[實(shí)用新型]一種基于微流控芯片的多功能集成分析多孔細(xì)胞培養(yǎng)芯片

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201420543019.6
• 申請日: 2014-09-22
• 公開（公告）號: CN204198745U
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 秦建華;許慧;李中玉
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00
• 代理公司: 沈陽晨創(chuàng)科技專利代理有限責(zé)任公司 21001
• 代理人: 張晨

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及細(xì)胞培養(yǎng)分析的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于微流控芯片的多功能集成分析多孔細(xì)胞培養(yǎng)芯片。

背景技術(shù)

市場上的各類細(xì)胞培養(yǎng)孔板以及細(xì)胞培養(yǎng)皿進(jìn)行細(xì)胞接種密度不均，細(xì)胞容易聚集，且邊緣視野不清，只能在中間區(qū)域才易于觀察。進(jìn)行免疫染色相關(guān)實(shí)驗(yàn)試劑比較昂貴，如12孔板、24孔板進(jìn)行免疫染色時(shí)浪費(fèi)試劑較多，加液換液時(shí)，底部細(xì)胞容易被沖起；而96孔板雖然相對節(jié)省，但視野不清基本無法進(jìn)行清晰的顯微觀察，加液時(shí)也容易將細(xì)胞沖起，并且如果不是一次做大量的樣本，還會造成多余孔的浪費(fèi)。常見細(xì)胞培養(yǎng)孔板及細(xì)胞培養(yǎng)皿也僅能進(jìn)行常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，無法觀察多種細(xì)胞相互作用或多種因素的分批刺激，不能滿足如細(xì)胞共培養(yǎng)這樣特殊的實(shí)驗(yàn)需求。

微流控芯片技術(shù)作為一門迅速發(fā)展起來的科學(xué)技術(shù)，已經(jīng)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域展現(xiàn)了其獨(dú)特的優(yōu)勢，更因其同細(xì)胞尺寸匹配、環(huán)境同生理環(huán)境相近、在時(shí)間和空間維度上能夠提供更為精確的操控，易于通過靈活設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)多種細(xì)胞功能研究等特點(diǎn)而成為新一代生物仿生和細(xì)胞研究的重要平臺。現(xiàn)有階段的基于微流控芯片的細(xì)胞分析平臺大多是利用同生物相容性好的PDMS硅膠材料作為芯片材料，具有很好的生物相容性，透光透氣，實(shí)現(xiàn)芯片內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)和各種生物物理、生物化學(xué)刺激以便得到在不同細(xì)胞外微環(huán)境下細(xì)胞的行為變化，諸如存活、增殖、凋亡、分化等。PDMS芯片經(jīng)無水乙醇處理后可逆封接的性質(zhì)，保證封接時(shí)密閉不漏液，還可以隨時(shí)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求揭下PDMS整體芯片。利用PDMS材料制作適合顯微觀察、免疫染色的細(xì)胞培養(yǎng)池進(jìn)行細(xì)胞分析以及如細(xì)?胞共培養(yǎng)等特定實(shí)驗(yàn)還處于空白階段。

發(fā)明內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的是提供一種基于微流控芯片制作技術(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)芯片，該細(xì)胞培養(yǎng)芯片應(yīng)用于細(xì)胞在顯微觀察、免疫染色及細(xì)胞共培養(yǎng)等特定實(shí)驗(yàn)的研究。

本實(shí)用新型一種基于微流控芯片的多功能集成分析多孔細(xì)胞培養(yǎng)芯片，該細(xì)胞培養(yǎng)芯片主要由細(xì)胞培養(yǎng)池、小皿組成；細(xì)胞培養(yǎng)池位于小皿內(nèi)底部，與小皿可逆封接；細(xì)胞培養(yǎng)池上有2～6個(gè)孔室。

所述細(xì)胞培養(yǎng)池(1)的材料為可透光透氣的PDMS聚合物，所述孔室由打孔器制出。

所述細(xì)胞培養(yǎng)池為厚度為1mm～5mm。

細(xì)胞培養(yǎng)池先經(jīng)無水乙醇浸泡12小時(shí)，80℃烘干后與小皿可逆封接

本實(shí)用新型提供的細(xì)胞培養(yǎng)芯片，因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)池材料透光性好，且高度較低，在顯微鏡下觀察細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)受培養(yǎng)池壁的影響較小，視野里沒有明顯的明暗影響。

本實(shí)用新型提供的細(xì)胞培養(yǎng)芯片，因?yàn)轶w積小，所需細(xì)胞接種液量小，細(xì)胞接種時(shí)密度更均一，加液換液時(shí)微升級的操作對細(xì)胞影響很小，不易將細(xì)胞沖起。

本實(shí)用新型提供的細(xì)胞培養(yǎng)芯片，可以在細(xì)胞培養(yǎng)池不同孔室中接種不同細(xì)胞，細(xì)胞生長良好時(shí)，在小皿中加培養(yǎng)液沒過細(xì)胞培養(yǎng)池，觀察不同細(xì)胞分泌的因子對其他細(xì)胞的相關(guān)影響。

本實(shí)用新型提供的細(xì)胞培養(yǎng)芯片，可以在細(xì)胞培養(yǎng)池不同孔室中接種不同細(xì)胞，待細(xì)胞生長良好時(shí)，可以將細(xì)胞培養(yǎng)池揭下，在小皿中加培養(yǎng)液繼續(xù)培?養(yǎng)，觀察不同細(xì)胞間是否有促進(jìn)相互遷移或排斥的作用。

使用本實(shí)用新型的細(xì)胞培養(yǎng)芯片進(jìn)行細(xì)胞的接種與培養(yǎng)時(shí)：細(xì)胞密度為5×10⁵cells/mL，加液量為30μL-150μL。

本實(shí)用新型提供的基于細(xì)胞培養(yǎng)芯片的細(xì)胞培養(yǎng)、免疫染色顯微觀察方法，可采用生物學(xué)上常用的細(xì)胞培養(yǎng)、檢測手段對細(xì)胞培養(yǎng)芯片的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、檢測。

本實(shí)用新型細(xì)胞培養(yǎng)芯片具操作簡便，成本低廉，試劑及細(xì)胞消耗量低，顯微觀察視野無明顯的明暗影響，加液換液時(shí)細(xì)胞不易被沖起，細(xì)胞接種時(shí)密度更均一等優(yōu)點(diǎn)，能夠?qū)崿F(xiàn)特定的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模诩?xì)胞培養(yǎng)與分析評價(jià)方面有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

附圖說明

圖1本實(shí)用新型細(xì)胞培養(yǎng)芯片整體結(jié)構(gòu)示意圖；其中1為小皿，2為細(xì)胞培養(yǎng)池，3為孔室。

具體實(shí)施方式

下面的實(shí)施例將對本實(shí)用新型予以進(jìn)一步的說明，但并不因此而限制本實(shí)用新型。

一種基于微流控芯片的多功能集成分析多孔細(xì)胞培養(yǎng)芯片，該細(xì)胞培養(yǎng)芯片主要由細(xì)胞培養(yǎng)池1、小皿2組成；細(xì)胞培養(yǎng)池1位于小皿2內(nèi)底部，與小皿2可逆封接而成；細(xì)胞培養(yǎng)池上有2～6個(gè)孔室3。

所述細(xì)胞培養(yǎng)池1的材料為可透光透氣的PDMS聚合物，所述孔室3由打孔器制出。

所述細(xì)胞培養(yǎng)池1為厚度為1mm～5mm。