[實(shí)用新型]一種帶有顯微鏡鏡檢浮載液的線蟲(chóng)玻片

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201420588396.1
• 申請(qǐng)日: 2014-10-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN204255726U
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-04-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邊勇;劉若思;鄭春生;汪萬(wàn)春;高文娜;呂玉峰;江麗輝
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中華人民共和國(guó)北京出入境檢驗(yàn)檢疫局
• 主分類(lèi)號(hào): G01N1/30
• 分類(lèi)號(hào): G01N1/30
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及利用顯微鏡對(duì)線蟲(chóng)等微小動(dòng)物進(jìn)行觀察、鑒定、拍照的技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種帶有顯微鏡鏡檢浮載液的線蟲(chóng)玻片。

背景技術(shù)

線蟲(chóng)(nematode)是一種低等無(wú)脊椎動(dòng)物，廣泛分布于陸地、海洋和湖泊之中。據(jù)保守估計(jì)，全世界線蟲(chóng)種類(lèi)超過(guò)50萬(wàn)種，線蟲(chóng)中的一些種類(lèi)具有寄生性，按照寄主種類(lèi)可分為動(dòng)物寄生類(lèi)和植物寄生類(lèi)。線蟲(chóng)通過(guò)其對(duì)寄主的危害，從而引起經(jīng)濟(jì)損失，有些種類(lèi)則直接危害人類(lèi)。長(zhǎng)期以來(lái)，線蟲(chóng)學(xué)家致力于對(duì)線蟲(chóng)危害的機(jī)理機(jī)制和防治措施進(jìn)行研究，而對(duì)線蟲(chóng)進(jìn)行分類(lèi)鑒定是研究其致病機(jī)理的基礎(chǔ)。目前在線蟲(chóng)分類(lèi)鑒定領(lǐng)域使用的線蟲(chóng)鑒定方法主要有形態(tài)學(xué)鑒定方法和分子生物學(xué)鑒定方法，雖然近些年來(lái)分子生物學(xué)的蓬勃發(fā)展使線蟲(chóng)分類(lèi)鑒定進(jìn)入了新的層次，但由于分子鑒定發(fā)展歷史還不長(zhǎng)，其鑒定體系尚未完善，同時(shí)分子生物學(xué)鑒定需要的技術(shù)要求較高，需要特定的儀器設(shè)備才能開(kāi)展。因此可預(yù)見(jiàn)的一段時(shí)期內(nèi)，利用顯微鏡等簡(jiǎn)單儀器進(jìn)行的形態(tài)學(xué)鑒定依然是線蟲(chóng)分類(lèi)鑒定的主要技術(shù)手段。線蟲(chóng)研究工作中，在利用顯微鏡進(jìn)行線蟲(chóng)分類(lèi)鑒定時(shí)，一般是將線蟲(chóng)蟲(chóng)體置放于載玻片中央的浮載液中，加蓋蓋玻片后進(jìn)行顯微鏡鏡檢觀察。線蟲(chóng)玻片制作作為最經(jīng)典實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一，對(duì)線蟲(chóng)形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察、各種數(shù)據(jù)的測(cè)量及分類(lèi)鑒定，尤其對(duì)鑒定的新種更為重要。如果玻片效果不佳，則后續(xù)得到的結(jié)果可信度將大打折扣，因此制作好的線蟲(chóng)玻片是進(jìn)行傳統(tǒng)的以形態(tài)特征為基礎(chǔ)的分類(lèi)和鑒定研究的前提條件。線蟲(chóng)鏡檢觀察的要點(diǎn)是各種微小特征機(jī)構(gòu)，包括消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)和體表系統(tǒng)的各結(jié)構(gòu)形狀、大小、數(shù)量等，其中部分結(jié)構(gòu)特征大小僅2μm-10μm，觀察時(shí)受到顯微鏡分辨率和樣品自身結(jié)構(gòu)的影響，觀察較為困難，從而影響鑒定的準(zhǔn)確性。解決的辦法通常是提高顯微鏡的分辨率及降低樣品自身結(jié)構(gòu)的影響兩種途徑。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型主要是提供一種帶有顯微鏡鏡檢浮載液的線蟲(chóng)玻片，通過(guò)提高顯微鏡的分辨率及降低樣品自身結(jié)構(gòu)的影響從而綜合改善鑒定中對(duì)線蟲(chóng)細(xì)微特征的觀察效果。

為達(dá)到上述目的，本實(shí)用新型的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一種帶有顯微鏡鏡檢浮載液的線蟲(chóng)玻片，它包括載玻片、蓋玻片，所述載玻片上滴加有折射率為1.35～1.45的浮載液，所述浮載液PH值為7.5～10，所述蓋玻片加蓋于所述載玻片上，所述載玻片和蓋玻片使用凡士林封閉其四周；

由于相比蒸餾水作為鏡檢介質(zhì)的浮載液的折射率更高且更接近線蟲(chóng)蟲(chóng)體自身的折射率，增加顯微鏡的分辨率和線蟲(chóng)蟲(chóng)體的透明度，由于所載浮載液的滲透，提高了蟲(chóng)體的膨脹度，改善了對(duì)線蟲(chóng)細(xì)微特征的觀察效果。

附圖說(shuō)明

圖1為本實(shí)用新型一種帶有顯微鏡鏡檢浮載液的線蟲(chóng)玻片的示意圖。

附圖中各標(biāo)記如下：1、載玻片，2、蓋玻片，3、浮載液。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。

實(shí)施例一：

按照蒸餾水∶二甲基亞砜∶三乙醇胺∶體積百分濃度40％的甲醛溶液∶體積百分濃度96％的酒精∶甘油按體積比50∶(0.1～1)∶(1～10)∶(0.1～1)∶(1～10)∶(1～20)配置浮載液，分別量取無(wú)菌蒸餾水50mL，二甲基亞砜溶液0.1ml，氫氧化鉀20mg，三乙醇胺1mL，甘油20mL，96％體積濃度百分比的酒精1mL，40％體積濃度百分比的甲醛溶液1mL，將50ml無(wú)菌蒸餾水倒入100ml燒杯，放置于加熱板上，60℃保持5分鐘；向以上蒸餾水中加入0.1mL二甲基亞砜溶液，攪拌溶解。繼續(xù)加入1mL三乙醇胺，攪拌至全部溶解；將量取的甘油逐步加入，由于甘油折射率高達(dá)1.48，甘油的添加將改變前述溶液的折射率，控制甘油加入量，控制浮載液折射率在1.35～1.45之間，逐步向加有二甲基亞砜的蒸餾水中加入所稱量的氫氧化鉀，并不斷攪拌，通過(guò)控制浮載液中氫氧化鉀濃度，調(diào)節(jié)浮載液PH值使之在7.5～10之間。將溶液在加熱板上保溫10分鐘后，關(guān)閉加熱板，自然冷卻30分鐘；向冷卻后的溶液中加入1mL體積百分濃度96％的乙醇溶液，1mL體積百分濃度40％的甲醛溶液；得到線蟲(chóng)顯微鏡鏡檢浮載液。將1μL線蟲(chóng)顯微鏡鏡檢浮載劑3滴加于載玻片1中央，挑取線蟲(chóng)若干條，置于載玻片1上線蟲(chóng)顯微鏡鏡檢浮載液3中，加蓋蓋玻片2，使用凡士林封閉載玻片1和蓋玻片2四周。

實(shí)施例二：