[發明專利]用于核酸提取的組合物和方法

有效

• 申請號: 201480015429.6
• 申請日: 2014-03-14
• 公開（公告）號: CN105247065B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: G.J.岡林
• 申請（專利權）人: 雅培分子公司
• 主分類號: C12P19/34
• 分類號: C12P19/34
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 杜艷玲;黃希貴

1.從細胞來源材料提取核酸的方法，所述方法包括：

a) 提供

i)細胞來源材料，其中所述細胞來源材料選自活細胞來源材料和固定細胞來源材料，和

ii)pH為10或更高并且包含選自2,2'-(亞乙基二氧基)二(乙胺)(EDBE)、1,3-二氨基丙烷和3-氨基-1-丙醇的一種或多種伯胺單體的含水提取溶液，其中所述含水提取溶液是無蛋白酶的；

b) 使所述細胞來源材料與所述提取溶液接觸，導致細胞材料的裂解和核酸的提取；和

c) 使所述核酸結合至所述提取溶液中的固體基質。

2.權利要求1的方法，其中所述含水提取溶液進一步包含離液劑。

3.權利要求2的方法，其中所述離液劑選自脲、硫氰酸胍(GITC)、乙醇和丁醇中的一種或多種。

4.權利要求1的方法，其中所述含水提取溶液進一步包含去污劑和醇中的一種或多種。

5.權利要求4的方法，其中所述去污劑選自Tween^TM、聚山梨醇酯、脫氧膽酸鹽、脫氧膽酸鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)、NP-40和Triton^TM X-100中的一種或多種。

6.權利要求5的方法，其中所述去污劑的濃度為8％至15％。

7.權利要求6的方法，其中所述醇選自乙醇和丁醇中的一種或多種。

8.權利要求7的方法，其中所述醇的濃度為15％至25％。

9.權利要求1的方法，其中所述含水提取溶液中的伯胺單體的濃度為30 %至50 %。

10.權利要求2的方法，其中所述含水提取溶液中的離液劑的濃度為4M至5M。

11.權利要求1的方法，其中所述活細胞來源材料包含單細胞的懸浮液。

12.權利要求11的方法，其中所述細胞的懸浮液包含細菌。

13.權利要求12的方法，其中所述細菌是分枝桿菌。

14.權利要求1的方法，其中所述細胞的懸浮液包含酵母。

15.權利要求1的方法，其中所述含水提取溶液是無酶的。

16.權利要求1的方法，其中所述含水提取溶液是無蛋白酶的。

17.權利要求1的方法，其中所述固定細胞來源材料包含福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)材料。

18.包含適于從細胞來源材料提取核酸的含水提取溶液的組合物，其中所述細胞來源材料選自活細胞來源材料和固定細胞來源材料，所述組合物包含選自2,2'-(亞乙基二氧基)二(乙胺)(EDBE)、1,3-二氨基丙烷和3-氨基-1-丙醇的一種或多種伯胺單體；一種或多種離液試劑；一種或多種去污劑；一種或多種有機溶劑，并且pH為10或更高，其中所述含水提取溶液是無蛋白酶的。

19.權利要求18的組合物，其中所述離液劑選自脲、硫氰酸胍(GITC)、乙醇和丁醇中的一種或多種。

20.權利要求18的組合物，其中所述去污劑選自Tween^TM、聚山梨醇酯、脫氧膽酸鹽、脫氧膽酸鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)、NP-40和Triton^TM X-100中的一種或多種。