[實用新型]一種β-微管蛋白Ⅲ基因表達檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201420063859.2
• 申請日: 2014-02-12
• 公開（公告）號: CN203700342U
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 吳建中;馬蓉;唐金海;馮繼鋒;曹海霞
• 申請（專利權）人: 江蘇省腫瘤醫院
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12Q1/68
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 張文祎

技術領域

本實用新型涉及一種檢測試劑盒，尤其是涉及一種β-微管蛋白Ⅲ基因表達檢測試劑盒。

背景技術

微管是一類含有聚合的α/β異二聚體以及大量的微管相關蛋白的細胞骨架結構，它們在許多細胞功能中至關重要其中包括細胞分裂。大量癌癥患者均存在異常的細胞分裂，因此微管被人們作為腫瘤治療的靶點。目前，抗微管類藥物已在腫瘤治療中廣泛使用，抗微管類藥物是通過作用于細胞微管而影響紡錘體形成，并抑制細胞有絲分裂的一類廣譜化療藥。目前常用的抗微管類藥物主要有：紫杉醇、多西他賽、長春堿、長春新堿和長春瑞濱等。紫杉醇/多西他賽作用于腫瘤細胞后，可以促進腫瘤細胞內的微管聚合以及穩定已聚合的微管，導致細胞內大量微管聚集，進而干擾細胞各種功能，特別是使細胞停止分裂（如圖）。長春堿/長春新堿等可以抑制腫瘤細胞內微管蛋白的聚合、抑制紡錘體微管的形成，使核分裂停滯于細胞分裂中期，從而抑制腫瘤細胞生長。

微管蛋白α和微管蛋白β構成的α,β異二聚體是微管裝配的基本單位，也是許多抗微管類藥物的作用靶點。其中TUBB3編碼的β-tubulin-Ⅲ（β-微管蛋白Ⅲ）與抗微管類藥物的療效關系最為密切，并被人們作為預測腫瘤對抗微管類藥物化療反應的標志物。TUBB3通常表達在神經，血管內皮細胞和其他組織，和其他微管蛋白一樣用于構建微管。TUBB3在大量腫瘤組織中過表達包括非小細胞肺癌（NSCLC）、卵巢癌、乳腺癌、子宮頸癌、前列腺癌、胃癌、腸癌等等。

多種腫瘤細胞系的研究及大量臨床試驗結果均顯示TUBB3mRNA的表達水平與抗微管類藥物的療效密切相關。低表達患者接受紫杉醇類或長春堿類化療的效果較好，中位生存期較長；而TUBB3高表達的患者的抗微管類化療療效較差。一項對非小細胞肺癌患者的臨床研究顯示：TUBB3mRNA表達水平與含微管類化療方案的療效相關。TUBB3低表達患者無進展生存率和總生存率顯著優于高表達患者。因此，檢測TUBB3的表達水平對于腫瘤患者的治療和預后有著重要意義。

實用新型內容

本實用新型要解決的技術問題是提供一種β-微管蛋白Ⅲ基因表達檢測試劑盒，該試劑盒結構簡單、設計合理、使用方便、制造容易、檢測過程不易受污染；該試劑盒在檢測β-微管蛋白Ⅲ基因表達時具有敏感性高、特異性強、耗時短等優點，并且該試劑盒在運輸過程中，其內部的試劑容器不易左右晃動，從而保證了試劑容器的安全。

為了解決上述技術問題，本實用新型一種β-微管蛋白Ⅲ基因表達檢測試劑盒，包括盒體、盒蓋、固定座、去離子水試劑瓶、擴增引物管、白蛋白內參引物管和SYBR?premix?Ex?Taq(含ROX)管；所述固定座上設置有第一孔和第二孔，所述去離子水試劑瓶放置在第一孔內，所述第一孔包括比放置在內部的去離子水試劑瓶直徑大的折痕線和沿徑向設置的切口，所述第一孔的開口要小于放置在內部的去離子水試劑瓶的直徑，所述第二孔的側壁上設置有螺紋狀的凹槽，所述擴增引物管、白蛋白內參引物管和SYBR?premix?Ex?Taq(含ROX)管的外側包裹有一橡膠套，所述橡膠套的外側面設有與所述第二孔上的凹槽相對應的突起。

所述擴增引物為特異性擴增TUBB3引物，上游引物序列為5′-CAAGTTCTGGGAAGTCATCAGTGA-3′；下游引物序列為5′-CCGAGTCGCCCACGTAGTT-3′；所述白蛋白內參引物上游引物序列為5′-TTCTACAATGAGCTGCGTGTG-3′，下游引物序列為：5′-CAGCCTGGATAGCAACGTACA-3′。引物包括擴增引物和白蛋白內參引物，引物濃度為100pmol/L。

本實用新型與現有產品相比，具有如下積極有益的效果：

本試劑盒結構簡單、設計合理、使用方便、制造容易、檢測過程不易受污染；本試劑盒在檢測β-微管蛋白Ⅲ基因表達時具有敏感性高、特異性強、耗時短等優點，并且本試劑盒在運輸過程中，其內部的試劑容器不易左右晃動，從而保證了試劑容器的安全。

附圖說明

圖1為本實用新型的結構示意圖。

圖2為本實用新型的固定座的俯視圖。

圖3為本實用新型的橡膠套的主視圖。

具體實施方式

下面結合附圖和實施例對本實用新型進行進一步說明。

表1為本實用新型PCR反應體系。