[實用新型]一種用于肝組織體外循環灌流消化的實驗儀器

有效

• 申請號: 201420633713.7
• 申請日: 2014-10-29
• 公開（公告）號: CN204174199U
• 公開（公告）日: 2015-02-25
• 發明（設計）人: 張金娟;楊勤;肖俊;陳騰祥;郭曉婷;韓冰;謝汝佳
• 申請（專利權）人: 貴陽醫學院
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/12
• 代理公司: 北京聯創佳為專利事務所(普通合伙) 11362
• 代理人: 郭防;劉美蓮

技術領域

本實用新型涉及一種實驗儀器，尤其涉及一種用于肝組織體外循環灌流消化的實驗儀器。

背景技術

在對肝臟相關疾病的實驗研究中，從實驗動物甚至人的肝組織中分離培養肝細胞、庫普否細胞、肝星狀細胞等肝組織中的細胞是必不可少的實驗方法。目前從實驗動物體內分離這些細胞往往采用的是原位循環(體內循環)消化的方法，具體方法是：將實驗動物麻醉后，腹部消毒，打開腹腔，暴露門靜脈及下腔靜脈，行門靜脈插管，經門靜脈插管灌注平衡鹽液(灌注液)，并剪開下腔靜脈放血，待肝臟中血液沖凈、肝臟呈黃色后停止灌注平衡鹽液，開始灌注有消化作用的酶溶液(一般為膠原酶)。灌注酶溶液時，需切開胸廓，暴露心臟，剪開右心房，將一導管逆行插入腔靜脈橫膈上方，結扎，下腔靜脈放血處用止血鉗夾緊；使酶溶液從腔靜脈導管流出，將腔靜脈導管流出液回收進膠原酶溶液瓶，循環灌注。此外，還需盡量結扎肝與膈肌之間的側支循環血管，以減少酶的流失。通過原位循環消化，酶溶液將肝組織內膠原組織消化，使細胞易于分散，便于細胞的分離。但這種原位循環消化方法存在以下缺點：1、實驗中手術操作難度大，不易掌握；2、循環灌流過程中，部分酶溶液會經肝包膜滲出，無法經腔靜脈導管回流；且肝與膈肌之間存在側支循環血管，且有的較細，不可能將所有的側支完全結扎，循環過程中酶溶液也會經未結扎的側支血管流走，故這種循環方法必然有大量昂貴的消化酶損失；3、原位灌注消化后的肝包膜軟化、極易破裂，一旦肝包膜破裂，則容易導致細胞損失或污染，進而導致實驗失敗。為了使手術操作簡單化，有學者將上述方法進行了改進，改進的方法為：于下腔靜脈處做一插管，待肝臟中血液沖凈、換用含酶消化液進行灌注時，將下腔靜脈插管接入酶溶液瓶，循環灌注。這種方法減少了一些操作步驟，適當降低了手術難度，但仍需做下腔靜脈插管，且可能存在循環灌注過程中消化酶丟失更多的問題，同時，消化后的肝臟從動物體上取下時仍存在肝包膜破裂所致的細胞損失及易污染等致命缺陷。

申請號為“200410084625.7”的專利申請公開了一種“生物人工肝用豬和人肝細胞的制備方法”，雖然其公開了可采用體外循環的方法來分離肝細胞，但是該申請僅僅描述了提取肝細胞的方法(包括分離方法中的條件、試劑、時間、步驟等)，并未公開任何關于體外循環灌流裝置的內容,因而無法在實際應用時進行實施；

申請號為“01210227719.X”的專利申請公開了“一種用于體外灌流法的重金屬吸附劑及其制備方法”，雖然其也涉及“體外灌流”，但是其僅僅指全血體外灌流，目的是用于吸附血液中重金屬離子，因而并不適用于分離肝組織中的各種細胞及對肝組織中各種細胞的生物學特性進行相關實驗研究。

申請號為“201410142209.1”的專利申請公開了一種“器官脫細胞循環灌流再生培養瓶”，雖然其也涉及循環灌流，但是該裝置主要是用于脫細胞時去除細胞而保留器官支架(器官支架主要是一些膠原組織，實驗中器官上的細胞被消化、脫落下來，留下支架)，而且其整個脫細胞過程需要3-5天，因而這些細胞脫落后已基本失活或嚴重受損，后期培養的成功率也極低，因而該培養瓶并不適用于分離肝組織中的各種細胞及對肝組織中各種細胞的生物學特性進行相關實驗研究。因而目前急需一種體外循環灌流實驗儀器，來實現分離肝組織中的各種細胞以用于對肝組織中各種細胞的生物學特性進行相關實驗研究，根據檢索，申請人并未發現有能解決上述問題的實驗儀器公開。

實用新型內容

本實用新型的目的在于，提供一種用于肝組織體外循環灌流消化的實驗儀器，它可以有效解決現有技術中存在的問題，用于快速分離肝組織中的各種細胞及實現對肝組織中各種細胞的生物學特性進行相關實驗研究。

為解決上述技術問題，本實用新型采用如下的技術方案：包括恒溫箱和設于恒溫箱內的灌流回路，所述的灌流回路包括：順次連接的盛放肝組織容器、蠕動泵裝置、三通管、過濾裝置和無菌管道；所述的蠕動泵裝置包括蠕動泵及與蠕動泵對應的柔性管道，柔性管道繞過對應的蠕動泵并且兩端分別與盛放肝組織容器和三通管連通。

上述的無菌管道具有一定的硬度，并且包括粗細不等的幾種型號，可用于行門靜脈插管，如靜脈留置針去芯、聚乙烯管、靜脈輸液針去針等。

本實用新型中所述的柔性管道應設計成可消毒的，因為柔性管道內流動的液體直接與肝組織接觸，為保證分離到的細胞無菌，所有與肝組織接觸的器皿都應是無菌的；同時該管道可重復使用，因而也有必要將其設計成可消毒的。

優選的，所述的恒溫箱的溫度為37～39℃，從而可以使得在含酶灌注液時使得酶的活性較高。