[實用新型]一種多功能試劑盒

有效

• 申請號: 201420653901.6
• 申請日: 2014-11-04
• 公開（公告）號: CN204198741U
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 金國賢;劉瑩;金碩
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四六三醫院
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12M1/00
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 叢芳

技術領域

本實用新型屬于生物技術領域，涉及一種多功能試劑盒，該試劑盒中含有細胞轉染、細胞裂解、QPCR實驗用的試劑。

背景技術

hnRNPs是一種主要存在于細胞核內的具有調節前體RNA剪切、拼接、轉錄的過程的核糖核蛋白，廣泛存在于各種組織細胞內。hnRNPA2/B1是hnRNPs家族的主要成員，hnRNPA2/B1能與單鏈端粒酶重復序列特異性結合，起到保護端粒酶防止核酸酶使其降解，并活化端粒酶的作用。

AXL是一種受體酪氨酸激酶receptor?tyrosine?kinases(RTKs)，AXL與其他兩種RTKs：Tyro3和Mer共同稱作TAM酪氨酸受體亞家族，研究證明TAM的活化及信號轉導在細胞的諸多生物學行為方面起作用，包括細胞存活、增殖、遷移、粘附等方面。有研究顯示在多種腫瘤中存在AXL的高表達，包括急性白血病、乳腺癌、結腸癌、肺癌、卵巢癌及前列腺癌。

RNA干擾(siRNA)是機體內廣泛存在的一種雙鏈RNA介導的序列特異性基因沉默現象[Fire?A.,et?a1.Potent?and?specific?genetic?interference?by?double-stranded?RNA?in?Caenorhabditis?elegans.Nature?1998；391:806-811]，因其具有沉默效率高、特異性強以及操作簡便等優于傳統基因敲除手段的優點而得到迅速發展，現成為生命科學領域中重要的研究工具[Arziman?Z.,et?al.E-RNAi:a?web?application?to?design?optimized?RNAi?constructs.Nucleic?Acids?Res2005；33:W582-W588]。siRNA與蛋白質結合形成RNA誘導沉默復合物(RNA-induced?silencing?complex，RISC)。該復合物能夠結合到同源的mRNA上并誘導其降解。

Y.He在其2009年的研究中通過高通量基因芯片篩查技術檢測到在Colo16鱗癌細胞系中通過RNA干擾技術人為降低hnRNPA2/B1的表達，引起下游123個目標基因的差異表達，其中就包括AXL[He?Y,et?al.,Downstream?targets?of?heterogeneous?nuclear?ribonucleoprotein?A2?mediate?cell?proliferation,Molecular?carcinogenesis,2009,48(2):167-179]，初步提示我們二者存在相互作用的可能性。但關于二者相關性更深入的研究目前未見報道。

為了研究肺癌細胞中hnRNPA2/B1基因與AXL基因、癌癥細胞增殖和生長的關系，申請人在肺癌細胞中干擾hnRNPA2/B1基因的表達，檢測其對AXL基因表達的影響以及檢測其對癌癥細胞增殖和生長的影響。在研究的過程中需要進行siRNA轉染、細胞裂解、RNA提取、QPCR等實驗，因此需要使用大量的試劑，每一實驗步驟中使用的試劑分散放置給操作人員帶來諸多不便，如需要大量的時間尋找上述試劑，因此將上述試劑分類放置在同一個地方能夠節省操作人員的不少時間，并且方便日后進行同一實驗。

發明內容

為了解決現有技術的不足，本實用新型的目的在于提供一種多功能試劑盒。所述試劑盒中含有細胞轉染、細胞裂解、QPCR實驗用的試劑，方便實驗人員進行連續實驗，節省尋找試劑的時間。本實用新型結構簡單、設計合理，使用方便、不易受污染。