[發明專利]一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法

在審

• 申請號: 201410850342.2
• 申請日: 2014-12-31
• 公開（公告）號: CN104448026A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 季延濱;李濤
• 申請（專利權）人: 三生源生物科技（天津）有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 天津諾德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 12213
• 代理人: 張杏珍

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法。

背景技術

牛樟芝(Antrodia)又名樟芝，是臺灣特有的珍貴藥用真菌。據報道，牛樟芝含有多種生物活性物質，如樟芝多糖、三萜類等。其中，牛樟芝中最主要的保健功能因子之一是牛樟芝多糖，牛樟芝多糖具有提高免疫力、抑制癌細胞、改善心血管循環系統、防止動脈硬化等功效作用，已引起了廣泛關注。雖然牛樟芝多糖具有多種保健功效，但目前因其抗氧化活性低而限制了其應用。而目前采取的各種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法中，多糖清除OH-自由基的能力最高只能達到17％，清除超氧自由基的清除率也只有50-70％。

發明內容

為了克服上述現有技術的不足，本發明的目的是提供一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法。

本發明的技術方案是：一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法，包括如下步驟：

1)將牛樟芝發酵液經篩過濾，得牛樟芝菌絲體；

2)在牛樟芝菌絲體中加1-3倍量蒸餾水，并于多功能機粉碎勻漿，得混合物；

3)將混合物在120℃水浴浸提處理2小時，離心10-15分鐘后，取上清液；

4)將上清液于60～65℃下旋轉蒸發濃縮，加4倍量無水乙醇，然后于0-4℃靜置10-12小時，離心得沉淀物；

5)將沉淀物加蒸餾水溶解后，加氯仿異戊醇劇烈震蕩去除蛋白沉淀，得到脫蛋白的提取液；

6)將脫蛋白的提取液經步驟5)多次處理，直至無蛋白產生，得脫蛋白上清液；

7)將脫蛋白上清液加3-5倍量無水乙醇后，于0-4℃靜置10-12小時，離心所得沉淀物加蒸餾水溶解，于3-4℃透析2天，再加3-5倍量無水乙醇，0-4℃靜置10-12小時，離心后將沉淀冷凍干燥，得牛樟芝多糖。

所述步驟5)中氯仿異戊醇中的氯仿與異戊醇比例為4:1。

本發明的有益效果是：通過本方法所制備的牛樟芝多糖具有明顯的抗氧化活性，該方法簡單方便，適用于進行大規模生產，具有很高的商業價值。

具體實施方式

實施例一

本實施例中的一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法包括如下步驟：

1)將牛樟芝發酵液經40目篩過濾，得牛樟芝菌絲體；

2)在牛樟芝菌絲體中加等量蒸餾水，并于多功能機粉碎勻漿，得混合物；

3)將混合物在120℃水浴浸提處理2小時，離心10分鐘后，取上清液；

4)將上清液于60℃下旋轉蒸發濃縮，加4倍量無水乙醇，然后于0℃靜置10小時，離心得沉淀物；

5)將沉淀物加等量蒸餾水溶解后，加等量氯仿異戊醇(氯仿:異戊醇＝4:1)劇烈震蕩去除蛋白沉淀，得到脫蛋白的提取液；

6)將脫蛋白的提取液經步驟5)多次處理，直至無蛋白產生，得脫蛋白上清液；

7)將脫蛋白上清液加3倍量無水乙醇后，于0℃靜置10小時，離心所得沉淀物加等量蒸餾水溶解，于4℃透析2天，再加3倍量無水乙醇，0℃靜置10小時，離心后將沉淀冷凍干燥，得牛樟芝多糖。

抗氧化實驗結果表明，利用本實施例種方法所得牛樟芝菌絲體多糖清除OH-自由基的能力為20.4％。而在超氧自由基的清除能力方面，當牛樟芝菌絲體多糖的濃度達4g/L時，超氧自由基的清除率達到82.1％。

實施例二

本實施例中的一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法包括如下步驟：

1)將牛樟芝發酵液經40目篩過濾，得牛樟芝菌絲體；

2)在牛樟芝菌絲體中加3倍量蒸餾水，并于多功能機粉碎勻漿，得混合物；

3)將混合物在120℃水浴浸提處理2小時，離心15分鐘后，取上清液；

4)將上清液于65℃下旋轉蒸發濃縮，加4倍量無水乙醇，然后于4℃靜置12小時，離心得沉淀物；

5)將沉淀物加等量蒸餾水溶解后，加等量氯仿異戊醇(氯仿:異戊醇＝4:1)劇烈震蕩去除蛋白沉淀，得到脫蛋白的提取液；

6)將脫蛋白的提取液經步驟5)多次處理，直至無蛋白產生，得脫蛋白上清液；

7)將脫蛋白上清液加5倍量無水乙醇后，于4℃靜置12小時，離心所得沉淀物加等量蒸餾水溶解，于4℃透析2天，再加5倍量無水乙醇，4℃靜置12小時，離心后將沉淀冷凍干燥，得牛樟芝多糖。

抗氧化實驗結果表明，利用本實施例種方法所得牛樟芝菌絲體多糖的清除OH-自由基的能力為30.5％。而在超氧自由基的清除能力方面，當牛樟芝菌絲體多糖的濃度達2g/L時，超氧自由基的清除率達到90.8％。