[發(fā)明專利]用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑及制備和檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410854634.3
• 申請日: 2014-12-31
• 公開（公告）號: CN104483473A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發(fā)明（設計）人: 汪艷濤;龔成;趙肅清;湯永平;潘秀華;張曉麗
• 申請（專利權）人: 廣州市微米生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/52
• 分類號: G01N33/52;G01N1/30;G01N21/78
• 代理公司: 廣州市越秀區(qū)海心聯(lián)合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 黃為

技術領域

本發(fā)明涉及一種檢測試劑，具體地說，是一種用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑，本發(fā)明還涉及該檢測試劑的制備方法和檢測方法。

背景技術

目前，用于上皮組織進行細胞特殊染色的方法主要有醋酸白化反應、碘試驗、以及亞甲基藍染色等。特殊染色液體外診斷疾病有很長的歷史，是一種侵入式體外染色診斷方法，廣泛用于上皮組織等常規(guī)病變的初篩。

醋酸白化反應是通過3％-5％乙酸溶液，涂抹在上皮組織上，等待一段時間后觀察所涂抹的上皮組織有無白化反應，若有則被懷疑有腫瘤細胞，此方法特異性差，易造成假陽。碘試驗是基于糖原反應，特異性同樣較低。

專利CN103808551A利用虹吸法將溶液儲存于棉簽桿中，運輸過程中溶液易滲出和氧化，使用時染色液流出緩慢，操作不便。

中國專利：2014100628449中提及調(diào)節(jié)染色液pH采用的是乙酸，我們研究發(fā)現(xiàn)，當乙酸的量達到3％-5％時，容易極易氧化，且pH值也下降到3左右，不符合該染色液pH5.0-6.0的要求，若乙酸含量達不到3％-5％，就無法實現(xiàn)醋酸白化反應，不能實現(xiàn)棉簽染色與腫瘤組織醋酸白化反應雙重定位。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種檢測靈敏度高，檢測結果可靠的用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑，以及提供一種全程封閉推注式，避免溶液本身特殊的腥臭味對操作者的刺激，同時減短溶液接觸空氣的時間，避免快速氧化造成假陽性結果，充分保證檢測結果準確性的檢測方法。

為解決上述技術問題，本發(fā)明提供的第一技術方案是這樣的：

該用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑，所述的試劑由下述重量百分數(shù)的組分制成：0.03％-2％的亞甲基藍、5％-10％果糖、0.1％-1％抗壞血酸、1％-5％葉酸、40％二甲基亞砜、3％-5％乙酸-乙酸鈉緩沖液、0.1％-1％表面活性劑，余量為純化水。

進一步的，上述的用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑，所述的3％-5％乙酸-乙酸鈉緩沖液的pH值為5.5±0.5。

進一步的，上述的用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑，所述的表面活性劑為Tween-20。

為制備該檢測試劑，本發(fā)明的另外一個技術方案是這樣的：

上述用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑的制備方法，依次包括下述步驟：

1)按權利要求1所述的重量百分數(shù)稱取各個組分；

2)將步驟1)稱取的葉酸溶入二甲基亞砜中，攪拌溶解；

3)將亞甲基藍加入至步驟2)溶液中，攪拌溶解后繼續(xù)攪拌40-80min；

4)將表面活性劑加入步驟3)溶液中，攪拌混勻；

5)將果糖和抗壞血酸和堿性水溶液加入至步驟4)溶液中再次攪拌溶解；

6)將乙酸-乙酸鈉緩沖液按加入至步驟5)溶液中攪拌均勻即得。

為了更好的使用本發(fā)明，本發(fā)明還有一個技術方案是這樣的：

上述用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑的檢測方法，該方法檢測時采用下述檢測組件取樣后，棉簽插入桿端部插接在裝有權利要求1所述的檢測試劑的試劑瓶的接入管端部，倒置擠壓瓶體，使檢測試劑流向取樣后的棉簽頭；

所述的檢測組件包括一試劑瓶以及與試劑瓶配套使用的棉簽，所述試劑瓶包括螺紋狀軟瓶體，瓶體上設有柱狀空心接入管，所述瓶體與接入管一體成型，所述棉簽包括一空心插入桿，插入桿的一端端部設有葫蘆頭狀棉花頭，所述插入桿的外徑與接入管的內(nèi)徑相同。

作為本發(fā)明的進一步改進，上述的用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑的檢測方法，所述的接入管上還設有密封接口端的瓶塞。

作為本發(fā)明的進一步改進，上述的用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑的檢測方法，所述的棉簽外部還設有密封棉簽的包裝袋。

作為本發(fā)明的進一步改進，上述的用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑的檢測方法，所述的插入桿的長度160-220mm，直徑3-6mm。

作為本發(fā)明的進一步改進，上述的用于上皮組織腫瘤細胞的檢測試劑的檢測方法，所述的棉花頭尖頭直徑為2.5-3.5mm，下半部分直徑為7-12mm，下半部分與插入桿連接。