[發明專利]一種2-甲氧基雌二醇白蛋白納米凍干劑制備方法及其應用

在審

• 申請號: 201410822045.7
• 申請日: 2014-12-26
• 公開（公告）號: CN104546741A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發明（設計）人: 張楠;王培;張振中;徐霞;郭曉靜;魯春云;侯瑞瑞;李佳;張紅嶺;夏亞丹;王維嘉;陳燕;牛利鋒;高書林
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: A61K9/19
• 分類號: A61K9/19;A61K31/565;A61K47/42;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

技術領域

本發明涉及醫藥，特別是一種2-甲氧基雌二醇白蛋白納米凍干劑制備方法及其應用。

背景技術

2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol，2-ME)是20世紀70年代研究雌激素代謝過程時，在人體內發現的雌二醇的天然代謝產物，屬新型激素類抗腫瘤藥物。近期，通過對其藥理作用的研究表明，2-ME能誘導內皮細胞的凋亡，擾亂微血管的生成，抑制新生血管的生成，是較好的新生血管形成抑制劑。進一步研究表明，其在體內外對多種腫瘤均有良好的抑制作用，已用于多發性骨髓瘤、前列腺癌和乳腺癌的治療，同時該化合物不依賴雌激素受體，無雌激素作用。目前，2-ME對實體瘤的研究已處于臨床研究階段。

2-ME在實際臨床應用中仍存在諸多問題，如藥物的低溶解度、口服吸收無規律、肝首過代謝作用強、半衰期短、生物利用度低等，大大影響了2-ME的治療效果。為了得到一種給藥次數少、生物利用度高、穩定性好、制備簡單，有利于患者使用的制劑，提高2-ME靶向性及其治療效果，以減少其毒副作用，具有非常重要的臨床意義。

納米粒(nanoParticles)是利用天然高分子或合成的化學物質為載體制成的載藥微粒，納米粒子對腫瘤的增強滲透和滯留效應，使更多藥物被動靶向而濃集于腫瘤組織，提高其抗腫瘤效果。

白蛋白(bovineserumalbumin,BSA)是一種天然高分子載體材料，具有安全無毒、免疫原性低、可生物降解、生物相容性好、易于修飾、價格低廉等優點，是一種優良的藥物載體，其分子中氨基酸以肽鍵相連接，并且扭曲成團狀，具有無數的網狀空隙，為鑲嵌攜帶藥物創造了有利的空間條件。

冷凍干燥在低溫下進行，使得制劑中的一些揮發性成分損失小，微生物的生長和酶的作用無法進行，因此能保持制劑原有性狀，且體積幾乎不變，不會發生濃縮現象。干燥能排除95-99%以上的水份，使干燥后產品能長期保存而不致變質。因此將所制得的2-ME白蛋白納米粒進行凍干以得到粉針劑，旨在得到穩定好、治療效果優的2-ME白蛋白納米凍干制劑。那么如何制備2-甲氧基雌二醇白蛋白納米凍干劑，并實現在制備治療腫瘤藥物中的應用，是亟待解決的技術問題。

發明內容

針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種2-甲氧基雌二醇白蛋白納米凍干劑制備方法及其應用，可有效解決2-甲氧基雌二醇白蛋白納米凍干劑的制備，并實現在制備治療腫瘤藥物中的應用問題。

本發明解決的技術方案是，本發明2-甲氧基雌二醇白蛋白納米凍干劑的制備方法包括以下步驟：

（1）、將2-甲氧基雌二醇（簡稱2-ME）溶解在有機溶劑無水乙醇中，制成2-甲氧基雌二醇重量濃度為1-5mg/ml的溶液A；

（2）、將牛血清白蛋白（BSA）溶解于超純水中，制成牛血清白蛋白重量濃度20-60mg/ml的溶液B，加入表面活性劑，表面活性劑的加入量為溶液B重量的1/2000-5000，攪拌混勻，用NaOH溶液調節pH值8-10；

所述的表面活性劑為吐溫-20（Tween-20）、聚乙二醇-200（PEG-200）、聚乙二醇-400（PEG-400）、泊洛沙姆188中的任意一種或兩種以上任意量的組合；

（3）、將溶液A以0.05-1.0ml/min的流速加入到溶液B中，溶液A和溶液B的體積比為2-3︰1，形成混合溶液C；

（4）、在混合溶液C中加入交聯劑質量濃度為8%的戊二醛，混合溶液C與質量濃度為8%的戊二醛的體積比為10-100︰1，用磁力攪拌器攪拌均勻后，靜置固化；

（5）、將固化得到的制劑旋蒸去除有機溶劑，形成納米溶液D；

（6）、在納米溶液D中加入凍干保護劑，凍干保護劑與納米溶液D的重量比為10-30︰1，冷凍干燥去除水分，即為2-ME白蛋白納米凍干制劑；

所述的凍干保護劑為蔗糖，乳糖，甘露醇，海藻糖，葡萄糖的一種或兩種以上任意量的組合。

2-甲氧基雌二醇白蛋白納米凍干劑具有抑制或凋亡癌細胞的功效，有效用于癌癥的治療用藥，實現2-甲氧基雌二醇白蛋白納米凍干劑在制備治療癌癥藥物中的應用。

本發明方法簡單，易生產制備，穩定性好，藥效長，治療癌癥靶向性強，能夠保護藥物免受環境影響，起效快，負作用小，給藥次數少、生物利用度高、穩定性好、制備簡單，有利于患者使用，提高2-ME靶向性及其治療效果，減少毒副作用，具有非常重要的臨床意義，有效用于制備治療癌癥的藥物，有巨大的經濟和社會效益。

附圖說明