[發明專利]微型凝膠梳

有效

• 申請號: 201480031320.1
• 申請日: 2014-12-02
• 公開（公告）號: CN105378468B
• 公開（公告）日: 2019-05-10
• 發明（設計）人: W·斯特朗
• 申請（專利權）人: 生物輻射實驗室股份有限公司
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 浦易文

提供了一種用于澆制和保持電泳凝膠帶的模具，以及用于執行電泳、電洗脫和/或電印跡的方法、套件和系統。根據一些實施例的模具包括：細長泳道腔陣列，每個泳道腔具有頂端、底端和兩個或更多個側部，各所述泳道腔彼此平行定向；基質，其包括至少一種固體材料并且沿著泳道腔的側部設置，該基質使各所述泳道腔彼此分開，并且使該泳道腔與在所述模具外部的空間分開；以及多個窗口，其中，兩個窗口與每個泳道腔相關聯并且設置于所述泳道腔的相對側上，每個窗口沿著所述泳道腔在長度方向上延伸并且穿入所述基質，從而形成從所述泳道腔經由所述基質到達相鄰泳道腔或所述模具外部空間的通路。

相關申請的交叉引用

本申請要求名稱為“MINI-GEL COMB(微型凝膠梳)”并且在2013年12月2日提交的美國臨時申請號第61/910,853號的優先權，該臨時申請的全部內容以引用的方式并入到本文中以用于所有目的。

背景技術

在分子生物學研究、制藥和其它企業中凝膠電泳是普遍的技術。這種技術可以用來分析生物樣品的含量或者從樣品純化足量的大分子以備后用。蛋白質混合物、肽混合物和DNA、RNA的混合物以及DNA和RNA的片段全都經受凝膠電泳，凝膠電泳基于分子重量、電荷或其它特征使各分子彼此分離。

當必須同時執行多次分離時，常常使用平板形凝膠，因為這些凝膠能在平行泳道中容納多個樣品。平板形凝膠通常通過用凝膠前體填充模具而制備，凝膠前體可以是包含諸如丙烯酰胺或瓊脂糖等化學物質的溶液。然后將“梳”插入于模具中，梳齒突伸到凝膠前體內。在諸如通過誘導前體中化學物質聚合，或者通過允許前體冷卻并且凝固，而凝膠澆制后，移除該梳，從而在凝膠一端得到為梳齒的負形狀的凹陷。這些凹陷用作孔，其中能加載樣品，并且用作在凝膠中容納一種樣品的泳道的起點。

通過將仍保持在模具中或者現放置于另一支承結構中的加載的平板凝膠放置于兩個電極之間，執行電泳。電極被加電到相反極性，并且在電極之間的電流流動造成來自樣品的各分子以不同速率進入凝膠并且遷移通過凝膠。這個過程通俗地被稱作“使凝膠跑動”。分子遷移所沿著的泳道的位置由多種因素決定，并非所有這些因素都是顯而易見的或者在使凝膠跑動之前需要考慮。這些因素包括將加載樣品的孔的位置、通過凝膠流動的電流(即，場線)的幾何形狀以及凝膠組合物中的空間變化。在平板凝膠內泳道位置的不確定性可能由于在凝膠遷移時跟蹤分子的不實用和在泳道之間缺少物理隔離而更糟糕。

為了從平板凝膠收獲樣品分子，或者表征比僅使用電泳可能更廣泛的這些分子，電洗脫或電印跡技術常常在電泳之后執行。這些技術需要在與用于電泳的方向正交的方向上向凝膠施加電流，使得排列于凝膠中的分子在與電泳實現的方向正交的方向上遷移并且離開凝膠。分子然后可以在凝膠的表面上收集(電洗脫)或者轉移到膜，其中，它們可以與結合伴侶起反應并且被檢測(電印跡)。

為了制備用于在電泳之后進行電洗脫或電印跡的平板凝膠，通常必須從其中執行電泳的結構中移除凝膠。這需要搬運凝膠，這是耗時的并且可能造成斷裂，損失樣品的部分或者損失關于凝膠內樣品分子的位置的信息。因為無論如何這條信息都是不完整的，由于凝膠所在的泳道位置的不確定性，用于電印跡的膜常常覆蓋比相關分子占據的更大的凝膠面積。然后這些分子的檢測需要比更小膜所需的更大量的結合伴侶和其它試劑。

發明內容

本發明提供一種用于澆制和保持電泳凝膠帶的模具，使用模具來分離分析物并且分析樣品的方法，以及使用模具來執行電泳、電洗脫和電印跡的套件。

本發明提供一種用來澆制和保持電泳凝膠帶的模具。模具包括：細長泳道腔陣列，每個泳道腔具有頂端、底端和兩個或更多個側部，各泳道腔彼此平行定向；基質，其包括至少一種固體材料并且沿著泳道腔的側部設置，基質使各泳道腔彼此分開并且使泳道腔與模具外部空間分開；以及，多個窗口，其中，兩個窗口與每個泳道腔相關聯并且安置于泳道腔的相對側上，每個窗口沿著泳道腔在長度方向上延伸并且穿入基質，從而形成從泳道腔經由基質到相鄰泳道腔或模具外部空間的通路。