[發(fā)明專利]一種蛹蟲草中蟲草素的提取方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410842829.6 | 申請日： | 2014-12-30 |
| 公開（公告）號： | CN104592336A | 公開（公告）日： | 2015-05-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 季延濱;李濤 | 申請（專利權(quán)）人： | 芝圣（天津）生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07H19/16 | 分類號： | C07H19/16;C07H1/08 |
| 代理公司： | 天津諾德知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 12213 | 代理人： | 張杏珍 |
| 地址： | 300385 *** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 蟲草 提取 方法 | ||
1.一種蛹蟲草中蟲草素的提取方法，其特征在于：包括以下步驟：
步驟一，將蛹蟲草培養(yǎng)基或菌體樣品充分粉碎，加水混合，真空條件下超聲提取，將混合液過濾后得到粗提液；
步驟二，將所述粗提液進行沉降處理，收集上清液，經(jīng)過微孔濾膜進行精濾，得濾液；
步驟三，將所述濾液經(jīng)反相ODS填料柱吸附，而后依次用水、甲醇水溶液和甲醇洗脫，同時使柱子再生，對洗脫液進行HPLC檢測，收集檢測有蟲草素的洗脫液，得提純液；
步驟四，對所述提純液進行真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得蒸發(fā)濃縮液，將蒸發(fā)濃縮液置于1～5℃下結(jié)晶，抽濾后將得到的晶體溶于純化水中，進行重結(jié)晶，得蟲草素晶體，最后將所述蟲草素晶體經(jīng)低溫冷凍干燥后即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛹蟲草中蟲草素的提取方法，其特征在于：所述步驟一中水的pH值為4-5，所述蛹蟲草培養(yǎng)基或所述菌體樣品與水的體積比為1∶8-30。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛹蟲草中蟲草素的提取方法，其特征在于：所述步驟一超聲次數(shù)為2-5次，每次超聲間隔10-15分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛹蟲草中蟲草素的提取方法，其特征在于：所述步驟二中微孔濾膜的孔徑為3-5μm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛹蟲草中蟲草素的提取方法，其特征在于：所述步驟三濾液經(jīng)反相ODS填料柱吸附，每升所述濾液添加20-60g的填料，而后依次用5-15個柱體積的水、5-15個柱體積的甲醇水溶液和甲醇洗脫，同時使柱子再生，所述甲醇水溶液為體積百分比5-30％的甲醇水溶液，DS填料粒徑小于等于150μm。
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