[發(fā)明專利]一種氣虛型胃腸功能障礙小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410853675.0
• 申請(qǐng)日: 2014-12-31
• 公開（公告）號(hào): CN104622945B
• 公開（公告）日: 2018-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃立權(quán);王靈聰;江榮林;雷澍;智屹惠;吳艷春;朱美飛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院
• 主分類號(hào): A61K36/484
• 分類號(hào): A61K36/484;A61K49/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

本發(fā)明公開了一種氣虛型胃腸功能障礙小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，所述方法為：用過飽和芒硝水溶液灌胃小鼠10?15天，再灌胃四君子湯7?10天，當(dāng)小鼠出現(xiàn)下列第(1)、(4)和(6)或多種癥狀時(shí)，氣虛型胃腸功能障礙的小鼠動(dòng)物模型構(gòu)建成功：(1)體重減少，小鼠毛色變灰暗、無光澤，(2)進(jìn)食量減少，(3)糞便變稀，(4)小腸粘膜損傷評(píng)分變差，(5)胃體積增大以及(6)胃腸碳粉推進(jìn)指數(shù)下降；氣虛型胃腸功能障礙的小鼠動(dòng)物模型構(gòu)建成功；本發(fā)明提供一種穩(wěn)定性高、易于推廣、重復(fù)性好、經(jīng)濟(jì)實(shí)用的氣虛型胃腸功能障礙小鼠動(dòng)物模型，為中醫(yī)藥治療胃腸功能障礙的臨床前期研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種氣虛型胃腸功能障礙動(dòng)物模型的建立，通過給ICR小鼠灌服芒硝過飽和溶液以達(dá)到讓小鼠產(chǎn)生腹脹、腹瀉、體重減輕等中醫(yī)氣虛臨床表現(xiàn)及胃腸動(dòng)力減退、胃腸黏膜損傷等西醫(yī)胃腸功能障礙的臨床表現(xiàn)和病理改變，為研發(fā)治療胃腸功能障礙新物提供一個(gè)穩(wěn)定、可靠的動(dòng)物模型。

(二)背景技術(shù)

胃腸功能障礙是指機(jī)體在受到創(chuàng)傷、感染、失血等嚴(yán)重?fù)p害時(shí)，胃腸道出現(xiàn)的嚴(yán)重應(yīng)激反應(yīng)，表現(xiàn)為各種致病因素導(dǎo)致胃腸黏膜受損及腸道免疫系統(tǒng)功能下降，腸道屏障功能被破壞，腸道內(nèi)的細(xì)菌與細(xì)菌毒素轉(zhuǎn)移到腸外(即發(fā)生細(xì)菌移位)。

胃腸功能障礙的病因非常廣，近年來有學(xué)者對(duì)胃腸功能障礙提出了新的分類：Ⅰ型胃腸功能障礙多指腹部手術(shù)后自限性胃腸功能障礙；Ⅱ型胃腸功能障礙是指危重病人的胃腸功能障礙，這些患者除行小腸廣泛切除外，還并發(fā)有感染、代謝和營(yíng)養(yǎng)并發(fā)癥；Ⅲ型胃腸功能障礙是指需要長(zhǎng)期甚至終身營(yíng)養(yǎng)支持的慢性胃腸功能障礙。

通過長(zhǎng)期的臨床觀察發(fā)現(xiàn)，很多危重癥患者在無明顯的創(chuàng)傷、感染、出血等應(yīng)激情況下卻也出現(xiàn)了嚴(yán)重的胃腸功能障礙，常表現(xiàn)為腹脹、腹瀉和嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良，這類患者符合胃腸功能障礙臨床表現(xiàn)但很難歸類到以上三型胃腸功能障礙，西醫(yī)學(xué)很難闡明其發(fā)病機(jī)理。而中醫(yī)學(xué)卻能很好解釋這一理論：《黃帝內(nèi)經(jīng)·素問·宣明·五氣篇》有云“久臥傷氣”；《素問·平人氣象論》又云“人以水谷為本”。重癥患者在搶救及恢復(fù)過程中往往需要長(zhǎng)期臥床，致使氣機(jī)失調(diào)；這類病人由于病情危重，無法自主進(jìn)食而依靠全胃腸外營(yíng)養(yǎng)，致使喪失了脾胃“后天之本——水谷精微”的濡養(yǎng)，導(dǎo)致氣血本源缺失，進(jìn)一步導(dǎo)致了脾胃氣虛，進(jìn)而影響小腸的泌清別濁和大腸通降功能失常，出現(xiàn)腹脹、腹瀉等癥狀，同時(shí)脾的運(yùn)化功能減退，氣血生化無緣，氣血虛虧，五臟六腑失去濡養(yǎng)，導(dǎo)致其他臟器功能衰竭，這與胃腸功能障礙的臨床表現(xiàn)相一致。所以大部分此類胃腸功能障礙患者在癥型上符合中醫(yī)氣虛的臨床表現(xiàn)，疾病上符合“痞滿”和“泄瀉”病范疇。

國(guó)內(nèi)沒有涉及胃腸功能障礙中醫(yī)癥型動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)研究，因此本發(fā)明將對(duì)中醫(yī)藥在胃腸功能衰竭疾病領(lǐng)域治療優(yōu)勢(shì)的發(fā)揮起到很大的促進(jìn)作用。

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于通過芒硝過飽和溶液灌胃建立一種氣虛型胃腸功能障礙的小鼠動(dòng)物模型，為評(píng)價(jià)治療胃腸功能障礙藥物的療效提供一種可靠的動(dòng)物模型平臺(tái)。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

本發(fā)明涉及一種氣虛型胃腸功能障礙小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，所述方法為：用過飽和芒硝水溶液灌胃小鼠10-15天，再灌胃四君子湯7-10天，當(dāng)小鼠出現(xiàn)下列第(1)、(4)和(6)或多種癥狀時(shí)，氣虛型胃腸功能障礙的小鼠動(dòng)物模型構(gòu)建成功：(1)體重減少，小鼠毛色變灰暗、無光澤，(2)進(jìn)食量減少，(3)糞便變稀，(4)小腸粘膜損傷評(píng)分變差，(5)胃體積增大以及(6)胃腸碳粉推進(jìn)指數(shù)下降；所述過飽和芒硝水溶液的用量為0.1-0.3ml/10g體重，所述四君子湯用量為0.1ml/10g體重；所述四君子湯為黨參、白術(shù)、茯苓和炙甘草按重量比3:3:3:2混合后，加水煎煮而成。上述(1)-(6)癥狀中出現(xiàn)(1)、(4)和(6)或者還出現(xiàn)其他3種癥狀中的一種或多種，則表明模型構(gòu)建成功。

本發(fā)明所述小鼠為ICR小鼠，優(yōu)選所述小鼠為健康成年ICR小鼠，體重18-22g。

本發(fā)明所述過飽和芒硝水溶液的用量?jī)?yōu)選為0.3ml/10g體重。