[發明專利]烯醇脫水酶變體

在審

• 申請號: 201480028404.X
• 申請日: 2014-05-16
• 公開（公告）號: CN105209615A
• 公開（公告）日: 2015-12-30
• 發明（設計）人: P·馬利埃;M·德勒庫特;S·馬扎勒拉
• 申請（專利權）人: 環球生物能源公司;財富科學家股份有限公司
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 黃革生;林柏楠

1.烯醇脫水酶變體，其特征在于它能夠以比其源自的烯醇脫水酶的活性改進的活性，將至少一種與通式C_nH_2nO相對應的烯醇化合物轉化成共軛二烯C_nH_2n-2，其中3<n<7。

2.權利要求1的烯醇脫水酶變體，其中，

(i)與通式C_nH_2nO相對應的化合物是巴豆醇、丁-3-烯-2-醇或丁-3-烯-1-醇并且與通式C_nH_2n-2相對應的化合物是1,3丁二烯；或

(ii)與通式C_nH_2nO相對應的化合物是異戊烯醇、3-甲基丁-3-烯-1-醇，2-甲基-丁-3-烯-1-醇，2-甲基-丁-2-烯-1-醇，3-甲基-丁-3-烯-2-醇或2-甲基-丁-3-烯-2-醇并且與通式C_nH_2n-2相對應的化合物是異戊二烯；或

(iii)與通式C_nH_2nO相對應的化合物是2,3-二甲基-丁-2-烯-1-醇、2,3-二甲基-丁-3-烯-2-醇或2,3-二甲基-丁-3-烯-1-醇并且與通式C_nH_2n-2相對應的化合物是二甲基丁二烯。

3.烯醇脫水酶變體，其

(a)特征在于它能夠以至少0.033x10^-3s^-1的巴豆醇至1,3丁二烯的轉換率將巴豆醇轉化成1,3丁二烯；或

(b)特征在于它能夠以至少1.1x10^-4s^-1的丁-3-烯-2-醇至1,3丁二烯的轉換率將丁-3-烯-2-醇轉化成1,3丁二烯；或

(c)特征在于它能夠以至少3.3x10^-4s^-1的異戊烯醇至異戊二烯的轉換率將異戊烯醇轉化成異戊二烯；或

(d)特征在于它能夠以至少3.3x10^-5s^-1的3-甲基丁-3-烯-1-醇至異戊二烯的轉換率將3-甲基丁-3-烯-1-醇轉化成異戊二烯。

4.權利要求1至3中任一項的烯醇脫水酶變體，其中烯醇脫水酶變體的特征在于與其源自的相應序列相比，它顯示一個或多個取代、缺失和/或插入并且其中這些取代、缺失和/或插入在一個或多個與SEQIDNO:1中所示氨基酸序列的位置195、116、80、106、119、357、75、132、73、199、123、68、126、159、227、367、234、192、157、169、181、156、122、84、318、389、115、76、390、255、247、50、251、158、324、281、285、98、95、186、248、72、175、245、173、310、140、18、20、170、269、382、39、77、144、168、386、12、151、230、194、207、114、108、210、70、364和10相對應的位置處出現。

5.烯醇脫水酶變體，其顯示比其源自的相應烯醇脫水酶在將巴豆醇轉化成1,3丁二烯中的改進的活性，其中烯醇脫水酶變體的特征在于與其源自的相應序列相比，它顯示一個或多個取代、缺失和/或插入并且其中這些取代、缺失和/或插入在一個或多個與SEQIDNO:1中所示氨基酸序列的位置195、116、80、106、119、357、75、132、73、199、123、68、126、159、227、367、234、192、157、169、181、156、122、84、318、389、115、76、390、255、247、50、251、158、324、281、285、98、95、186、248、72、175、245、173、310、140、18、20、170、269、382、39、77、144、168、386、12、151、230、194、207、114、108、210、70、364和10相對應的位置處出現。