[發(fā)明專利]人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)及其制備和應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410851973.6
• 申請(qǐng)日: 2014-12-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104587528A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳瑤;萬(wàn)龍;李軍;薛松
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院
• 主分類號(hào): A61L27/36
• 分類號(hào): A61L27/36;A61L27/38;C12N5/071
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

1.一種人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)，其特征在于，其制備方法包括：將人的心臟瓣膜組織切成厚度為50-100μm的薄片；將所得的薄片進(jìn)行脫細(xì)胞處理，得到心臟瓣膜脫細(xì)胞基質(zhì)，冷凍干燥、消毒備用。

2.如權(quán)利要求1所述的人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)，其特征在于，所述的脫細(xì)胞處理包括：將所得的薄片加入離心管中，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5～1.5％的十二烷基硫酸鈉，放入溫度為36～38℃、轉(zhuǎn)速為150～200r/min的搖床中消化12～24h，洗滌，得到消化后的人心臟瓣膜組織，加入150～250mg/L?DNA酶I溶液，反應(yīng)2～6小時(shí)，洗滌，得到心臟瓣膜脫細(xì)胞基質(zhì)。

3.權(quán)利要求1或2所述的人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)的制備方法。

4.權(quán)利要求1或2所述的人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)作為組織工程支架在制備組織工程移植物中的應(yīng)用。

5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的組織工程移植物為用于修復(fù)缺血性心肌損傷、改善心臟功能、改善心力衰竭或其他原因造成的心肌重構(gòu)的組織工程移植物。

6.權(quán)利要求1或2所述的人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)作為細(xì)胞體外培養(yǎng)介質(zhì)提供促進(jìn)細(xì)胞黏附、存活、增殖和心臟方向分化的微環(huán)境及細(xì)胞外基質(zhì)架構(gòu)中的應(yīng)用。

7.一種心臟補(bǔ)片，其特征在于，包含種子細(xì)胞以及權(quán)利要求1或2所述的人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)。

8.如權(quán)利要求7所述的心臟補(bǔ)片，其特征在于，所述的種子細(xì)胞為骨髓來(lái)源的c-kit陽(yáng)性細(xì)胞、骨髓單個(gè)核細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、心肌去分化細(xì)胞、心肌干細(xì)胞及胚胎干細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞中的至少一種。

9.權(quán)利要求7或8所述的心臟補(bǔ)片的制備方法，其特征在于，具體步驟包括：將種子細(xì)胞種于上述人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)的制備方法所制備的人心臟瓣膜組織脫細(xì)胞基質(zhì)上，培養(yǎng)得到心肌補(bǔ)片。

10.如權(quán)利要求9所述的心臟補(bǔ)片的制備方法，其特征在于，所述的c-kit陽(yáng)性細(xì)胞為小鼠骨髓來(lái)源的c-kit陽(yáng)性的細(xì)胞，其制備方法包括：取心梗3天后的小鼠的脛骨和肱骨，用Hanks平衡鹽溶液沖出骨髓，分離出骨髓單個(gè)核細(xì)胞，磁珠分選得到c-kit陽(yáng)性細(xì)胞。