[發明專利]固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶

有效

• 申請號: 201480030782.1
• 申請日: 2014-06-02
• 公開（公告）號: CN105247048B
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發明（設計）人: 愛達·海賽尼;艾格·加拉伊弗;魯波·伊登斯
• 申請（專利權）人: 帝斯曼知識產權資產管理有限公司
• 主分類號: C12N11/08
• 分類號: C12N11/08;C12N9/62;C12C5/00;C12H1/00
• 代理公司: 北京東方億思知識產權代理有限責任公司 11258
• 代理人: 肖善強

1.固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶，其中所述脯氨酸特異性內切蛋白酶通過交聯被固定在載體上，所述載體包含已用二亞甲基間隔官能化的甲基丙烯酸酯，其中所述脯氨酸特異性內切蛋白酶與所述甲基丙烯酸酯交聯。

2.根據權利要求1的固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶，其中所述載體的粒徑范圍為100-400μm。

3.根據權利要求1或2的固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶，其中所述載體的孔徑分布d50為

4.根據權利要求1或2的固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶，其中所述脯氨酸特異性內切蛋白酶源自Aspergillus。

5.根據權利要求4的固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶，其中所述Aspergillus是Aspergillus niger。

6.生產根據權利要求1-5中任一項的固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶的方法，所述方法包括：用雙官能交聯劑激活氨基官能化的甲基丙烯酸酯載體中的氨基基團，將所述脯氨酸特異性內切蛋白酶固定在所述載體上和生產所述固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶。

7.根據權利要求6的方法，其中所述脯氨酸特異性內切蛋白酶以0.01-0.07重量/重量的酶：載體比率被固定在所述載體上。

8.根據權利要求6或7的方法，其中所述雙官能交聯劑是戊二醛。

9.根據權利要求6或7的方法，其中所述固定在10℃-50℃之間的溫度下進行。

10.根據權利要求6或7的方法，其中所述固定在6-8之間的pH下進行。

11.根據權利要求6或7的方法，其中所述固定進行4-48小時。

12.生產啤酒的方法，所述方法包括以下步驟：

a.制備漿體，

b.發酵啤酒，和

c.使啤酒穩定化，

其中將所述啤酒與根據權利要求1-4中任一項的固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶一起孵育，和生產所述啤酒。

13.根據權利要求12所述的方法，其中在使所述啤酒穩定化期間或使所述啤酒穩定化之后，孵育所述固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶。

14.根據權利要求12或13的方法，其中所述孵育在0℃-20℃之間的溫度下進行。

15.根據權利要求12或13的方法，其中所述孵育包括水解谷蛋白。

16.根據權利要求1-5中任一項的固定化的脯氨酸特異性內切蛋白酶的用途，所述用途是將谷蛋白水解為無毒的片段。