[發明專利]一種從牛樟芝中提取多糖的方法

在審

• 申請號: 201410854922.9
• 申請日: 2014-12-31
• 公開（公告）號: CN104479044A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 季延濱;李濤
• 申請（專利權）人: 三生源生物科技（天津）有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 天津諾德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 12213
• 代理人: 張杏珍

技術領域

本發明屬于食用菌提取多糖領域，尤其是涉及一種從牛樟芝中提取多糖的方法。

背景技術

牛樟芝作為一種著名的藥用菌。在我國臺灣地區已有悠久的應用歷史。大陸對牛樟芝的研究則是近幾年才興起，并日益受到重視。有報道說，牛樟芝的藥用、保健功能是其他同類食用菌的十幾倍。相信隨著研究和開發的不斷深入，臺灣地區特有的物種牛樟芝必將在治療人類多種頑疾和保健方面發揮它的重要作用。

發明內容

本發明要解決的問題是提供一種從牛樟芝中提取多糖的方法。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：一種從牛樟芝中提取多糖的方法，步驟入下：

1)過濾：將牛樟芝子實體碾成粉末，過目篩；

2)提取分離：加乙醇回流提取，然后離心分離乙醇，用熱水浸提料渣；

3)獲得樣品：步驟2)中加無水乙醇隨后置冰箱沉淀，隨后離心分離沉淀，得到牛樟芝粗多糖；

4)去除脫蛋白：將步驟2)中分離得到的牛樟芝粗多糖沉淀溶于適量蒸餾水中，加入氯仿和正丁醇生成絮狀凝聚物，離心除去沉淀。

目篩的規格為20目。

步驟2)中回流提取的次數不大與5次。

步驟2)中熱水溫度為60-100℃。

步驟2)中浸提料渣1-3h。

本發明具有有益效果是：采用本發明方法，牛樟芝多糖得到率達到3.93％以上，并且提取過程安全，對多糖的分子無破壞，雜質含量少。由于多糖易溶于熱水，難溶于有機溶劑，采用乙醇預處理。能有效去除一些脂溶性物質如三萜，還能有效軟化和破壞細胞壁膜，有利于多糖的提取，同時可以有效去除大部分色素，避免后處理引起多糖的損失。發明采用苯酚一硫酸法測定提取的粗多糖中的純多糖含量的方法，顯色穩定，靈敏度高，重現性好，不受蛋白存在的干擾，既能客觀表征牛樟芝子實體多糖的實際含量，又保留了活性多糖。

具體實施方式

實施例1

一種從牛樟芝中提取多糖的方法，步驟如下：1)過濾：將牛樟芝子實體碾成粉末，過目篩，目篩的規格為20目；2)提取分離：加乙醇回流提取3次，然后離心分離乙醇，用60℃熱水浸提料渣1h；3)獲得樣品：步驟2)中加無水乙醇隨后置冰箱沉淀，隨后離心分離沉淀，得到牛樟芝粗多糖；4)去除脫蛋白：將步驟2)中分離得到的牛樟芝粗多糖沉淀溶于適量蒸餾水中，加入氯仿和正丁醇生成絮狀凝聚物，離心除去沉淀。

實施例2

一種從牛樟芝中提取多糖的方法，步驟如下：1)過濾：將牛樟芝子實體碾成粉末，過目篩，目篩的規格為20目；2)提取分離：加乙醇回流提取5次，然后離心分離乙醇，用100℃熱水浸提料渣3h；3)獲得樣品：步驟2)中加無水乙醇隨后置冰箱沉淀，隨后離心分離沉淀，得到牛樟芝粗多糖；4)去除脫蛋白：將步驟2)中分離得到的牛樟芝粗多糖沉淀溶于適量蒸餾水中，加入氯仿和正丁醇生成絮狀凝聚物，離心除去沉淀。

實施例3

一種從牛樟芝中提取多糖的方法，步驟入下：

一種從牛樟芝中提取多糖的方法，步驟如下：1)過濾：將牛樟芝子實體碾成粉末，過目篩，目篩的規格為20目；2)提取分離：加乙醇回流提取3次，然后離心分離乙醇，用60℃熱水浸提料渣1.5h；3)獲得樣品：步驟2)中加無水乙醇隨后置冰箱沉淀，隨后離心分離沉淀，得到牛樟芝粗多糖；4)去除脫蛋白：將步驟2)中分離得到的牛樟芝粗多糖沉淀溶于適量蒸餾水中，加入氯仿和正丁醇生成絮狀凝聚物，離心除去沉淀。

根據三次實施例中獲得牛樟芝多糖的提取條件與提取溫度、時間、料水對比多糖得率的影響，結果如表1：

表1正交實驗結果

從正交實驗結果的直觀分析中可以看出，各因素對多糖含量的影響程度為溫度>時間＝料水比，對正交實驗的結果進行方差分析后發現，因素溫度各水平間有非常顯著性差異，P<0.01；而時間、料水比各水平有差異，P<0.1。

通過對水提過程中的溫度、時間等的比照，確定了牛樟芝子實體多糖浸提條件為：子實體粉末經5倍量95％乙醇回流提取3次，每次1.5h，離心，熱水浸提料渣：溫度100℃，料水比1：20，時間2h，旋轉蒸發儀上減壓濃縮提取液至浸膏(約為母液的1/6)，加無水乙醇至乙醇體積分數為75％，冰箱放置過夜，得粗多糖樣品。

以上對本發明的一個實施例進行了詳細說明，但所述內容僅為本發明的較佳實施例，不能被認為用于限定本發明的實施范圍。凡依本發明申請范圍所作的均等變化與改進等，均應仍歸屬于本發明的專利涵蓋范圍之內。