[發明專利]一種快速檢測氨氮脫除率的方法

在審

• 申請號: 201410802045.0
• 申請日: 2014-12-23
• 公開（公告）號: CN104483280A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 姬云濤;屈長青;曹美霞;姜雙林;蘇瑩潔;范海燕
• 申請（專利權）人: 阜陽師范學院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 安徽省阜陽市科潁專利事務所 34108
• 代理人: 徐寶泉

1.一種快速檢測氨氮脫除率的方法，其特征在于：它包括下列步驟：（1）制備濃度50%酒石酸鉀鈉溶液；（2）配制納氏試劑，參照《水質氨氮的測定納氏試劑分光光度法》（HJ535-2009）內容“4.4納氏試劑的配制”中“4.4.1二氯化汞-碘化鉀-氫氧化鉀（HgCI2-KI-KOH）溶液”；（3）制備濃度為1mg/mL的氨氮標準貯備溶液，臨檢測前根據所測樣品氨氮濃度的大小配制相對應濃度的氨氮標準工作液；（4）制定標準曲線；（5）樣品測定，實際操作時用96孔板，同時進行做標準曲線和檢測脫除氨氮前后的樣品，根據所測樣品氨氮不同濃度，設置了高中低三個濃度的氨氮標準工作液，當不能確定樣品中氨氮濃度的大小時，則可以同時用不同濃度的氨氮標準工作液做不同的標準曲線來確定檢測樣品的氨氮濃度，然后通過公式

計算即得到氨氮脫除率值。

2.根據權利要求1所述的快速檢測氨氮脫除率的方法，其中低濃度氨氮的檢測步驟如下：

（1）配制酒石酸鉀鈉溶液

稱取50.0g酒石酸鉀鈉(KNaC₄H₆O₆)?溶于100ml水中，加入3滴25%氫氧化鈉溶液(NaOH，m/v)，加熱煮沸，冷卻后稀釋至100ml，得濃度50%酒石酸鉀鈉溶液；

（2）納氏試劑的配制

二氯化汞—碘化鉀—氫氧化鉀（HgC1₂，-KI-KOH）溶液；

稱取15.0g氫氧化鉀(KOH)，溶于50ml水中，冷卻至室溫；

稱取5.0g碘化鉀（KI），溶于10ml水中，在攪拌下，將2.50g二氯化汞（HgCl₂）粉末分多次加入碘化鉀溶液中，直到溶液呈深黃色或出現淡紅色沉淀溶解緩慢時，充分攪拌混合，并改為滴加二氯化汞飽和溶液，當出現少量朱紅色沉淀不再溶解時，停止滴加；

在攪拌下，將冷卻的氫氧化鉀溶液緩慢地加入到上述二氯化汞和碘化鉀的混合液中，并稀釋至100ml，于暗處靜置24h，傾出上清液，貯于聚乙烯瓶內，用橡皮塞或聚乙烯蓋子蓋緊，存放暗處，可穩定1個月；

（3）制備氨氮標準溶液

①氨氮標準貯備溶液，濃度為1mg/mL；

稱取3.8190g氯化銨（NH4Cl，在100℃-105℃干燥2h），溶于水中，移入1000mL容量瓶中，加水稀釋至1000mL，可在2℃-5℃保存1個月；

②氨氮標準工作溶液，臨用前配制；

吸取0.01mL氨氮標準貯備溶液于10mL容量瓶中，加水稀釋至10mL，濃度為1μg/mL；

（4）標準曲線制定

在96孔培養板中，按順序分別加入0μL、5μL、10μL、20μL、40μL、60μL、80μL和100μL濃度為1μg/mL的氨氮標準工作溶液，各管加無氨水至100μL，加入1.5μL酒石酸鉀鈉溶液，搖勻，再加入納氏試劑2.0μL搖勻，放置10min后，用酶標儀在波長420nm下，以無氨水作參比，測量吸光度，以空白校正后的吸光度為縱坐標，以其對應的氨氮含量（μg）為橫坐標，繪制校準曲線；

（5）樣品氨氮脫除率測定

在做標準曲線的同時，直接取100μL待檢樣品（脫除氨氮前后的樣品），按與校準曲線相同的步驟同時測量吸光度，通過標準曲線得到氨氮含量，計算出氨氮濃度，然后通過公式

計算即得到氨氮脫除率值。