[發(fā)明專利]一種尿素快速檢測試劑盒及檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410830036.2
• 申請日: 2014-12-25
• 公開（公告）號: CN104535711A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃報(bào)亮;吳清平;鄧金花;李方方
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司
• 主分類號: G01N31/22
• 分類號: G01N31/22;G01N21/78
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 鄭瑩

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種尿素快速檢測試劑盒及檢測方法，具體涉及一種快速檢測游泳池水中尿素濃度的試劑盒及檢測方法。

背景技術(shù)

相關(guān)研究表明，游泳池中的尿素主要來源是人排出的尿液，其中近87%的成分為尿素。除此以外，汗液中也會(huì)含有少量尿素。由此可見，正是由于泳池水中尿素的特殊來源渠道，在泳客集中的夏季，泳池負(fù)荷大大增加，泳池水中尿素超標(biāo)的情況頻發(fā)；而水中尿素含量的多少，也可以作為反應(yīng)泳池水受污染程度的一項(xiàng)客觀指標(biāo)。至于尿素的危害，實(shí)際上，作為人體正常的代謝產(chǎn)物，泳池水中極低濃度的尿素并不會(huì)對人體造成直接的致病危害。此外，尿素與消毒劑余氯的直接反應(yīng)較難以發(fā)生，也不會(huì)影響消毒劑的消毒效率。但是考慮到尿素依然能夠通過反應(yīng)轉(zhuǎn)化為氨氮，并進(jìn)一步生成影響消毒效果的氯胺，同時(shí)考慮泳客的健康用水心理，也為了避免尿素成為泳池中滋生藻類與細(xì)菌的營養(yǎng)氮源，應(yīng)當(dāng)對泳池中的尿素濃度進(jìn)行嚴(yán)格控制，因此，建立一種簡單快速的公共場所，特別是游泳池水尿素濃度測定的方法顯得尤為重要。

已有一些測定游泳池水中尿素的方法，如：二乙酰一肟-安替比林法，鄰苯二甲醛法，OPA法，脲酶-Berthlot法等。其中脲酶-Berthlot法有選擇性好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，但該法實(shí)際應(yīng)用時(shí)常因游泳池水中加入的抑藻劑硫酸銅和消毒劑余氯導(dǎo)致脲酶變性而嚴(yán)重干擾測定。發(fā)明人通過實(shí)驗(yàn)證明，余氯對脲酶活性的影響很大，當(dāng)余氯濃度大于0.1mg/L時(shí)即會(huì)使脲酶失活。迄今尚未見該法中有效消除Cu²⁺和余氯干擾的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中所存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種尿素快速檢測試劑盒及檢測方法。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

一種尿素快速檢測試劑盒，其包括試劑Ⅰ、試劑Ⅱ、試劑Ⅲ和試劑Ⅳ，其中：

所述試劑Ⅰ包括EDTA二鈉和海藻糖；

所述試劑Ⅱ?yàn)殡迕福?/p>

所述試劑Ⅲ包括無水檸檬酸、水楊酸鈉和硝普鈉；

所述試劑Ⅳ包括氫氧化鋰、二氯異氰尿酸鈉和無水硫酸鈉。

作為優(yōu)選的，所述試劑Ⅰ中，EDTA二鈉和海藻糖溶于pH=7.4～7.6的磷酸緩沖溶液中，EDTA二鈉的濃度為0.03～0.05g/mL，海藻糖的濃度為0.015～0.025g/mL。

作為優(yōu)選的，所述試劑Ⅱ中，脲酶用水溶解后，加入丙三醇，配制成濃度為100-150?U/mL的脲酶溶液。

進(jìn)一步優(yōu)選的，所述脲酶溶液的濃度優(yōu)選為100U/mL。

作為優(yōu)選的，所述試劑Ⅲ中，無水檸檬酸、水楊酸鈉和硝普鈉的質(zhì)量比為85：10：5。

作為優(yōu)選的，所述試劑Ⅳ中，氫氧化鋰、二氯異氰尿酸鈉和無水硫酸鈉的質(zhì)量比為50：10：40。

作為優(yōu)選的，所述試劑盒中還包括一標(biāo)準(zhǔn)比色卡。所述標(biāo)準(zhǔn)比色卡的制備方法如下：

1）用純水配制濃度分別為0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L、3.5mg/L、5.0mg/L、8.0mg/L的尿素標(biāo)準(zhǔn)溶液；

2）分別取各濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液10mL至比色瓶中，滴加2滴試劑Ⅰ搖勻；

3）滴加2滴試劑Ⅱ，搖勻，靜置5分鐘；

4）加入試劑Ⅲ，搖勻，靜置2分鐘；

5）加入試劑Ⅳ，搖勻，靜置15分鐘；

6）反應(yīng)完畢，獲得各濃度的尿素標(biāo)準(zhǔn)溶液顯色時(shí)所呈現(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)色，根據(jù)得到的各潘通標(biāo)準(zhǔn)色所列色值采用電腦調(diào)色和印制，得到標(biāo)準(zhǔn)比色卡。

以上所述的尿素快速檢測試劑盒在檢測游泳池水尿素濃度中的應(yīng)用。

一種快速檢測游泳池水中尿素濃度的方法，包括如下步驟：

1）取10mL待檢溶液于比色瓶中，加入2～3滴試劑Ⅰ，搖勻；所述試劑Ⅰ是由EDTA二鈉和海藻糖溶于pH=7.0～8.0的磷酸緩沖溶液中，，EDTA二鈉的濃度為0.03～0.05g/mL，海藻糖的濃度為0.015～0.025g/mL；

2）往步驟1）所得的溶液中加入2～3滴試劑Ⅱ，搖勻，靜置1～10分鐘；所述試劑Ⅱ是濃度為100-150?U/mL的脲酶溶液；

3）加入試劑Ⅲ，搖勻，靜置1～5分鐘；所述試劑Ⅲ由質(zhì)量比為85：10：5的無水檸檬酸、水楊酸鈉和硝普鈉組成；

4）加入試劑Ⅳ，搖勻，靜置10～20分鐘，所述試劑由質(zhì)量比為50：10：40的氫氧化鋰、二氯異氰尿酸鈉和無水硫酸鈉組成；

5）反應(yīng)完畢后，將反應(yīng)液置于比色計(jì)中測OD值結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測溶液中尿素含量，又或者，將比色瓶與比色卡顏色進(jìn)行比對即可得所測水樣尿素濃度mg/L。