[發明專利]治療惡性胸膜間皮瘤的基于microRNA的方法

有效

• 申請號: 201480014962.0
• 申請日: 2014-03-12
• 公開（公告）號: CN105283205B
• 公開（公告）日: 2019-12-20
• 發明（設計）人: G·里德;N·范贊德韋克
• 申請（專利權）人: 石棉疾病研究基金會
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K31/713;A61K31/711;A61P35/00
• 代理公司: 31100 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 余穎;楊昀

本發明涉及對應于miR?15/107家族的microRNA模擬物，和用于通過恢復對MPM腫瘤細胞中miR?15/107家族的靶基因表達的調控，使用microRNA模擬物來治療惡性胸膜間皮瘤(MPM)的方法。

相關申請的交叉引用

本申請根據35U.S.C.§120要求2013年3月13日提交的美國申請序列號13/801,010的權益，所述申請的內容全文以引用方式并入本文。

發明背景

技術領域

本發明一般涉及分子生物學和癌癥領域。更確切來說，本發明涉及對應于miR-15/107家族的microRNA模擬物，以及通過恢復對MPM腫瘤細胞中miR-15/107家族的靶基因表達的調控，使用microRNA模擬物來治療惡性胸膜間皮瘤(MPM)的相關方法。

背景技術

惡性胸膜間皮瘤幾乎始終是致命癌癥，對其可用的治療極少。迫切地需要新型療法，并且失調microRNA表達提供了新型治療靶的來源。

microRNA由RNA聚合酶II(pol II)或RNA聚合酶III(pol III)轉錄。參見Qi等(2006)Cellular&Molecular Immunology,第3卷:411-19。所述RNA聚合酶II(pol II)或RNA聚合酶III(pol III)源自初始轉錄物，稱為初級microRNA轉錄物(初級microRNA)，其一般長達數千個堿基。初級microRNA在細胞核中由RNA酶Drosha處理成約70個至約100個核苷酸的發夾形前體(前體microRNA)。轉運至細胞質之后，發夾前體microRNA由Dicer進一步處理以產生雙鏈成熟microRNA。然后，將成熟microRNA鏈摻入到RNA誘導的沉默復合物(RISC)中，其中所述成熟microRNA鏈通過堿基對互補性而與其靶mRNA締合。在相對少見的其中microRNA堿基與mRNA靶完美配對的情況下，所述microRNA鏈促進mRNA降解。更常見地，microRNA與靶mRNA形成不完美異源雙鏈，從而影響mRNA穩定性或抑制mRNA翻譯。

多個研究已概括了mRNA基因在MPM中的表達，以便識別潛在靶，并且最近，起初為了診斷性目的，已使用來源于正常和腫瘤細胞系、MPM腫瘤和合并正常心包膜、或MPM和肺癌的樣本，生成了microRNA表達譜。同樣為了預后性目的，生成了所述表達譜，即，在不同類別的MPM腫瘤內。參見例如Busacca等,Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol.42:312-19(2010)。然而，尚未在MPM腫瘤與正常胸膜組織之間進行廣泛性比較。

另外，雖然較為容易在體外使用，但是在體內功效方面，microRNA模擬物通常效果不佳，原因在于兩個問題：(1)活性差(包括低RISC結合和脫靶效應)，和(2)非有效遞送(與穩定性以及對作用部位的特異性/選擇性分布相關)。

如所提及，多個研究已概括了MPM中的基因表達。這是為了理解疾病過程以及識別潛在靶。這些研究已表征了代謝和細胞循環基因在MPM中的一般上調，以及細胞凋亡基因的額外變化，所述額外變化伴有與耐化學療法性有關的改變的細胞凋亡響應。目前為止，這些研究尚有待于揭示MPM腫瘤所共有的對表型進行遺傳控制的支配性機制(overarchingmechanism)。然而，由于認為microRNA是基因表達的全局調節劑，所以microRNA表達的下調表示對基因家族的上調的潛在解釋(即，microRNA表達的損失導致靶基因上調)。

發明內容

本發明是部分基于對microRNA家族的識別，在MPM腫瘤樣本中，與來自未受影響個體的正常胸膜組織相比較，所述microRNA家族被下調。具體來說，本發明人發現在MPM組織中，microRNA的miR-15/107家族的表達被顯著下調。

因此，本發明的一個方面涉及可用于治療MPM的雙鏈microRNA模擬物。本發明的這種miRNA模擬物包含：