[發(fā)明專利]一種具備超濾和固相萃取雙重凈化作用的功能化移液槍頭及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410828524.X
• 申請日: 2014-12-26
• 公開（公告）號(hào): CN104549593B
• 公開（公告）日: 2019-06-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王娜妮;壽旦;黃孝聞
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省中醫(yī)藥研究院
• 主分類號(hào): B01L3/02
• 分類號(hào): B01L3/02;B01D61/18;B01D15/10;G01N1/34
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務(wù)所有限公司 33214
• 代理人: 徐金杰

1.一種進(jìn)行生物樣本中中藥活性成分的樣品預(yù)處理及定量分析方法，其特征該方法包括以下步驟：

1）中空纖維膜（3）與固相萃取材料（2）的選擇，并制備功能化槍頭；該槍頭包括移液槍頭（1）、固相萃取材料（2）和中空纖維膜（3），所述的移液槍頭（1）為錐形結(jié)構(gòu)，所述的中空纖維膜（3）設(shè)置在移液槍頭（1）的尖端內(nèi)部，并通過設(shè)置膠水（4）均勻涂抹于移液槍頭（1）尖端與中空纖維膜（3）交接處，所述的中空纖維膜（3）具有上、下兩端口，所述的上端口密封，下端口凸出尖端設(shè)置并保持開口狀態(tài)，所述的固相萃取材料（2）設(shè)置在所述的移液槍頭（1）內(nèi)部并完全覆蓋中空纖維膜（3）；

2）活化功能化移液槍頭 將步驟1）的功能化移液槍頭連接在移液槍上；通過移液槍，吸取色譜純甲醇，通過多次吸取排出甲醇沖洗移液槍頭；再吸取去離子水，同樣重復(fù)吸取排出去離子水沖洗移液槍頭，即活化完成，得到活化的功能化移液槍頭；

3）取樣 用步驟2）的活化槍頭，通過移液槍，吸取0.1-1 mL待測樣品溶液，通過反復(fù)吸取、排出同一待測樣品的步驟，使目標(biāo)物質(zhì)被充分吸附于固相萃取材料上，最后一次將萃取完成的樣品廢液排出后，得到吸附目標(biāo)物質(zhì)的槍頭；

4）凈化 用步驟3）的槍頭，通過移液槍，吸取去離子水，通過反復(fù)吸取、排出步驟，最后一次將移液槍頭內(nèi)的液體充分排空，去除雜質(zhì)，得到初步凈化的功能化槍頭；

5）洗脫并富集 取步驟4）的槍頭，通過移液槍，吸取一定體積的洗脫液，吸取后將移液槍頭靜置5-30 min，靜置過程確保洗脫液無滲漏，然后將移液槍頭內(nèi)的液體排除，收集洗脫液，裝入樣品瓶即得到供試品溶液，供含量測定；如果洗脫液體積等于待測樣品取樣體積，則功能化槍頭發(fā)揮純化待測目標(biāo)物質(zhì)的作用；如果洗脫液體積小于待測樣品取樣體積，則具有富集作用，可以通過公式計(jì)算待測目標(biāo)物質(zhì)富集系數(shù)；

6）目標(biāo)物質(zhì)定量分析 取步驟5）的供試品溶液，直接注入分析儀器中，選擇優(yōu)化的分離條件，進(jìn)行含量分析，同時(shí)配制待測物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液，記錄標(biāo)準(zhǔn)品及供試品溶液的色譜或質(zhì)譜峰面積；

7）目標(biāo)物質(zhì)含量測定結(jié)果 根據(jù)步驟6）標(biāo)準(zhǔn)品及供試品溶液的色譜或質(zhì)譜峰面積，計(jì)算生物樣品中待測物質(zhì)的含量，當(dāng)功能化槍頭富集樣品時(shí)，樣品的濃度應(yīng)根據(jù)富集系數(shù)折算實(shí)際濃度。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種進(jìn)行生物樣本中中藥活性成分的樣品預(yù)處理及定量分析方法,其特征在于：所述的中空纖維膜（3）下端口凸出尖端的長度為0.2-0.6 cm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種進(jìn)行生物樣本中中藥活性成分的樣品預(yù)處理及定量分析方法,其特征在于：所述的中空纖維膜（3）形狀為圓柱體，長度0.5 -2 cm，內(nèi)徑200 -1000 μm，外徑500- 2000 μm，膜壁孔徑0.1-0.5 μm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種進(jìn)行生物樣本中中藥活性成分的樣品預(yù)處理及定量分析方法,其特征在于：所述的中空纖維膜（3）材料選自聚丙烯、混合纖維酯、硝酸纖維素、聚偏氟乙烯、醋酸纖維素、再生纖維素、聚酰胺、聚四氟乙烯和聚氯乙烯中一種或多種混合。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種進(jìn)行生物樣本中中藥活性成分的樣品預(yù)處理及定量分析方法，其特征在于：所述的膠水（4）為環(huán)氧膠水。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種進(jìn)行生物樣本中中藥活性成分的樣品預(yù)處理及定量分析方法,其特征在于：所述的固相萃取材料（2）為具有吸附能力的固體粉末，微粒直徑2-50μm；所述的固相萃取材料（2）質(zhì)量范圍為5-200 mg。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種進(jìn)行生物樣本中中藥活性成分的樣品預(yù)處理及定量分析方法,其特征在于：所述的固相萃取材料（2）材料選自反相材料、正相材料或離子交換材料。