[發明專利]使用人源化抗EGFRvIII嵌合抗原受體治療癌癥

有效

• 申請號: 201480009507.1
• 申請日: 2014-02-20
• 公開（公告）號: CN105358576B
• 公開（公告）日: 2020-05-05
• 發明（設計）人: J·布羅格頓;L·A·約翰遜;C·H·瓊;A·洛;M·毛斯;J·朔勒;岡田秀穗
• 申請（專利權）人: 諾華股份有限公司;賓夕法尼亞大學托管會;高等教育聯邦體系匹茲堡大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C07K16/30;A61K38/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

1.編碼嵌合抗原受體 (CAR)的分離的核酸分子, 其中所述CAR包含抗EGFRvIII結合結構域、跨膜結構域和胞內信號傳導結構域，所述胞內信號傳導結構域包含一級信號傳導結構域、或共刺激結構域、或一級信號傳導結構域和共刺激結構域，其中所述抗EGFRvIII結合結構域包含輕鏈可變區和重鏈可變區，

其中所述抗EGFRvIII結合結構域是抗體片段并包含SEQ ID NO: 68的輕鏈可變區和重鏈可變區的氨基酸序列，

其中，輕鏈可變區包含分別包含SEQ ID NO: 26, 27和28的氨基酸序列的輕鏈互補決定區 1 (LC CDR1)、輕鏈互補決定區 2 (LC CDR2)和輕鏈互補決定區 3 (LC CDR3)；且重鏈可變區包含分別包含SEQ ID NO: 22, 23和24的氨基酸序列的重鏈互補決定區 1 (HCCDR1)、重鏈互補決定區 2 (HC CDR2)、和重鏈互補決定區 3 (HC CDR3)。

2.權利要求1的分離的核酸分子，其中抗EGFRvIII結合結構域包含SEQ ID NO:68的氨基酸序列。

3.權利要求1的分離的核酸分子，其中編碼抗EGFRvIII結合結構域的核酸序列包含SEQID NO:69的序列、或與其具有95-99%同一性的序列。

4.權利要求1的分離的核酸分子，其中抗體片段是scFv。

5.權利要求1的分離的核酸分子，其中編碼的CAR包括跨膜結構域，所述跨膜結構域包含選自以下蛋白的跨膜結構域：T細胞受體的α, β或ζ鏈, CD28, CD3 ε, CD45, CD4, CD5,CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137 和CD154。

6.權利要求1的分離的核酸分子，其中編碼的跨膜結構域包含SEQ ID NO: 15的序列。

7.權利要求6的分離的核酸分子，其中編碼跨膜結構域的核酸序列包含SEQ ID NO:8的序列、或與其具有95-99%同一性的序列。

8.權利要求1的分離的核酸分子，其中編碼的抗EGFRvIII結合結構域通過鉸鏈區與跨膜結構域連接。

9.權利要求8的分離的核酸分子，其中編碼的鉸鏈區包含SEQ ID NO:14。

10.權利要求9的分離的核酸分子，其中編碼鉸鏈區的核酸序列包含SEQ ID NO:7的序列、或與其具有95-99%同一性的序列。

11.權利要求1的分離的核酸分子，還包含編碼共刺激結構域的序列。

12.權利要求11的分離的核酸分子，其中編碼的共刺激結構域包含選自以下蛋白的功能性信號傳導結構域：OX40、CD27、CD28、CDS、ICAM-1、LFA-1 (CD11a/CD18)、ICOS (CD278)和4-1BB (CD137)。

13.權利要求11的分離的核酸分子，其中編碼的共刺激結構域包含SEQ ID NO:16的序列。

14.權利要求13的分離的核酸分子，其中編碼共刺激結構域的核酸序列包含SEQ IDNO:9的序列、或與其具有95-99%同一性的序列。

15.權利要求1的分離的核酸分子，還包含編碼胞內信號傳導結構域的序列。

16.權利要求15的分離的核酸分子，其中編碼的胞內信號傳導結構域包含4-1BB的功能性信號傳導結構域和/或CD3ζ的功能性信號傳導結構域。