[實(shí)用新型]一種NOSLAP基因分型的ARMS-qPCR檢測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201420642771.6
• 申請(qǐng)日: 2014-10-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN204185476U
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張道允;鞏子英;張恒;羅堅(jiān)誠(chéng);賈寧
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇所羅門(mén)兄弟醫(yī)學(xué)科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12M1/00
• 分類(lèi)號(hào): C12M1/00;C12Q1/68
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種檢測(cè)試劑盒，尤其涉及一種NOSLAP基因分型的ARMS-qPCR檢測(cè)試劑盒。

背景技術(shù)

猝死是指自然發(fā)生、出乎意料的突然死亡，也叫急死，即看來(lái)貌似健康的人或病情經(jīng)治療后已穩(wěn)定或正在好轉(zhuǎn)的患者，在很短時(shí)間發(fā)生意想不到的非創(chuàng)傷性死亡。中國(guó)心臟性猝死年齡分布為18-80歲(均值43.8歲)，其中18-39歲的青年和40-59歲的中年猝死比較常見(jiàn)(43％和39％)，而60-80歲老年猝死較少見(jiàn)(17.9％)。男女比例為4.3∶1。有數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)每年死于心臟性猝死的人數(shù)多達(dá)55萬(wàn)。也就是說(shuō)，每天至少有1000多人猝死。而根據(jù)媒體報(bào)道，1998年北京室120轉(zhuǎn)運(yùn)救治的中青年猝死者80多名，但到了2011年這一數(shù)字上升為270多名(鞏江等，2013)。

猝死的原因很多，臨床上以心血管疾病所引起的猝死最為常見(jiàn)而重要，稱(chēng)為心臟性猝死。其中冠心病、急性心肌梗死患者最為多見(jiàn)。急性心肌梗死可以迅速出現(xiàn)休克、昏迷，以致猝死(潘俊宏，2013)。

基因的缺陷是心臟性猝死最重要的原因。通過(guò)對(duì)15842名研究對(duì)象采取心電圖檢查以及基因組關(guān)聯(lián)分析后發(fā)現(xiàn)，Noslap基因的突變可以改變心臟肌肉的收縮時(shí)間即QT間期，進(jìn)而導(dǎo)致猝死危險(xiǎn)上升(Arking?et?al.2006)。

Noslap位于第一號(hào)染色體的q23.3，編碼一個(gè)一氧化氮合成酶連接蛋白，連接一氧化氮合成酶及其底物(Kao?et?al.2009)。近年來(lái)，有研究陸續(xù)報(bào)道此基因的變異體會(huì)影響QT間期(Post?et?al.2007，Lehtinen?et?al.2008，Eijgelsheim?et?al.2009)，會(huì)造成猝死率提高(Raitakari?et?al.2009)。對(duì)于我們中國(guó)人來(lái)說(shuō)，基因型為Noslap?rs10918859G/A+AA型的人罹患猝死的風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)大于rs10918859GG型的人(Huang?et?al.2013)，因此，Noslap?rs10918859位置不同的基因型是預(yù)測(cè)猝死風(fēng)險(xiǎn)的極好標(biāo)志物，檢測(cè)Noslap?rs10918859基因型對(duì)于提前預(yù)防猝死，提高疾病防護(hù)風(fēng)險(xiǎn)具有重要的意義。

可用于Noslap?rs10918859分型的技術(shù)很多，包括如DNA直接測(cè)序法、雜交芯片法、焦磷酸測(cè)序法以及變性高效液相色譜法等。其中，DNA測(cè)序法為基因分型的金標(biāo)準(zhǔn)，該方法存在如下缺點(diǎn)：檢測(cè)的靈敏度不高，只有大于15％的突變才能檢測(cè)到；費(fèi)時(shí)，操作復(fù)雜，對(duì)操作人員要求高；非閉管操作，涉及PCR擴(kuò)增后的操作，因此易被污染，造成結(jié)果的不理想；通量太小，一次最多只能做24個(gè)，很難大規(guī)模開(kāi)展。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)技術(shù)現(xiàn)狀提供一種密封性良好的NOSLAP基因分型的ARMS-qPCR檢測(cè)試劑盒。

本實(shí)用新型解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為：一種NOSLAP基因分型的ARMS-qPCR檢測(cè)試劑盒，包括盒體和位于盒體上方的盒蓋，所述盒體具有容置腔，還包括固定座和海綿墊，所述固定座容置在上述容置腔內(nèi)并縱向開(kāi)設(shè)有6個(gè)容置孔和1個(gè)容置槽，6個(gè)所述容置孔的孔腔內(nèi)分別容置有NOSLAP-R引物試劑管、NOSLAP-C引物試劑管、NOSLAP-F1引物試劑管、NOSLAP-F2引物試劑管、NOSLAP-Taqman管和陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒管；所述容置槽的槽腔內(nèi)容置有PCR緩沖液試劑瓶；6個(gè)所述容置孔的孔腔的底部、所述容置槽的槽腔的底部分別鋪設(shè)有所述的海綿墊；

所述盒蓋的一側(cè)與盒體的開(kāi)口處轉(zhuǎn)動(dòng)連接，另一側(cè)向下彎折形成連接部，所述連接部朝向盒體的側(cè)壁設(shè)有金屬部件，相應(yīng)的，所述盒體的側(cè)壁對(duì)應(yīng)金屬部件處設(shè)有磁性部件。

作為改進(jìn)，NOSLAP基因分型的ARMS-qPCR檢測(cè)試劑盒還包括備用容置槽，所述備用容置槽的槽腔內(nèi)容置有裝有PCR緩沖液備用試劑瓶，所述備用容置槽的槽腔底部鋪設(shè)有海綿墊，所述備用容置槽與容置槽并列排布在固定座上。

優(yōu)選的，6個(gè)所述容置孔在固定座上分兩排平行排列。

優(yōu)選的，6個(gè)所述容置孔分別為能容納1.5mlEP管的孔洞，相應(yīng)的，所述NOSLAP-R引物試劑管、NOSLAP-C引物試劑管、NOSLAP-F1引物試劑管、NOSLAP-F2引物試劑管、NOSLAP-Taqman管和陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒管分別采用1.5mlEP管。

優(yōu)選的，所述金屬部件為鐵片，所述磁性部件為磁鐵塊。