[發明專利]一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法

在審

• 申請號: 201410850550.2
• 申請日: 2014-12-29
• 公開（公告）號: CN104535687A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 于勝良
• 申請（專利權）人: 歐陸分析技術服務（蘇州）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及測定棒曲霉素方法的應用領域，特別涉及一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法。

背景技術

棒曲霉素是真菌霉素中的一類有毒化合物，其對動物的細胞和組織有很強的毒性，具有潛在的致癌、致畸性和致突變性，其主要存在于蘋果、梨、葡萄等果蔬中。

目前，對于蘋果汁中棒曲霉素的檢測方法，往往需要很繁瑣的步驟，需要使用大量的輔助溶液試劑和固體樣品，這樣不僅使操作步驟變得費時費力，還因增加了大量的試劑和樣品而提高生產加工的成本，同時，該檢測方法還存在檢測結果不精確、不靈敏等缺陷。

發明內容

為解決上述背景技術中存在的問題，本發明的目的在于提供一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，以達到不僅使操作步驟變得省時省力，還降低了生產加工的成本，且檢測結果更精確、更靈敏的目的。

為達到上述目的，本發明的技術方案如下：

一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟：

A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO₂；

B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內；

C、向步驟B中的離心管內的液體樣品加入10ml乙酸乙酯/正己烷(60：40；V/V)提取液，再加入7.5g固體無水硫酸鈉或15g液體無水硫酸鈉；

D、旋緊上述離心管的蓋子，使其震蕩3-8秒，再將其經超聲波10分鐘、渦旋10分鐘、離心10分鐘，使液體樣品的上層析出有機液；

E、取2.5ml上述有機液放置在5ml或10ml離心管內，將其在40℃條件下通氮氣吹5-8分鐘，使其不完全干燥；

F、向步驟E中的離心管內的有機液加入1ml水，再經過超聲波5分鐘，使其完全溶解，得到樣液；

G、取步驟F中的樣液900μl至樣瓶中，向其內加入100μl內標溶液(棒曲霉素C13；100ng/ml)，凈化后得到樣品；

H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯質譜儀的多反應檢測模式進行檢測，測定完成。

優選的，所述步驟D中的離心機轉速為2000rpm。

優選的，所述步驟F中的水的PH值為4。

優選的，所述步驟A中的蘋果汁為非濃縮液體樣品無需用水稀釋。

通過上述技術方案，本發明提供的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，通過該測定方法可省略了很多操作的步驟，也減少了輔助溶液試劑和固體樣品的使用，不僅使操作步驟變得省時省力，還因減少了試劑和樣品而降低了生產加工的成本，該測定方法由于采用了更為精確的配比關系，使得其檢測結果更加精確、更加靈敏。

具體實施方式

下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。

實施例一：

本發明提供的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟：

A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO₂；

B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內；

C、向步驟B中的離心管內的液體樣品加入10ml乙酸乙酯/正己烷(60：40；V/V)提取液，再加入7.5g固體無水硫酸鈉；

D、旋緊上述離心管的蓋子，使其震蕩3秒，再將其經超聲波10分鐘、渦旋10分鐘、離心10分鐘，離心機轉速為2000rpm，使液體樣品的上層析出有機液；

E、取2.5ml上述有機液放置在5ml離心管內，將其在40℃條件下通氮氣吹5分鐘，使其不完全干燥，完全干燥則棒曲霉素易丟失；

F、向步驟E中的離心管內的有機液加入1ml水，水的PH值為4，再經過超聲波5分鐘，使其完全溶解，得到樣液；

G、取步驟F中的樣液900μl至樣瓶中，向其內加入100μl內標溶液(棒曲霉素C13；100ng/ml)，凈化后得到樣品；

H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯質譜儀的多反應檢測模式進行檢測，測定完成。

優選的，步驟A中的蘋果汁為非濃縮液體樣品無需用水稀釋。

實施例二：

本發明提供的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟：

A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO₂；

B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內；