[發明專利]用于乙酰輔酶A-衍生代謝物、異戊二烯、類異戊二烯前體和類異戊二烯的改善生產的磷酸解酮酶

在審

• 申請號: 201480032280.2
• 申請日: 2014-04-10
• 公開（公告）號: CN105555952A
• 公開（公告）日: 2016-05-04
• 發明（設計）人: Z·Q·貝克;J·W·穆諾斯;D·H·韋爾斯;J·姚
• 申請（專利權）人: 丹尼斯科美國公司;固特異輪胎和橡膠公司
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 陳迎春;黃革生

1.一種能夠增加通過磷酸轉酮酶途徑的碳通量的重組細胞，其中所述重 組細胞包含編碼具有磷酸轉酮酶活性的多肽的異源核酸序列，其中所 述多肽包含與SEQIDNO:8至少65％的序列同一性。

2.一種能夠增加通過磷酸轉酮酶途徑的碳通量的重組細胞，其中所述重 組細胞包含：(i)編碼具有磷酸轉酮酶活性的多肽的異源核酸序列， 其中所述多肽包含與SEQIDNO:8至少65％的序列同一性；和(ii)編 碼完整MVA途徑的一種或多種多肽的一種或多種核酸，其中包含具 有(i)的磷酸轉酮酶活性的所述多肽的所述重組細胞對于一個或多個 以下參數具有大于1.0的性能指數值：(a)在葡萄糖上的細胞生長， (b)在木糖上的細胞生長，(c)細胞內乙酰磷酸的產生，或(d)在 6-磷酸葡萄糖上的細胞生長。

3.一種能夠增加通過磷酸轉酮酶途徑的碳通量的重組細胞，其中所述重 組細胞包含：(i)編碼具有磷酸轉酮酶活性的多肽的異源核酸序列， 其中所述多肽包含與SEQIDNO:8至少65％的序列同一性；和(ii)編 碼完整MVA途徑的一種或多種多肽的一種或多種核酸，其中具有 (i)的磷酸轉酮酶活性的所述多肽對于一個或多個以下參數具有大于 1.0的性能指數值：(a)蛋白質溶解度，(b)蛋白質表達，或(c)6- 磷酸果糖(F6P)比活性。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與SEQ IDNO:23至少90％的序列同一性。

5.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與SEQ IDNO:24至少90％的序列同一性。

6.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與SEQ IDNO:25至少90％的序列同一性。

7.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與SEQ IDNO:26至少90％的序列同一性。

8.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與SEQ IDNO:27至少90％的序列同一性。

9.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與SEQ IDNO:28至少90％的序列同一性。

10.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與 SEQIDNO:29至少90％的序列同一性。

11.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與 SEQIDNO:30至少90％的序列同一性。

12.根據權利要求1-3中任一項所述的重組細胞，其中所述多肽包含與 SEQIDNO:31至少90％的序列同一性。

13.一種能夠增加通過磷酸轉酮酶途徑的碳通量的重組細胞，其中所述重 組細胞包含編碼具有磷酸轉酮酶活性的多肽的異源核酸序列，其中所 述多肽包含與SEQIDNO:11至少65％的序列同一性。

14.一種能夠增加通過磷酸轉酮酶途徑的碳通量的重組細胞，其中所述重 組細胞包含：(i)編碼具有磷酸轉酮酶活性的多肽的異源核酸序列， 其中所述多肽包含與SEQIDNO:11至少65％的序列同一性；和(ii) 編碼完整MVA途徑的一種或多種多肽的一種或多種核酸，其中包含 具有(i)的磷酸轉酮酶活性的所述多肽的所述重組細胞對于一個或多 個以下參數具有大于1.0的性能指數值：(a)在葡萄糖上的細胞生 長，(b)在木糖上的細胞生長，(c)細胞內乙酰磷酸的產生，或 (d)在6-磷酸葡萄糖上的細胞生長。