[發(fā)明專利]一種利用聚多巴胺生物檢測(cè)表面進(jìn)行抗原檢測(cè)的方法及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410851466.2
• 申請(qǐng)日: 2014-12-31
• 公開（公告）號(hào): CN104820093A
• 公開（公告）日: 2015-08-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王豐;楊艷;余波;趙曉梅;王琳;王威正;王佩蘭
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海師范大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/544
• 分類號(hào): G01N33/544;G01N33/02;G01N33/24;G01N33/18
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所 31272
• 代理人: 周云

1.一種利用聚多巴胺生物檢測(cè)表面進(jìn)行抗原檢測(cè)的方法，其特征在于：過(guò)程如下：

(1)制備檢測(cè)界面：通過(guò)多巴胺(DA)的自聚合在基底表面修飾上一層聚多巴胺(PDA)膠層，將能與待測(cè)抗原特異性結(jié)合的抗體(一抗)接枝到聚多巴胺(PDA)膠層表面；

(2)接入抗原：將待測(cè)樣品中能與上述抗體特異性結(jié)合的抗原與抗體結(jié)合；

(3)形成“夾心”：加入與待測(cè)抗原呈特異反應(yīng)的酶聯(lián)抗體(二抗)；

(4)加入上述酶的發(fā)光底物，通過(guò)光學(xué)方法測(cè)定底物濃度，從而得到樣品中抗原的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述基底包括孔板、玻璃、纖維、石英和塑料。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中聚多巴胺直接與抗體溶液反應(yīng)過(guò)夜制備抗體檢測(cè)界面，或，使用戊二醛作為交聯(lián)劑，聚多巴胺先與多官能團(tuán)化合物反應(yīng)，再與抗體溶液反應(yīng)過(guò)夜制備抗體檢測(cè)界面。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述多官能團(tuán)化合物包括多聚甲醛、乙二醛、丙二醛、丁二醛、戊二醛、環(huán)氧氯丙烷、環(huán)己烷甲醛和環(huán)戊烷羧酸。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述光學(xué)方法包括化學(xué)發(fā)光法、分光光度法如紫外光譜法和熒光光譜法。

6.權(quán)利要求1-5所述的方法用于生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)，其特征在于：所述抗原包括血液、尿液、唾液、汗液、體液標(biāo)本中降鈣素原(PCT)、甲胎蛋白(AFP)、甲狀腺球蛋白TG、人絨毛膜促性腺激素hCG、胰島素、甲狀旁腺激素(PTH)、骨鈣素、癌胚抗原、鐵蛋白、糖類抗原、前列腺特異抗原PSA、鱗狀細(xì)胞癌抗原SCCA、組織多態(tài)性抗原TPA、促黃體生成激素、雌二醇、睪酮、垂體泌乳素、肌鈣蛋白T、衣原體、弓形蟲、ABO血型抗原、ABH抗原、人游離前列腺特異性抗原(fPSA)、人總前列腺特異抗原(tPSA)、過(guò)氧化物酶金葡菌A蛋白、狂犬病毒抗原RV-Ag、人淋巴細(xì)胞抗原、人組織多肽抗原(TPA)、人痢疾內(nèi)阿米巴抗原、單純皰疹病毒抗原、人糖連抗原724和人新型隱球菌抗原。

7.權(quán)利要求1-5所述的方法用于食品檢測(cè)，其特征在于：所述抗原包括黃曲霉、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、沙門氏菌、軍團(tuán)菌、大腸桿菌、李斯特菌、副溶血性弧菌、金黃色葡萄球菌、幽門螺桿菌、伏馬毒素、赭曲毒素、河豚毒素、CP4EPS蛋白、免疫球蛋白、氨芐西林鈉、脫氧雪腐鐮刀菌烯酮和展青霉素黃曲霉毒素。

8.權(quán)利要求1-5所述的方法用于環(huán)境監(jiān)測(cè)，其特征在于：所述抗原包括垃圾焚燒飛灰中的二噁英，土壤中的蘇云金芽孢桿菌的Bt殺蟲蛋白，土壤中的除草劑毒莠定、莠去津、西瑪津、撲草凈甘草磷和丁草胺，水環(huán)境中的甲氰菊酯，環(huán)境中的甲胺磷、氟蟲腈、除蟲脲、甲基對(duì)硫磷和毒死蜱。