[發明專利]抗體-尿素酶偶聯物在診斷和治療中的應用

在審

• 申請號: 201480025121.X
• 申請日: 2014-04-03
• 公開（公告）號: CN105247047A
• 公開（公告）日: 2016-01-13
• 發明（設計）人: 巢立文
• 申請（專利權）人: 赫利克斯生物藥品公司
• 主分類號: C12N9/80
• 分類號: C12N9/80;A61K47/48;A61P35/00;C07K16/00;C07K16/28;C12N9/96
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 溫旭;郝傳鑫

技術領域

本發明公開的內容提供了具有治療和診斷效用的抗體-尿素酶偶聯物。更加具體而言，本發明公開的內容涉及通過將一個或多于一個完全抗體與尿素酶偶聯而制備的診斷偶聯物和/或治療偶聯物。

背景技術

癌癥占美國總死亡率的五分之一，并且是第二致死病因。癌癥通常由細胞群的不受控的分化來表征。這種不受控的分化可涉及血細胞，例如各種不同類型的淋巴瘤，或在特定組織或器官中聚集的或特定組織或器官本身具有的細胞，例如，實體瘤，所述實體瘤例如，繼發性或原發性乳腺腫瘤、肺腫瘤、肝腫瘤、食道腫瘤、胃腫瘤、腸腫瘤、腦腫瘤、骨腫瘤或前列腺腫瘤。

多種治療方式已計劃用于癌癥治療。一種這樣的治療方式涉及使用特定酶抑制癌細胞的生長。本領域已知的一種這樣的酶是尿素酶，其是催化尿素水解成二氧化碳和氨的酶。更加具體而言，尿素酶催化尿素水解以生成氨和氨基甲酸鹽，生成的氨基甲酸鹽隨后通過自發水解作用降解而生成另一氨和碳酸。就這點而言，尿素酶的活性傾向于增加其所在的局部環境的pH值，因為尿素酶產生氨，氨為堿性分子。

在本領域中，已意識到在治療癌癥中使用靶向腫瘤相關抗原的抗體的概念有一段時間(Herlynet.al.,(1980)CancerResearch40,717)。然而，就尿素酶而言，毒性成分是尿的酶降解產生的堿性環境。在這種情況下，所使用的抗體僅需要具有對對應抗原的高結合親和性。雖然治療性抗體可與尿素酶一同使用，但是，目前正在進行的臨床試驗僅僅使用了高親和性抗體片段。這種方式產生了若干獨特的考慮因素，包括尿素酶是非常大的酶而抗體片段顯著較小這一事實。為了解決由尿素酶的尺寸產生的可能的空間位阻，常規使用非人類抗體片段的多個拷貝。

因為這些片段的多個拷貝被用于確保合適的結合，需要限制抗體上所包括的其他成分。而且，因為抗體片段上的結合位點可能有限，所以通過單一栓系(tether)使各個抗體片段與尿素酶結合。而且，雖然抗體片段的免疫原性看起來最小，但是非免疫原性方式會消除不良免疫反應的甚至最小的可能性或消除聯合給藥免疫抑制劑的需要。

發明內容

本發明公開的內容涉及抗體-尿素酶偶聯物。所述偶聯物包括共價結合至尿素酶的一個或兩個抗體，所述抗體與尿素酶共價結合從而形成抗體-尿素酶偶聯物，所述偶聯物任選地包括與所述尿素酶或所述抗體結合的一個或多于一個治療劑。

在一種實施方式中，本發明提供抗體-尿素酶偶聯物，該偶聯物包含共價結合至尿素酶的抗體，所述抗體共價結合至尿素酶從而形成抗體-尿素酶偶聯物。一方面，所述偶聯物還包含共價結合至所述抗體或所述尿素酶的治療劑。

一方面，所述抗體-尿素酶偶聯物包括共價結合至所述尿素酶的至少兩個抗體。在一些方面，所述抗體中的至少一個在兩個或多于兩個位點處共價結合至所述尿素酶。在一些方面，所述抗體中的至少一個在三個或多于三個位點處共價結合至所述尿素酶。在一些方面，抗體中的每一個在兩個或多于兩個位點處共價結合至所述尿素酶。

在一些方面，所述抗體中的至少一個是完全抗體。在一些方面，所述完全抗體包括至少兩個Fab片段和Fc片段。在一些方面，所述完全抗體的分子量為至少120kDa，或130kDa，或140kDa或150kDa。在一些方面，所述完全抗體在兩個或多于兩個位點處共價結合至所述尿素酶。

在一些方面，所述抗體不指向異常朊病毒。

本發明的這些方面和其他方面在下文中進一步描述。

具體實施方式

釋義

應當注意地是，除非上下文另有明確說明，本文以及后附的權利要求書中所使用的單數形式(“a”，“an”和“the”)包括復數指代物。因此，例如，涉及“溶劑(solvent)”的內容包括多種這樣的溶劑。

本文使用的術語“包含(comprising或comprises)”是指組合物和方法包括所記載的元素，但是不排除其他元素。當使用“基本由……構成”限定組合物和方法時，其是指排除對用于所述目的的組合具有實質性意義的其他元素。因此，基本由本文限定的元素構成的組合物或工藝不排除對要求保護的內容的基本特性和新特性不產生實質性影響的其他物質或步驟。“由……構成”是指排除超過痕量元素的其他成分和實質性方法步驟。由這些過渡術語中的每一個限定的實施方式在本發明公開的內容的范圍內。