[發(fā)明專利]用于快速確定細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性或耐藥性的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201480037680.2
• 申請(qǐng)日: 2014-07-02
• 公開（公告）號(hào): CN105358982B
• 公開（公告）日: 2018-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J·L·費(fèi)爾南德斯·加西亞;J·古薩維斯·貝倫格爾;R·桑蒂索·布蘭達(dá)雷茲;M·塔馬約·諾瓦絲;G·鮑·阿雷瓦洛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: ABM科技公司
• 主分類號(hào): C12Q1/18
• 分類號(hào): C12Q1/18
• 代理公司: 北京三友知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11127
• 代理人: 龐東成;武胐

在此披露一種快速評(píng)估細(xì)菌的菌株對(duì)細(xì)胞壁合成抑制抗生素的敏感性的方法，該方法是基于對(duì)響應(yīng)于該細(xì)胞壁合成抑制抗生素的劑量的細(xì)胞增大的評(píng)價(jià)，這些劑量是與細(xì)菌敏感性的折點(diǎn)相關(guān)的。

本國(guó)際專利申請(qǐng)要求于2013年7月4日提交的歐洲專利申請(qǐng)EP 13382271.8的優(yōu)先權(quán)的權(quán)益，該專利申請(qǐng)的披露內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合在此。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明廣泛地涉及生物技術(shù)的領(lǐng)域，并且更具體地涉及關(guān)于人類健康、獸醫(yī)衛(wèi)生和環(huán)境衛(wèi)生的微生物學(xué)。所描述的某些實(shí)施例涉及用于快速確定培養(yǎng)的細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性和耐藥性的方法。

發(fā)明背景

歐洲疾病控制中心(ECDC)報(bào)告由于多重耐藥性病原體(即，對(duì)若干抗生素具有耐藥性的病原體)，每年有25,000人死亡。精心選擇的早期抗生素治療提供抵抗這類多重耐藥性病原體的最佳防御。鑒于耐藥性的高發(fā)生率，當(dāng)前方法需要用于識(shí)別微生物的細(xì)菌培養(yǎng)物接著是抗菌譜，這常規(guī)地需要2-3天的細(xì)菌生長(zhǎng)。培養(yǎng)細(xì)菌以單獨(dú)構(gòu)建抗菌譜的步驟通常需要約一天的孵育，或約最少18小時(shí)。因此，存在對(duì)快速確定抗生素治療從而使得可以迅速給予有效治療的需要。

一旦培養(yǎng)，常規(guī)方法通過(guò)與已建立的最低抑菌濃度(MIC)比較來(lái)評(píng)估細(xì)菌對(duì)抗生素的耐藥性。該最低抑菌濃度(MIC)通常被視為如通過(guò)微量稀釋法的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)或通過(guò)E-測(cè)試所確定的，顯著抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的抗生素的最低劑量。像臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)這樣的國(guó)際組織建立了每種特定抗生素的濃度，這些濃度通常用作對(duì)于每種特定細(xì)菌的敏感性、中介耐藥性(intermediate resistance)和耐藥性的參考。例如，當(dāng)鮑氏不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii)的菌株的MIC≤4μg/ml時(shí)，它被認(rèn)為對(duì)亞胺培南(imipenem)敏感，當(dāng)該MIC在4μg/ml與8μg/ml之間時(shí)中介，并且當(dāng)該MIC≥16μg/ml時(shí)有耐藥性。

由于經(jīng)常在免疫受損的患者中或通常來(lái)自重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)的危重醫(yī)院(醫(yī)院獲得性)感染性疾病遞增，在全球范圍內(nèi)存在極大的關(guān)注。出于各種原因，這類感染可能與高死亡率相關(guān)聯(lián)。病原體可以通過(guò)侵入，但在必要時(shí)通過(guò)醫(yī)療手段，如在機(jī)械通氣過(guò)程中的呼吸途徑，在通過(guò)導(dǎo)管的泌尿道或血管中，或甚至通過(guò)皮膚創(chuàng)傷如對(duì)于任何數(shù)量醫(yī)療方法所需要的切口來(lái)感染患者。與這些問(wèn)題相關(guān)聯(lián)的許多病原體屬于革蘭氏陰性桿菌家族。例如，通常鮑氏不動(dòng)桿菌、肺炎克雷白氏桿菌(Klebsiella pneumoniae)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)以及一些腸細(xì)菌是對(duì)若干抗生素有耐藥性的。鑒于執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)抗菌譜所必要的相對(duì)長(zhǎng)的時(shí)間，一般根據(jù)經(jīng)驗(yàn)提供抗生素。此治療在20％-40％的情況下可能是無(wú)效的，并且后來(lái)抗生素變化可以使成功概率降低。在這些具有增加的死亡或嚴(yán)重并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)的緊急情況下，一種確定有效抗生素治療的快速系統(tǒng)是很讓人感興趣的。因此，存在對(duì)快速確定細(xì)菌對(duì)標(biāo)準(zhǔn)劑量下的抗生素的敏感性的需要，這可以挽救生命并且降低健康護(hù)理成本。

防治感染性疾病的第一防線經(jīng)常依賴于基于可能涉及的病原體而通常已知是有效的抗生素。然而，抗生素濫用或過(guò)度使用可以導(dǎo)致越來(lái)越多的細(xì)菌耐藥性菌株。為了防止濫用，實(shí)際工作者可以嘗試從用于體外測(cè)試(如，抗菌譜)的血液樣品或其他流體樣品中分離細(xì)菌，同時(shí)分離最初的抗生素。