CHS、AHAS和類黃酮合成基因。

8.根據權利要求5所述的方法，其中所述關注的蛋白質選自：白介素-2、水蛭素、胰島素、干擾素、乳鐵蛋白、血紅蛋白、促紅細胞生成素、表皮生長因子、炭疽疫苗、霍亂疫苗、DPT疫苗、hib疫苗、甲肝疫苗、乙肝疫苗、丙肝疫苗、HPV疫苗、流感疫苗、日本腦炎疫苗、MMR疫苗、MMRV疫苗、肺炎球菌結合疫苗、肺炎球菌多糖疫苗、脊髓灰質炎疫苗、輪狀病毒疫苗、天花疫苗、結核病疫苗、傷寒疫苗、黃熱病疫苗、細小病毒疫苗、犬瘟熱疫苗、腺病毒疫苗、副流感疫苗、百日咳疫苗、狂犬病疫苗、鉤端螺旋體疫苗、萊姆病疫苗、冠狀疫苗、蛔蟲/鉤蟲疫苗、驅蟲藥疫苗、RNFN疫苗和艾滋病疫苗。

9.一種在轉化的馬鈴薯植株中生產異源蛋白質的方法，包括以下步驟：

a.使用表達盒轉化植株，所述表達盒包含(i)能夠抑制馬鈴薯塊莖特異蛋白表達的核苷酸序列，(ii)能夠抑制CD4B表達的核苷酸序列，(iii)能夠過表達P19的核苷酸序列，(iv)標記基因，和(v)編碼所關注蛋白質或肽的基因；

b.在限定的條件下培養所述轉化的植株；以及

c.提取關注的蛋白質。

10.根據權利要求9所述的方法，其中所述能夠抑制馬鈴薯塊莖特異蛋白表達的核苷酸序列包括用SEQIDNO:3和SEQID:4示出的馬鈴薯塊莖特異蛋白反義序列和正義序列；其中所述能夠抑制CD4B表達的核苷酸序列包括用SEQIDNO:5和SEQIDNO:6示出的CD4B反義序列和正義序列；并且其中所述能夠過表達P19的核苷酸序列包括用SEQIDNO:2示出的P19序列。