[實用新型]一種微灌流細胞培養及產物收集集成裝置

有效

• 申請號: 201420055861.5
• 申請日: 2014-01-28
• 公開（公告）號: CN203700381U
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 郭文杰;楊林;茍小軍;王躍锜;史鈾;李波;劉冰花
• 申請（專利權）人: 成都大學
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12M1/12
• 代理公司: 成都科奧專利事務所(普通合伙) 51101
• 代理人: 王蔚

技術領域

本實用新型涉及一種微灌流細胞培養及產物收集集成裝置

背景技術：

進行細胞培養時由于需要間隔一定時間更換培養液和清除代謝廢物，因此可能增加實驗的系統誤差。尤其是人工更換培養液時，不僅使污染機率增大，還可能因加樣時的液流沖擊而攪動細胞，影響細胞貼壁，甚至還可能出現將細胞抽吸或沖掉而造成實驗損失。另外，目前體外細胞培養代謝物的檢測，是采用即時的代謝產物來進行檢測的，其檢測方法是將細胞培養一段時間后，提取培養器皿中的培養液來進行檢測，這種檢測方法存在如下缺點：（1）實驗結果有可能受到次生代謝產物的干擾而存在誤差；（2）為了收集代謝產物進而延長培養時間，反而導致代謝廢物影響細胞代謝類型而影響實驗預期，甚至還可能因代謝物過多而導致細胞代謝異?；蛩劳?。目前還未見有集自動供液、自動供氣、自動連續收集代謝產物為一體的裝置的報道。

發明內容

本實用新型的目的在于提供一種微灌流細胞培養及產物收集集成裝置，該裝置可持續供給培養液，并自動收集代謝產物。

為達到上述目的，本實用新型采用的解決方案是：一種微灌流細胞培養及產物收集集成裝置，包括培養氣體室、恒溫水浴、恒溫系統、灌流槽、培養液超濾器和灌流液收集容器，所述培養氣體室、恒溫水浴、恒溫系統和灌流槽設于培養容器中，其中培養氣體室位于培養容器的上部，恒溫水浴和恒溫系統分別位于培養容器的中部和下部，同時在培養容器上還設有培養氣體輸入孔和培養氣體溢出孔，所述灌流槽的下部位于恒溫水浴中，并通過其流入管道與培養液超濾器連接，灌流槽的上部位于培養氣體室中，并通過其流出管道與灌流液收集容器連接。

上述灌流槽的流入管道或/和培養液超濾器的流入管道上還設有加藥器。所述加藥器為閥門式加藥器，由Y型管道、閥門支架、螺母和加壓板構成，Y型管道的其中兩個端口連接于灌流槽的流入管道或培養液超濾器的流入管道上，另一端口由橡膠膜封閉，構成加藥刺入部位，螺母和加壓板通過閥門支架安裝在Y型管道上，通過旋轉螺母推進加壓板可減小管徑。

上述灌流槽為多個，培養液超濾器通過灌流分液器與每個灌流槽的流入管道連接，在培養液超濾器的流入管道和灌流槽的每個流入管道上均設有加藥器。

上述灌流槽呈漏斗狀，其下部培養液流入口處設有緩沖球，中部設有緩沖過濾膜，微孔玻璃細胞培養板位于緩沖過濾膜上。

本實用新型的使用過程是：先將系統的恒溫水浴加熱后維持在細胞培養的最佳溫度，然后將培養系統氣體通入，并調節好氣流量，打開微灌流培養液的微量注射器，通過自動微量注射器調整好流量，持續微量進行培養液供給，并使液體全部通過微型灌流槽流入灌流液收集容器，使培養液充滿灌流的整個管道系統。接著將粘附有待培養實驗細胞的微孔玻璃細胞培養板放置在微灌流槽中的緩沖過濾膜上，并淹沒在培養液中，進入灌流，注意無菌操作。如需收集一般代謝產物，則選定灌流時間段內收集的培養液即可。如需加入藥物觀察代謝影響，則通過灌流閥門加藥器進行加藥，用移液器尖端刺入橡膠囊推入即可，其中如是對所有微灌流槽的細胞給予相同的藥物干預，則可通過總通道灌流閥門加藥器進行加藥；如是針對不同的微灌流槽細胞進行不同的藥物處理，則選擇在單通道灌流閥門加藥器注入相對應的藥物，此時可同時安置多個灌流液收集容器，同步開始灌流、干預、收集灌流液并分析，可減少環境不均一導致的結果不真實。如果是與蛋白質分析系統配合，則在連續灌流干預后，收集不同時間段的產物進行分析，可以顯示細胞對某一刺激源刺激后代謝隨時間發生的變化規律，從而可通過代謝產物的時間順序研究藥物對細胞代謝的影響規律。

本實用新型集自動供液、自動供氣、自動連續收集代謝產物為一體，并可在不同時間點給予藥物干預并即時收集代謝產物，從而可避免污染和實驗損失，并能簡化操作過程和提高實驗結果的精度。

附圖說明

圖1為本實用新型的結構示意圖。

圖2為培養液超濾器、分液器、加藥器、灌流液收集容器和多個灌流槽的連結示意圖。

圖3為灌流槽的結構示意圖。

圖4為培養液超濾器的結構示意圖。

圖5為閥門式加藥器的結構示意圖。

圖中：1—培養容器?2—培養氣體室?3—恒溫系統?4—恒溫水浴?5—培養液超濾器?6—灌流槽?7—灌流液收集容器?8—培養氣體輸入孔?9—培養氣體溢出孔?10—灌流分液器?11—緩沖球?12—緩沖過濾膜?13—微孔玻璃細胞培養板?14—超濾膜?15—加藥器?16—加藥器?17—Y型管道?18—螺母?19—加壓板?20—閥門支架?21—橡膠膜

具體實施方式