[發明專利]一種從柿葉中提取小分子柿葉黃酮的方法

有效

• 申請號: 201410844254.1
• 申請日: 2014-12-30
• 公開（公告）號: CN104606276B
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: 劉小峰;何明茜;羅知頌;李京生;劉二偉
• 申請（專利權）人: 桂林得坤生物科技股份有限公司
• 主分類號: A61K36/44
• 分類號: A61K36/44;A61K127/00
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 林培

1.一種從柿葉中提取小分子柿葉黃酮的方法，其特征在于，包括以下制備步驟：

(1)將柿葉除雜、洗凈、破碎；

(2)加入柿葉重量4～7倍水，調節pH至3.5～5.0，升溫至40～55℃，然后再加入柿葉重量0.1～0.5％的復合酶，所述復合酶為果膠酶和纖維素酶的混合物，酶解3～5小時，得到酶解液；

(3)再將酶解液過濾，加水，回流提取3次，每次60～120min，每次的提取溫度都控制在90～100℃，合并提取液，蒸干，得到柿葉黃酮粗品；

(4)將正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水按體積比4:1:2:5混合，搖勻，靜置分層，平衡分層后，溶液分為上下相，下相作為固定相，上相作為流動相；

(5)取步驟(3)得到的柿葉黃酮粗品溶解于15～25倍體積的流動相中，得到樣品溶液；

(6)將固定相以25～30ml/min流速裝滿色譜分離柱，以600～680rpm轉速開啟逆流色譜儀主機，將流動相以4～6ml/min流速泵入色譜柱內，待流動相平衡后，取樣品溶液通過進樣閥進樣，然后根據紫外色譜圖，在580nm波長下，收集目的組分，分別減壓蒸干，得到小分子柿葉黃酮。

2.根據權利要求1所述的從柿葉中提取小分子柿葉黃酮的方法，其特征在于：步驟(2)中，果膠酶和纖維素酶的重量比為2:3。

3.根據權利要求1所述的從柿葉中提取小分子柿葉黃酮的方法，其特征在于：步驟(3)回流提取過程中，第一次加水量為酶解液重量的6～8倍，第二次加水量為酶解液重量的5～7倍，第三次加水量為酶解液重量的4～6倍。