[實用新型]一種快速檢測赭曲霉毒素A的膠體金試劑板

有效

• 申請號: 201420428835.2
• 申請日: 2014-07-31
• 公開（公告）號: CN204165982U
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 張波;雷達;劉向陽
• 申請（專利權）人: 北京康源泰博生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型屬于食品安全檢測領域，涉及一種膠體金檢測試紙板，具體涉及一種快速檢測糧油、飼料中赭曲霉毒素A（ochratoxins?A,OTA）的膠體金試紙板。

背景技術

?赭曲霉毒素(Ochratoxins)是一組結構類似的真菌毒素，有A、B、C、D?4種化合物，主要危及人和動物腎臟，其中毒性最大、與人類健康關系最密切、產毒量最高、對農作物的污染最重、分布最廣的是赭曲霉毒素A?(Ochratoxin?A，OTA)。赭曲霉毒素A是被國際癌癥研究機構（LARC）確定為ⅡB類致癌物（可能引起人類癌癥的物質）的一種真菌毒素，它能致癌、致畸、致突變、破壞免疫系統，對肝、腎臟造成損害，還可導致神經中毒。OTA主要毒害動物的腎臟和肝臟，腎臟是第一靶器官，只有劑量很大時才出現肝臟病變，其中豬和禽類的敏感性最強。在已發現的真菌毒素家族中，根據其重要性及危害性排序，OTA被認為是僅次于黃曲霉毒素而列第二位。自然界中產生OTA的真菌以曲霉菌屬和青霉菌屬為主。在濕熱的南方一般以赭曲霉菌為主，侵害水分大于16%的糧食和飼料；而寒冷干燥的北方以青霉菌為主，有些青霉菌在0℃左右仍能生長，給糧食貯藏帶來極大困難。

OTA?是污染農作物的一種較常見的真菌毒素，對動物和人的健康有很大潛在危害。隨著對OTA?毒性研究的深入，人們越來越重視它對人類健康的影響。至今全世界已經有11個國家制訂了食品(1～50μg/kg)?和動物飼料(100～1000μg/kg)?中OTA?的限量標準。我國GB?2761-2011“食品安全國家標準?食品中真菌毒素限量”中規定谷物及其制品，豆類及其制品中赭曲霉毒素A的限量標準為5μg/kg；GB?13078.2-2006?“飼料衛生標準?飼料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的允許量”中規定配合飼料，玉米中赭曲霉毒素A的限量標準為100μg/kg。

目前糧油、飼料中赭曲霉毒素A含量的檢測方法主要采用薄層色譜法，酶聯免疫吸附法，高效液相色譜法以及液質聯用法等檢測方法。薄層色譜法作為標準方法雖然被廣泛使用沿用至今，特別是在一些基層使用單位，但其靈敏度較低，操作過程中需要接觸更多的有機溶劑等有毒有害試劑；液相色譜和液質聯用法雖然可以精確地進行定性和定量分析，但是由于其設備昂貴、操作復雜和對樣品的純度有較高的要求，需要專業的操作人員，導致檢測成本高、周期長，無法滿足大批量樣本快速篩查的需要。酶聯免疫吸附法作為快速方法，雖然具有快速、靈敏、操作簡單等特點，但是仍然需要一定的操作要求和環境，不太適用于戶外和現場操作。

膠體金免疫層析法是利用抗原抗體的特異反應，以條狀纖維層析材料為固相，通過毛細管作用使樣品溶液在層析材料上泳動，以膠體金為顯色媒介，將反應所需的原料大部分整合到試劑板上，在層析過程中完成檢測反應的的一種簡易快速的免疫學檢測技術。該方法即克服了酶聯免疫吸附法的一些不足，又具有快速、操作簡單、特異性強、不需要額外設備等優點。目前被廣泛應用于生物技術諸多領域。

發明內容

本實用新型針對糧油、飼料中的赭曲霉毒素A含量檢測展開研究，提供一種具有快速、操作簡單、特異性強、靈敏度高、不需要額外設備等特點，可用于現場快速檢測糧油中赭曲霉毒素A含量的膠體金免疫檢測試劑板。檢測過程不受地點限制，十幾分鐘即可完成對樣品中赭曲霉毒素A的定性和半定量測定。

本試劑板由上下兩塊塑料卡殼和試紙條組成，試紙條由依次黏貼在背襯上的樣品墊、膠體金結合墊、反應膜和吸水墊組成。其中樣品墊、膠體金結合墊、反應膜和吸水墊在相鄰的地方有2mm的重疊，以保證層析作用從樣品墊到吸水墊的順利進行，使樣品溶液中的有效成分、反應膜上的檢測區及質控區與膠體金結合墊上的膠體金單抗偶聯物順利發生反應。

所述膠體金結合墊上包被有抗赭曲霉毒素A鼠單抗與膠體金的偶聯物；反應膜上從樣品墊至吸水墊方向依次包被有OTA-載體蛋白偶聯物和羊抗鼠IgG，分別作為檢測區和質控區。