[發(fā)明專利]T淋巴細(xì)胞中類肝素酶的表達(dá)

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201480025440.0
• 申請(qǐng)日: 2014-03-05
• 公開（公告）號(hào): CN105407914A
• 公開（公告）日: 2016-03-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G·道提;D·馬爾凱蒂;I·卡魯埃納
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 貝勒醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): A61K39/00
• 分類號(hào): A61K39/00;A61K35/17;C12N5/0783
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 余穎;沈端

本發(fā)明要求2013年3月5日提交的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)系列第61/772,591號(hào)的優(yōu)先權(quán)，其通過引用全文納入本文。

關(guān)于聯(lián)邦資助的研究或開發(fā)的聲明

本發(fā)明在NCI/NIH資助的R01CA142636-01以及國防部資助的PR093892和W81XWH-10-10425下由政府支持完成。政府對(duì)本發(fā)明擁有某些權(quán)利。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明的實(shí)施方式至少涉及細(xì)胞治療、免疫治療、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)，包括癌癥醫(yī)學(xué)的領(lǐng)域。

背景技術(shù)

基于T細(xì)胞療法對(duì)癌癥患者的臨床功效已經(jīng)由旨在通過嵌合抗原受體(CAR)或異位α-和β-TCR鏈的表達(dá)重新定向其抗原特異性的遺傳修飾而顯著增加(Pule等，2008；Kalos等，2011；Morgan等，2006)。雖然這些腫瘤導(dǎo)向性的T細(xì)胞已經(jīng)成為淋巴腫瘤的高效治療手段，甚至是在有顯著腫瘤負(fù)擔(dān)的患者中也是如此(Kalos等，2011；Rooney等，1995)，但是它們的效果在實(shí)體瘤如神經(jīng)母細(xì)胞瘤(NB)(Pule等，2008)中一般較不顯著，尤其是當(dāng)患者有較大的腫瘤負(fù)擔(dān)時(shí)。這一限制可能部分是由于活性腫瘤免疫逃逸策略(Zou，2005)，但是由于培養(yǎng)過程本身帶來的功能變化可能降低了離體培養(yǎng)的T細(xì)胞的腫瘤滲透。

CAR-工程改造的T細(xì)胞療法大多數(shù)是效應(yīng)T細(xì)胞和效應(yīng)記憶T細(xì)胞，除了它們的強(qiáng)力的效應(yīng)功能以外(Pule等，2008；Kalos等，2011；Savoldo等，2011)，這些細(xì)胞需要保留在腫瘤位點(diǎn)處通行并聚集的能力。這類性質(zhì)包括復(fù)雜的一系列相互作用，包括T細(xì)胞粘附于內(nèi)皮細(xì)胞和趨化因子-趨化因子受體相互作用，其隨后調(diào)節(jié)T細(xì)胞侵入抗原富集組織(Muller，2003；Parish，2006；Yadac等，2003)。在這一過程中，T淋巴細(xì)胞在生理上降解皮下基底膜(BM)和胞外基質(zhì)(ECM)的主要組分，包括硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)，其與廣泛種類的細(xì)胞的膜相關(guān)聯(lián)(Berfield等，1999)。對(duì)于實(shí)體瘤的有效治療而言，也需要T細(xì)胞降解HSPG的這一過程，由于ECM是腫瘤微環(huán)境的關(guān)鍵組分。

ECM降解的基礎(chǔ)是T細(xì)胞釋放降解酶，其中類肝素酶(HPSE)似乎是最為重要的酶之一。HPSE是僅有的已知能夠切割HSPG的硫酸乙酰肝素(HS)鏈的哺乳動(dòng)物β-D-內(nèi)切糖苷酶(Parish，2006；deMestre等，2007；Vlodavsky等，2007；Yurchenco和Schittny，1990)。HPSE首先合成為約65kDa的無活性前體蛋白，然后被切割成約8kDa和約50kDa的兩個(gè)蛋白亞基，其異二聚化形成活性HPSE蛋白(Vlodavsky等，2007)。HPSE也對(duì)炎癥有主要貢獻(xiàn)，并且似乎由激活的CD4⁺T淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞大量產(chǎn)生(Fridman等，1987；Naparstek等，1984；Vlodavsky等，1992)。與在T淋巴細(xì)胞促進(jìn)組織滲透中的這一作用相一致，HSPE在實(shí)驗(yàn)性自體免疫腦脊髓炎(deMestre等，2007)和關(guān)節(jié)炎(Parish，2006)中起到關(guān)鍵作用。

雖然HPSE已經(jīng)顯示涉及炎癥，其對(duì)腫瘤位點(diǎn)處介導(dǎo)T-細(xì)胞滲透的貢獻(xiàn)仍然未明。在過繼轉(zhuǎn)移之前的T細(xì)胞操作會(huì)對(duì)該酶的產(chǎn)生有什么影響也是未知的。本發(fā)明滿足了本領(lǐng)域中對(duì)增強(qiáng)治療性細(xì)胞，如離體擴(kuò)增的細(xì)胞對(duì)癌癥如實(shí)體瘤有效的能力的需求。

概述

本發(fā)明涉及與細(xì)胞療法相關(guān)的方法和組合物。在具體的實(shí)施方式中，細(xì)胞療法用于對(duì)細(xì)胞療法有需求的個(gè)體，如哺乳動(dòng)物，包括人。細(xì)胞療法可適用于任何醫(yī)學(xué)條件，雖然在具體實(shí)施方式中，該細(xì)胞療法是用于癌癥。癌癥可以是任意類型，雖然在具體實(shí)施方式中，癌癥包括個(gè)體中的一種或多種實(shí)體瘤；該實(shí)體瘤可以是兩性的或惡性的。個(gè)體可以是任意年齡或性別。在具體實(shí)施方式中，個(gè)體已知患有癌癥、處于患有癌癥的風(fēng)險(xiǎn)中、或者易于患有癌癥。癌癥可以是原發(fā)性癌癥或轉(zhuǎn)移性癌癥，并且癌癥可能難以治療。在具體實(shí)施方式中，癌癥涉及實(shí)體瘤的治療，例如，乳腺癌、肺癌、腦癌、結(jié)腸癌、腎癌、前列腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、骨癌、宮頸癌、脾癌、肛門癌、食道癌、頭頸癌、胃癌、膽囊癌、黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌、淋巴瘤、骨髓瘤等。在替代性實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及非實(shí)體瘤的治療，如白血病。