[發明專利]一種制備司他霉素的方法

有效

• 申請號: 201410813640.4
• 申請日: 2014-12-24
• 公開（公告）號: CN104480157B
• 公開（公告）日: 2018-06-22
• 發明（設計）人: 蔣世春;滕云;江連清
• 申請（專利權）人: 浙江海正藥業股份有限公司
• 主分類號: C12P17/16
• 分類號: C12P17/16;C12R1/465
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明還提供了制備司他霉素的方法，該方法包括可產生司他霉素的鏈霉菌在含有可利用的碳源、可利用的氮源和3?羥基?4?氨基丁酸的發酵培養基里發酵的步驟，和在發酵中途向發酵培養基里中加入植物油的步驟。本方法具有效價高，終產物易于提取等優點，克服了原工藝發酵產率低，粘度大，糊狀，過濾不清，收率低，損失大的異常現象。

技術領域

本發明涉及生物制藥領域，尤其涉及一種發酵制備司他霉素的方法。

背景技術

司他霉素是由鏈霉菌Streptomyces netropsis或S.distallicus產生的抗生素，其鹽酸鹽為黃白色結晶性粉末，分子式為C₂₂H₂₇N₉O₄HCL，分子量為517.975，熔點184～187℃。溶于水，不溶于有機溶劑。本品應在避光防潮條件下儲存。司他霉素對革蘭氏陽性菌、真菌、病毒有抑制作用，其作用機理主要是抑制DNA的合成。司他霉素主要用于由單純皰疹、帶狀皰疹、牛痘病毒等引起的皮膚和黏膜感染。也是具有一定抗癌活性的低聚肽類抗生素，它能與DNA的特定序列進行親合并識別DNA，它基于對小分子靶向序列的表達和基因開關的控制，可作為抗瘧疾藥物和抗血管生成藥物。司他霉素是臨床應用的一類低毒高效抗生素，國內研究甚少，產品主要來自進口。Arcamone,F；Penco,S；Orezzi,P.G；Nicolella,V；Pirelli,A.Nature1964,203,1064；Michaelw.Van Dyke,Robert P.Hertzberg PeterB.Dervian Proc.Natl.Acad.sci.USA1982,79:5470-5474；Stockert JC,Castillo P DBella JL.DNA-induced distamycin A fluorescence.Histochemistry,1990.94:45-47；Baliga R,Crothers DM.The Kinetic basis for sequence discrimination bydistamycin A Jam Chem soc 2000.122:11751-11752等文獻描述了有關司他霉素及其類似物的理化性質與抗腫瘤活性等內容。意大利法瑪西雅公司的發明專利(公開號CN1468099A)描述了多種司他霉素衍生物的抗腫瘤療效，拓寬了司他霉素的應用前景。Horiet al研究了司他霉素誘發脆性位點的性質，為人類因受應激因素產生的染色體不穩定性提供了一個線索。中國專利(公開號CN86104774A)描述了有關司他霉素衍生物制備方法。但國內外文獻未見報道有關制備司他霉素的先進發酵方法。目前的司他霉素生產工藝，因發酵水平低，工藝尚未完善，菌種優良特性不易充分表達，導致司他霉素效價低，產量波動大，收率低，成本高等缺點。蔣世春等遠端霉素高產菌株的選育(激光生物學報，2014，23(2)，189-192)通過誘變獲得突變株Streptomyces distallicus DZ206，其產率較出發菌株Streptomyces distallicus D32提高1.38倍，提供了一種提高司他霉素生產水平的途徑，由于沒有進一步優化發酵工藝，Streptomyces distallicus DZ206菌種潛力得不到充分挖掘，對大幅度提高產量有局限，因此尋找一種高效的制備司他霉素方法的工作仍然在繼續進行中。

發明內容

本發明還提供了一種高效制備司他霉素的方法，該方法包括：可產生司他霉素的鏈霉菌在含有可利用的碳源、可利用的氮源和3-羥基-4-氨基丁酸的發酵培養基里發酵的步驟，和在發酵中途向發酵培養基中加入植物油的步驟。

在優選的實施方案中，其中所述可產生司他霉素的鏈霉菌優選自鏈霉菌Streptomyces distallicus NRRL NO.2886，鏈霉菌Streptomyces distallicus D32，鏈霉菌Streptomyces distallicus DZ206。

在優選的實施方案中，其中所述的3-羥基-4-氨基丁酸(其結構如下所示，以下簡稱HABA)在發酵培養基中的重量濃度為0.005％-0.05％，更優選為0.01％。