[實(shí)用新型]一種胸苷酸合成酶基因表達(dá)檢測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201420063755.1
• 申請(qǐng)日: 2014-02-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN203700341U
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮繼鋒;王卓;吳建中;唐金海;馬蓉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇省腫瘤醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12M1/00
• 分類(lèi)號(hào): C12M1/00;C12Q1/68
• 代理公司: 北京正理專(zhuān)利代理有限公司 11257
• 代理人: 張文祎

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種檢測(cè)試劑盒，尤其是涉及一種胸苷酸合成酶基因表達(dá)檢測(cè)試劑盒。

背景技術(shù)

胸苷酸合成酶（Thymidylate?synthase,TS）是由兩個(gè)相同亞單位組成的二聚體蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量為72kDa,是DNA合成的關(guān)鍵酶,它催化脫氧尿苷酸甲基化,使之轉(zhuǎn)變?yōu)槊撗跣剀账帷S在DNA合成與修復(fù)、細(xì)胞增殖與分化中有十分重要的作用,是腫瘤化療藥5-Fu和甲氨蝶呤等重要靶酶。

氟類(lèi)藥物包括5-氟尿嘧啶（5-FU）、替加氟、卡莫氟、氟尿苷、脫氧氟尿苷以及卡培他濱等。該類(lèi)藥物為尿嘧啶的氟代衍生物，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為5-氟尿嘧啶脫氧核苷酸（5F-dUMP）后，可抑制胸苷酸合成酶（TS），阻止脫氧尿苷酸（dUMP）甲基化為脫氧胸苷酸（dTMP），從而抑制DNA合成。在生理情況下，TS表達(dá)的調(diào)節(jié)依賴(lài)于細(xì)胞周期和細(xì)胞增殖狀態(tài)。在同步細(xì)胞中，當(dāng)細(xì)胞從G0期進(jìn)入到S期，TS活性水平增加約20倍。研究顯示TS的高表達(dá)與這些藥物的抗藥性以及乳腺癌、胃癌和結(jié)直腸癌等腫瘤的預(yù)后差相關(guān)。

多種腫瘤的臨床研究均顯示TS?mRNA表達(dá)水平與5-FU療效密切相關(guān)，例如：結(jié)直腸癌、肺癌、乳腺癌、頭頸鱗狀細(xì)胞癌等。臨床研究表明，低TS?mRNA水平的腫瘤患者接受氟類(lèi)化療的效果較好，中位生存期較長(zhǎng)。反之，TS高表達(dá)的患者接受氟類(lèi)治療療效較差。因此，檢測(cè)TS?mRNA的表達(dá)水平對(duì)于腫瘤患者的治療和預(yù)后有著重要意義。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種胸苷酸合成酶基因表達(dá)檢測(cè)試劑盒，該試劑盒在檢測(cè)胸苷酸合成酶基因表達(dá)時(shí)具有敏感性高、特異性強(qiáng)、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)，并且在運(yùn)輸途中，試劑盒內(nèi)部的容器不易破損。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本實(shí)用新型提供一種胸苷酸合成酶基因表達(dá)檢測(cè)試劑盒，包括盒體、設(shè)置在盒體內(nèi)的固定座和盒蓋，在固定座上分別設(shè)置有放置去離子水試劑瓶、擴(kuò)增引物管、白蛋白內(nèi)參引物管、SYBR?premix?ExTaq(含ROX)管的孔，所述孔包括比放置在內(nèi)部的容器直徑大的折痕線(xiàn)和沿徑向設(shè)置的切口，所述孔的開(kāi)口要小于放置在內(nèi)部的容器的直徑，在所述盒蓋內(nèi)側(cè)面上設(shè)置有防震用的軟性材料。

所述孔的大小根據(jù)去離子水試劑瓶、擴(kuò)增引物管、白蛋白內(nèi)參引物管、SYBR?premix?Ex?Taq管的大小而設(shè)置。

所述擴(kuò)增引物為特異性擴(kuò)增TS的引物，上游引物序列為5′-TTTGGAGGAGTTGCTGTGGTT-3′；下游引物序列為5′-GATCCATTGGCATCCCAGAT-3′；所述白蛋白內(nèi)參引物上游引物序列為5′-TTCTACAATGAGCTGCGTGTG-3′，下游引物序列為：5′-CAGCCTGGATAGCAACGTACA-3′。引物包括擴(kuò)增引物和白蛋白內(nèi)參引物，引物濃度為100pmol/L。

本實(shí)用新型與現(xiàn)有產(chǎn)品相比，具有如下積極有益的效果：

本試劑盒結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、設(shè)計(jì)合理、使用方便、制造容易、檢測(cè)過(guò)程不易受污染；本試劑盒在檢測(cè)一種胸苷酸合成酶基因表達(dá)時(shí)具有敏感性高、特異性強(qiáng)、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)。并且在運(yùn)輸途中，由于試劑盒中的容器都被孔卡住，不易左右晃動(dòng)，而盒蓋內(nèi)表面上設(shè)置的軟性材料可以保護(hù)容器上下表面，從而保證了試劑盒內(nèi)部的容器的安全。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明。

圖1為本實(shí)用新型的整體結(jié)構(gòu)示意圖。

圖2為本實(shí)用新型的固定座的俯視圖。

具體實(shí)施方式

如圖1所示，本實(shí)用新型的一個(gè)實(shí)施例為一種胸苷酸合成酶基因表達(dá)檢測(cè)試劑盒，包括盒體1、固定座2、盒蓋3、在固定座2上設(shè)有孔8，其孔8中分別放置去離子水試劑瓶4、擴(kuò)增引物管5、白蛋白內(nèi)參引物管6、SYBRpremix?Ex?Taq管7。容器孔的大小根據(jù)去離子水試劑瓶4、擴(kuò)增引物管5、白蛋白內(nèi)參引物管6、SYBR?premix?Ex?Taq管7的大小而變化。孔8的開(kāi)口小于其中放置的容器的直徑，當(dāng)容器插入到孔8中時(shí)，孔8沿切口82打開(kāi)，沿折痕線(xiàn)81向下彎折，從而將容器包裹住，使其不易左右晃動(dòng)。盒蓋3的內(nèi)表面上還設(shè)置有軟性材料，當(dāng)蓋上盒蓋3時(shí)，軟性材料與盒體1內(nèi)部的容器的上表面壓緊接觸，使容器也不能上下移動(dòng)，使用軟性材料能夠起到一定的防震作用。