[發明專利]一種沉香葉中黃酮的提取方法

在審

• 申請號: 201410846008.X
• 申請日: 2014-12-31
• 公開（公告）號: CN104644880A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發明（設計）人: 竇志浩;段宙位;謝輝;張容鵠;何艾;萬祝寧
• 申請（專利權）人: 海南省農業科學院農產品加工設計研究所
• 主分類號: A61K36/835
• 分類號: A61K36/835
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司 44218
• 代理人: 楊建新

技術領域

?本發明涉及黃酮類化合物的提取領域，特別是指一種沉香葉中黃酮的提取方法。

背景技術

近年來，關于黃酮類物質的提取報道，主要有溶劑萃取法、堿性稀醇提取法、微波輔助提取法、超聲波輔助提取法等。酶法（主要是纖維素酶、果膠酶、蛋白酶等）作為提取生物活性成分的新興技術得到了廣泛的應用，具有反應條件溫和、效率高、無毒性等優點。如中國發明專利CN101838255A公開了楊梅黃酮提取工藝，制得的楊梅黃酮純度可達80%，得率在15%左右。

沉香為瑞香科植物沉香（Aquilaria?agallocha?Roxb.）或白木香（Aquilaria?sinensis?(Lour.)Gilg）含黑色樹脂的木質部，前者主要產于印度和馬來西亞等國，稱為進口沉香，后者主要分布于我國海南、廣東、廣西等省區，稱為國產沉香，也稱海南沉。沉香為珍貴瀕危的中藥材，醫用價值高，具有行氣止痛，溫中止嘔，納氣平喘的功效。海南沉香種植面積較大，自2006年啟動5萬畝“萬畝人工種植沉香”工程后，據不完全統計，2013年海南沉香種植面積達3萬畝，約300萬株，沉香種植量呈增長的趨勢。沉香樹在種植過程中，需要及時修枝、剪枝，以促進其快速生長，在此過程中產生大量的副產物——沉香葉。這些葉子絕大部分被丟棄，造成資源的極大浪費。據報道沉香葉中含有多糖、氨基酸、黃酮及苷類、酚類物質，這些化學物質具有多種生物活性。如黃酮類化合物具有鎮痛、便秘、抗炎、降血糖、抗腫瘤等作用，應用前景廣闊。

發明內容

本發明提出了一種沉香葉中黃酮的提取方法，具有反應條件溫和、效率高、無毒性等優點。

本發明的技術方案是這樣實現的：

一種沉香葉中黃酮的提取方法，包括以下步驟：

（1）沉香葉預處理

將沉香葉干燥，粉碎，備用；

（2）提取液的制備

粉碎的沉香葉加入乙醇，調節PH值至4.5-5.5，加入纖維素酶酶解制得酶解液；酶解液過濾除去雜質，得黃酮提取液；

????（3）提取液濃縮干燥

????濃縮黃酮提取液濃縮至原體積的1/8-1/6得濃縮提取液；濃縮提取液經過常規減壓濃縮和真空干燥得黃酮粗提物；

（4）黃酮粗提物的純化

????將步驟（3）所得的黃酮粗提物加乙醇溶解，過D201樹脂純化黃酮粗提物得解吸液；所得解吸液濃縮至原解吸液體積的1/8-1/6后，在4℃-6℃條件下靜置，用濾膜過濾得濾液，濾液干燥得黃酮提取物；

????（5）黃酮提取物純化

????將步驟（4）所得的黃酮提取物用甲醇浸取，至黃酮提取物不再溶解為止，合并浸取液，干燥得沉香葉黃酮。

進一步，所述步驟（1）沉香葉干燥溫度為50℃-55℃，干燥至含水量≤12%，粉碎過50-60目篩。

進一步，所述步驟（2）沉香葉的加入量為每100mL乙醇加入3-5?g沉香葉；所用乙醇體積濃度為60-80%（v/v）。

進一步，所述步驟（2）酶解過程中控制溫度50-60℃，纖維素酶添加量為200-300U/g，酶解時間2-4?h。

進一步，所述步驟（2）酶解液用0.28?μm的濾膜過濾除去雜質。

進一步，所述步驟（4）中，D201樹脂純化黃酮粗提物的條件為：上樣液pH值為4.0-4.5，上樣流速1.5-2.0?mL/min；解吸劑為60%（v/v）乙醇，解吸液pH值為9.0-9.5，解吸速度1.0-1.5?mL/min。

進一步，所述步驟（4）中解吸液濃縮過程中控制溫度在50℃-55℃。

進一步，所述步驟（4）中解吸液靜置時間為16-24?h。

????進一步，所述步驟（3）、（4）和（5）中干燥方法為真空干燥或冷凍干燥。

本發明的有益效果：

本發明利用廢棄的沉香葉為原料提取黃酮化合物，以乙醇為提取液，并在提取液中添加纖維素酶破壞沉香葉中的纖維類結構，促進黃酮類化合物的溶出，縮短黃酮的提取時間，提高了沉香葉黃酮的得率，操作簡便。采用本發明提供的提取方法，利用廢棄的沉香葉為原料，提高了沉香葉的利用率，避免沉香資源的浪費；提取條件溫和，避免了高溫對沉香葉中黃酮化合物的破壞，黃酮得率顯著提高。本發明提供的沉香葉中黃酮的提取方法開辟了沉香葉廢棄物再利用的新途徑，對于綜合開發、利用沉香資源具有重大的實際意義。

具體實施方式