[實用新型]一種檢測涕滅威的新型適體試紙

有效

• 申請號: 201420428546.2
• 申請日: 2014-07-31
• 公開（公告）號: CN204008470U
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 王耘;王淮慶
• 申請（專利權）人: 金陵科技學院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京市中聞律師事務所 11388
• 代理人: 王新發;常亞春

技術領域

本實用新型涉及檢測試紙技術領域，尤其涉及一種檢測涕滅威的新型適體試紙。

背景技術

涕滅威，化學名稱2-甲基-2-(甲硫基)丙醛-O-甲基氨基甲酰基肟，屬氨基甲酸酯類農藥，是一種高效、劇毒、廣譜、內吸性的殺蟲、殺螨、殺線蟲劑，已被廣泛用于棉花、花生、玉米、大豆、甜菜、甘蔗、小麥、果樹、馬鈴薯、煙草等許多作物上以防治螨類、蚜蟲及線蟲等多種害蟲，目前全世界已有70多個國家和地區在不同作物上登記使用。

涕滅威用量大，對人和動物具有很高的毒性，并且不易降解（降解產物涕滅威亞砜和涕滅威砜依然保持著高的生物毒性和更長的半衰期），容易造成環境污染，且我國的農藥的使用情況十分復雜，長期不合理、超劑量使用化學農藥，使得害蟲抗藥性逐年增強，抗藥性的增強又迫使農業生產者不斷加大農藥的用量和使用次數，農藥的濃度越用越大，高殘留農藥和劇毒農藥的使用也越來越廣，甚至有人將涕滅威施用于蔬菜產品上，使農產品的殘留嚴重超標，大大降低了農產品的質量。農藥的不合理使用給人類及生態環境造成了越來越嚴重的不良后果，農藥的污染問題已成為全球關注的熱點。

目前涕滅威殘留檢測常采用氣相色譜（GC）和高效液相色譜（HPLC）法，由于氨基甲酸酯類殺蟲劑在高溫下易分解，化學性質不穩定，而液相柱后衍生不好掌握，這兩種分析方法都存在一定的局限性，而且這些方法需要較昂貴的儀器并且樣品前處理過程復雜，因而難以滿足實際檢測的需要。免疫分析方法具有快速、特異性強、靈敏度高等優點，可進行現場測定，近年已被廣泛應用于農藥殘留檢測。SDIX公司生產的涕滅威的96孔板式ELISA試劑盒對涕滅威的檢出限為1μg/L，膠體金標記免疫分析試紙的檢出限為10 μg/L。但是涕滅威的分子量為190，為小分子化合物，本身不具有免疫原性。因此，制備抗體需要通過與大分子蛋白質交聯才能成為免疫原，過程繁瑣，且抗體的質量受抗原影響很大。

核酸適體是一種比抗體具有更高特異性的配基，其體外篩選、體外制備的特點能夠有效克服抗體制備周期長、生產成本高、技術難度大、批間差異大、克隆株不易有效保存的缺點，并且核酸適體開發周期短、生產成本低、使用方便在檢測分析領域中的應用已經被廣泛認可，因此，核酸適體在涕滅威的快速檢測中具有良好的應用前景。

實用新型內容

為了使得涕滅威殘留能夠快速的定量檢測分析，本實用新型提供了一種靈敏度高、操作簡便快速的檢測涕滅威殘留的適體試紙。

本實用新型采用如下技術方案：

本實用新型的檢測涕滅威的新型適體試紙是由底板、吸水墊、NC膜、適體-熒光-微球墊、樣品吸液層組成；底板是長方形的平板，樣品吸液層、適體-熒光-微球墊、NC膜、吸水墊依次順序粘貼在底板上。

NC膜和吸水墊之間依次設有檢測線和質控線。

所述的底板的材料是塑料，優選是PVC。

所述的吸水墊的材料是濾紙。

所述的適體-熒光-微球墊是涕滅威適體組裝的納米熒光微球墊，上面是標記鏈親和素標記的涕滅威適體與納米熒光微球顆粒聚集體。

所述的樣品吸液層的材料是玻璃纖維素膜。

所述的檢測線是涕滅威適體互補序列的檢測線。

所述的質控線是生物素質控線。

本實用新型的積極效果如下：

1、靈敏度高。涕滅威快速檢測試紙以凝膠結合高親和力的適體為基礎制備而成，以適體為關鍵材料建立起的涕滅威快速篩查技術最低能夠檢測出濃度約為0.1 μg/mL的涕滅威。

2、操作簡便快速。使用快速檢測試紙只需將試紙插入樣品液中，5分鐘左右顯示結果。

3、顯示結果更加準確，以熒光條帶為檢測結果。進一步研究可發現配用專門的熒光檢測儀樣品中涕滅威的含量與檢測線的熒光值呈反相關，樣品中涕滅威含量越高，檢測線的熒光值越低。

4、成本低。適體的篩選過程避免了動物免疫，篩選過程簡便，后期制備只需要化學合成，不需要培養細胞等步驟，制作周期和成本都遠低于抗體。

5、易于大范圍推廣應用。快速檢測試紙操作簡單，能較好的滿足不同層次人員的需要，該實用新型具有廣闊的市場前景和較大的社會、經濟效益。

附圖說明

圖1示出了本實用新型的檢測涕滅威的適體熒光試紙的結構示意圖；

圖2示出了檢測涕滅威殘留的適體試紙的檢測結果示意圖。

附圖標記如下：

1底板、2吸水墊、3 NC膜、4適體-熒光微球墊、5樣品吸液層、6檢測線、7質控線。

具體實施方式