[發(fā)明專利]一種提高硫酸軟骨素純度的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201410813502.6
• 申請日: 2014-12-24
• 公開（公告）號: CN104448041A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發(fā)明（設計）人: 劉冠男;郭利;夏襯來
• 申請（專利權）人: 青島九龍生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明屬于生物制藥領域，具體涉及一種提高硫酸軟骨素純度的方法。

背景技術

硫酸軟骨素(chondroitin?sulfate，CS)?又名牛磺軟骨素、康得寧，是哺乳動物結締組織的主要成分之一，多分布于軟骨、鼻骨、喉骨、韌帶、肌膜中。

CS?在臨床上主要用于治療神經痛、關節(jié)炎、耳鳴以及促進潰瘍愈合和防治高血脂等，動物口服后未發(fā)現(xiàn)臨床毒性癥狀。CS?也廣泛應用于食品、化妝品行業(yè)。近年來，硫酸軟骨素作為一種新型藥用活性成分，在醫(yī)藥制劑、醫(yī)學材料、日化產品、化妝品、生發(fā)劑、保健品等領域應用廣泛，越來越受到人們的重視，市場需求趨旺。

目前，硫酸軟骨素普遍提取的方法主要有鹽解、堿解、酶解法以及堿?-?酶法，其分離純化的方法有乙醇沉淀法、離子交換色譜法、季銨鹽配合法、吸附法和纖維素分離法等。但是上述方法在現(xiàn)有生產工藝中普遍存在一個問題:?生產工藝繁瑣不易操作、堿酸乙醇使用量大、硫酸軟骨素純度不高、生產成本高昂，生產周期較長，產率低并且污染嚴重，不適合企業(yè)規(guī)模化生產需求。

實踐中，由于制備硫酸軟骨素的原料軟骨原料表面附著許多脂肪和肌肉組織，這些組織往往成為了硫酸軟骨素提取的主要雜質，又加上硫酸軟骨素本身比較粘稠，這就使得硫酸軟骨素的提取過濾非常困難，這也就直接導致規(guī)模化生產硫酸軟骨素過濾效率低，生產周期長。本發(fā)明人經多方研究，通過超聲波輔助，探索得出一種由超聲波輔助提取的堿-酶法提取硫酸軟骨素。

發(fā)明內容

本發(fā)明提供一種提高硫酸軟骨素純度的方法，以期在縮短硫酸軟骨素生產周期，簡化生產工藝過程的同時提高硫酸軟骨素的純度，使得硫酸軟骨素的生產適合現(xiàn)代企業(yè)的規(guī)模化生產，為企業(yè)和社會創(chuàng)造更大的經濟效益。

為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明一種提高硫酸軟骨素純度的方法，該方法實施的具體步驟為：

（1）軟骨和純水以1:1-1:2?的重量比例混合，將水煮沸10-15min，去除表面油殘留物自然風干后粉碎；

（2）將粉碎后的軟骨至于堿性條件下超聲處理2-2.5h；

（3）按照一定的比例加入木瓜蛋白酶，于50-60℃，pH6.5-7.0條件下酶解反應1h?；升溫到90℃滅酶；

（4）按照一定的比例加入胃蛋白酶，于30-50℃，pH6.5-7.0條件下酶解反應1.5-2h?；升溫到90℃滅酶；

（5）過濾，取濾液，向濾液中加入乙醇溶液，使得乙醇體積分數(shù)達到60-70%，沉降1h?；

（6）將步驟（5）中的沉降液離心，取沉淀，抽濾,用乙醇洗滌1-2次,?置于恒溫干燥箱中干燥，得到硫酸軟骨素。

所述的步驟（1）中，堿性條件為6%的NaOH溶液。

所述的步驟（2）中，軟骨與純水的重量比例為：1:1.5。

所述的步驟（3）中，木瓜蛋白酶占軟骨的重量的0.5%，酶解反應的條件是：溫度55℃，pH6.8。

所述的步驟（4）中，胃蛋白酶占軟骨重的0.5%，于40℃，pH?6.8的條件下酶解反應1.5h。

所述的步驟（6）中，將沉降液離心的條件是:?轉速為6000rpm，離心時間為10-15min；干燥溫度為60℃。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點：

1.本方法制備的硫酸軟骨素純度高、質量好。

2.本方法工藝簡單，容易操作，適合企業(yè)規(guī)模化生產。

具體實施方式

實施例1

?一種提高硫酸軟骨素純度的方法，本發(fā)明包括下述生產工藝：

（1）軟骨和純水以1:1的重量比例混合，將水煮沸12min，去除表面油殘留物自然風干后粉碎；

（2）將粉碎后的軟骨浸于6%的氫氧化鈉溶液中超聲處理2h；

（3）按照木瓜蛋白酶與軟骨的重量比為1:200的比例加入木瓜蛋白酶，于50℃，pH6.5條件下酶解反應1h?；升溫到90℃滅酶15min；

（4）按照胃蛋白酶與軟骨的重量比為1:200的比例加入胃蛋白酶于45℃，pH6.5條件下酶解反應1.5；升溫到90℃滅酶15min；

（5）過濾，取濾液，向濾液中加入乙醇溶液，使得乙醇體積分數(shù)達到70%，沉降1h?；

（6）將步驟（5）中的沉降液在轉速6000rpm下離心10min，取沉淀，抽濾,用乙醇洗滌1-2次,?置于恒溫干燥箱中于60℃干燥，得到硫酸軟骨素。

在該條件下,所得硫酸軟骨素產品的產率為19.8%,純度為88.7%,達到國家標準。

實施例2