[發明專利]具有解鉀作用的草木樨根瘤菌及其應用

在審

• 申請號: 201410802847.1
• 申請日: 2014-12-12
• 公開（公告）號: CN104480048A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 宋水山;宋聰;賈振華;黃媛媛;黃亞麗;馬宏;趙芊
• 申請（專利權）人: 河北省科學院生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05D1/00;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及微生物和化肥化工領域，具體的涉及一種具有解鉀作用的草木樨根瘤菌及其應用。

背景技術

氮磷鉀肥是我國農業生產中需求較大的肥料，尤其是鉀肥資源量較少，目前主要靠大量進口才能滿足國內需要但長期使用化學肥料會使土壤中有效鉀元素大量流失，會破壞正常土壤生態環境，影響農業生產，若能將固化的遲效鉀變成速效鉀即可較好地解決這一問題，而解鉀菌正好具有這樣的作用。

河北省張家口市宣化區煙筒山由于特定的地理位置和地質組成，使當地富鉀頁巖分布廣泛，主要礦物有伊利石、海綠石和鉀長石，其K₂O的含量均在12％左右，鉀資源豐富，然而此地富鉀頁巖由于溶解性差，難以直接作為鉀肥使用，因此，如何將富鉀頁巖制備成可以被植物吸收利用的速效鉀是本領域技術人員亟待解決的技術問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種草木樨中華根瘤菌(Sinorhizobium?meliloti)，優選的，所述的草木樨中華根瘤菌(Sinorhizobium?meliloti)為保藏編號CGMCC?No.8343菌株或其直接傳代物，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。

本發明另一方面還涉及一種含有草木樨中華根瘤菌(Sinorhizobium?meliloti)的菌劑。

本發明另一方面還涉及上述菌劑在解離富鉀頁巖為可被植物吸收利用的鉀肥中的應用。

在本發明的一個優選實施方式中，所述的應用包括如下步驟：

將富鉀頁巖粉碎至200-300目；按重量比取上述粉碎的富鉀頁巖粉與腐植酸，豆餅粉5-7∶2-4∶1混合攪拌，加入上述菌劑和酵素菌，每100公斤混合物加入4-6L解鉀菌發酵液，菌含量為20-50億株/ml，酵素菌1公斤，菌含量為50-100億株/克，加入適量溫水，攪拌均勻后保持溫度28-33℃，濕度60-80％以上，調整PH值至6.5-7，發酵10-20天。

本發明的菌株能夠高效的使此地富鉀頁巖解離為可被植物吸收利用的速效鉀，將大大縮短其生產周期，節約大量的成本，應用前景十分廣闊。

微生物信息

本發明所篩選的解鉀菌32-2為草木樨中華根瘤菌(Sinorhizobium?meliloti)，已經保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號CGMCC?No.8343，保藏地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏日期為2013年10月15日。

具體實施方式

實施例1

1.菌株的分離鑒定

利用選擇培養基從土樣中篩選具有解鉀作用的菌株，從邢臺、張家口等地采集土樣，選用阿須貝培養基和鉀細菌選擇性培養基作為篩選培養基，挑取在二者平板上都能生長的產莢膜的光滑透明油滴狀菌落。將分離到的菌株接種到解鉀培養基(蔗糖10g，Na₂HPO₄1g，(NH₄)₂SO₄0.5g，MgSO₄·7H₂O?1g，FeCl₃·6H₂O?0.005g，CaCO₃0.1g，富鉀頁巖1g，瓊脂18g，蒸餾水1000ml，pH?7.0～7.2。)中，培養15d，原子吸收法篩選發酵液中可溶性鉀的含量高的菌株，最終篩選到高效解鉀菌株32-2，鑒定到屬種，菌種于30％甘油中-70℃保存。

解鉀菌32-2主要生物學特征為：革蘭氏陰性(G-)、不能利用檸檬酸鹽、甲基紅試驗陽性、V-P反應陽性、淀粉水解陽性、吲哚試驗陰性、明膠水解陽性，接觸酶試驗陽性，能發酵葡萄糖、乳糖等。以上特征符合《常見細菌系統鑒定手冊》中關于草木樨中華根瘤菌(Sinorhizobium?meliloti)的描述。

經過進一步的分子生物學鑒定，結合菌株32-2形態特征、生理生化特征，將菌株32-2鑒定為草木樨中華根瘤菌(Sinorhizobium?meliloti)，中國微生物菌種保藏中心登記編號CGMCC?No.8343。

2.生物礦質鉀肥的發酵生產

2.1種子培養