[實用新型]一種用于分離亞細(xì)胞組分的勻漿器

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201420792054.1
• 申請日: 2014-12-16
• 公開（公告）號: CN204281757U
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 何向鋒;強福林;沈康;施文;王健
• 申請（專利權(quán)）人: 何向鋒;南通市腫瘤醫(yī)院
• 主分類號: C12M1/33
• 分類號: C12M1/33;C12M1/24;C12M1/38;C12M1/36;C12M1/34;C07K1/14
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 范晴

技術(shù)領(lǐng)域

本實用新型涉及亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的分離，特別涉及一種用于分離亞細(xì)胞組分的勻漿器。

背景技術(shù)

細(xì)胞由各種亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)組成，包括細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、自噬體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等，要觀察這些亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)或進行生化功能分析，需要分離純化各種亞細(xì)胞組分，離心技術(shù)是實現(xiàn)這一目標(biāo)的基本手段。在離心之前，需要先制備細(xì)胞勻漿或組織勻漿。勻漿是在低溫條件下，將細(xì)胞或組織放在勻漿器中加入等滲勻漿介質(zhì)（即0.25mol/L蔗糖—0.003mol/L氯化鈣溶液）研磨，使細(xì)胞或組織被機械地研碎成為包含各種亞細(xì)胞組分和包含物的混合物。

勻漿的方式有多種：手工勻漿、機器勻漿、超聲勻漿、反復(fù)凍融等，可對動植物組織或細(xì)胞進行柔軟的勻化處理，得到實驗需要的組織勻漿或細(xì)胞勻漿。

手工勻漿是將組織碎塊或細(xì)胞連同勻漿介質(zhì)或生理鹽水倒入玻璃勻漿管中進行勻漿，左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次（6～8分鐘），充分研碎，使組織勻漿化。使用玻璃勻漿器手工勻漿既費力、費時，又不夠均勻，還增加了污染的概率。機器勻漿，是利用研磨原理，采用機器為動力，帶動勻漿桿在勻漿器中運動，對動植物組織進行柔軟的勻化處理，得到實驗需要的細(xì)胞勻漿或組織勻漿。機器勻漿雖然解放了人力，仍為開放式操作，易于污染。超聲粉碎，是用超聲波細(xì)胞破碎儀使細(xì)胞破碎，易于損傷細(xì)胞器，并可影響某些酶的活性。培養(yǎng)或者分離的細(xì)胞可以用以上的方法勻漿，也可以反復(fù)凍溶3次左右（即讓細(xì)胞加適量的低滲液或者雙蒸水放低溫冰箱中結(jié)冰，溶解，再結(jié)冰，再溶解，反復(fù)3次左右），但有部分酶活力會受影響，且細(xì)胞器釋放不完全。?實用新型內(nèi)容

本實用新型目的是：提供一種用于分離亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的組織或細(xì)胞勻漿器，簡便、快捷、高效的制備組織或細(xì)胞勻漿。

本實用新型的技術(shù)方案是：

一種用于分離亞細(xì)胞組分的勻漿器，將細(xì)胞或組織塊分離成亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，所述勻漿器包括勻漿管，所述勻漿管包括管壁及位于管壁內(nèi)的管芯，所述管壁頂部封閉，底部蓋有管蓋，所述管芯包括定子套管和位于套管中的轉(zhuǎn)子，所述管蓋上設(shè)有轉(zhuǎn)子接頭，轉(zhuǎn)子與轉(zhuǎn)子接頭連接，所述分離器還包括位于勻漿管外部的電機，所述電機通過轉(zhuǎn)子接頭為轉(zhuǎn)子提供旋轉(zhuǎn)動力。

一種優(yōu)選方案是：所述組織勻漿器的管芯內(nèi)從上至下依次分為阿基米德螺旋管區(qū)和勻漿研磨區(qū)，所述阿基米德螺旋管區(qū)內(nèi)裝有螺旋桿，勻漿研磨區(qū)內(nèi)裝有研磨棒，所述螺旋桿和研磨棒連接組成轉(zhuǎn)子，研磨棒底部連接轉(zhuǎn)子接頭，所述勻漿研磨區(qū)的定子套管內(nèi)壁對應(yīng)研磨棒的位置設(shè)有研磨層。所述定子套管基部設(shè)有若干均勻分布的孔洞。進一步優(yōu)選的，所述孔洞的直徑為2.0-3.0mm。

另一種優(yōu)選方案是：所述細(xì)胞勻漿管的管芯內(nèi)從上至下依次分為阿基米德螺旋管區(qū)、勻漿研磨區(qū)和負(fù)壓旋切區(qū)，所述阿基米德螺旋管區(qū)內(nèi)裝有螺旋桿，勻漿研磨區(qū)內(nèi)裝有研磨棒，負(fù)壓旋切區(qū)內(nèi)裝有旋切刀頭，所述螺旋桿、研磨棒和旋切刀頭依次連接組成轉(zhuǎn)子，旋切刀頭底部連接轉(zhuǎn)子接頭。所述勻漿研磨區(qū)的定子套管內(nèi)壁對應(yīng)研磨棒的位置設(shè)有研磨層。所述負(fù)壓旋切區(qū)的定子套管對應(yīng)旋切刀頭的部分設(shè)有若干均勻分布的孔洞。進一步優(yōu)選的，所述孔洞的直徑為0.8-1.2mm。

對于上述兩種方案：

優(yōu)選的，所述轉(zhuǎn)子通過轉(zhuǎn)子接頭與管蓋的接合處密封。

優(yōu)選的，所述勻漿管外部還設(shè)有防護保溫罩。

進一步優(yōu)選的，所述防護保溫罩內(nèi)裝有溫度探頭和制冷壓縮機，所述溫度探頭和制冷壓縮機分別與一微處理器連接，所述制冷壓縮機還連接有循環(huán)風(fēng)扇；所述微處理器還連接到電機和一觸控屏。

本實用新型的優(yōu)點是：

1．本實用新型所提供的用于分離亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的勻漿器，配合使用組織勻漿管或細(xì)胞勻漿管，內(nèi)置特殊管芯，組成自動系統(tǒng)，微處理器定義特殊的應(yīng)用程序（時間、速度、方向）將操作規(guī)程優(yōu)化，可以方便地處理樣本，使樣本制備過程標(biāo)準(zhǔn)化、程序化，減少人為因素的影響，變操作者依賴性為非操作者依賴性。

2．本實用新型的勻漿器可根據(jù)需要選用不同的勻漿管，當(dāng)樣本為組織塊時，可采用帶有阿基米德螺旋管區(qū)、勻漿研磨區(qū)和負(fù)壓旋切區(qū)三個區(qū)域的組織勻漿管，當(dāng)樣本為單細(xì)胞懸液時可直接選用帶有阿基米德螺旋管區(qū)、勻漿研磨區(qū)兩個區(qū)域的細(xì)胞勻漿管，切換使用靈活。使用組織勻漿管時所需組織樣本在分離前只需簡單制備成數(shù)毫米大小的組織塊即可，組織勻漿管內(nèi)的旋切刀可自動將其旋切成1.0mm³大小的微小組織塊，進而通過勻漿研磨區(qū)制備成亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)勻漿液，可用于密度梯度離心和差速離心分離亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。